微生物分布與消毒滅菌第一頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解培養(yǎng)基的種類與細(xì)菌的生長現(xiàn)象。2掌握空氣及咽喉部的微生物檢查方法。3掌握皮膚上的微生物檢查與皮膚消毒試驗(yàn)。4掌握紫外線殺菌試驗(yàn)的原理及方法。5掌握細(xì)菌藥敏試驗(yàn)的原理意義及結(jié)果判定。第二頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.培養(yǎng)基的種類與細(xì)菌的生長現(xiàn)象2.細(xì)菌分布（空氣及咽喉部的微生物檢查,操作，每組一份）3.皮膚上的微生物檢查與皮膚消毒試驗(yàn)4.紫外線殺菌試驗(yàn)（操作，每組一份）5.細(xì)菌藥敏試驗(yàn)（操作，每組一份）第三頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)用品

固體、半固體、液體培養(yǎng)基及培養(yǎng)物，菌種，接種環(huán)，酒精燈，蠟筆，37℃培養(yǎng)箱，75﹪酒精棉球，紫外線燈，黑紙片，藥敏紙片，鑷子等。第四頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基的種類及細(xì)菌的生長現(xiàn)象培養(yǎng)基按物理性狀分為固體培養(yǎng)基(2-3%)半固體培養(yǎng)基(0.2-0.5%)液體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基按用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基第五頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二金黃色葡萄球菌菌落（S型菌落）結(jié)核分枝桿菌菌落（R型菌落）肺炎鏈球菌（M型菌落）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落第六頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二菌苔第七頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二半固體培養(yǎng)基：觀察細(xì)菌動力第八頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二液體培養(yǎng)基：可觀察到細(xì)菌不同的生長現(xiàn)象第九頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二細(xì)菌的分布1.原理：細(xì)菌無處不在，在空氣、自來水、土壤、手指、桌面、貨幣、手機(jī)、毛巾等都有細(xì)菌的存在；有普遍或特殊、相同或不同的生長條件2.方法：(1)空氣（把無菌固體培養(yǎng)基打開在空氣中暴露15min，蓋好標(biāo)記，底部朝上放入37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h）

(2)咽喉（把無菌固體培養(yǎng)基打開，對準(zhǔn)，用力咯三下，蓋好標(biāo)記，底部朝上放入37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h）第十頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二皮膚上的微生物檢查與皮膚消毒試驗(yàn)

2方法：(1)把無菌固體培養(yǎng)基底面外用蠟筆劃成10格并記號

(2)5個同學(xué)每人兩格，單號格用未消毒的右手食指在培養(yǎng)基上按手印，雙號格，用75﹪酒精棉球消毒的手指按手印

(3)蓋好標(biāo)記，底部朝上放入37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。1原理：消毒劑對細(xì)菌有毒性作用，使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固等。主要用于人體表面和醫(yī)療器械、周圍環(huán)境的消毒。第十一頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二紫外線殺菌實(shí)驗(yàn)原理

紫外線中波長為200-300nm者具有殺菌能力，其中265-266nm的殺菌作用最強(qiáng)。其殺菌作用主要是因?yàn)镈NA吸收了紫外線引起胸腺嘧啶形成二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制，輕則發(fā)生突變，重則導(dǎo)致死亡。紫外線殺菌力強(qiáng)而穩(wěn)定，但穿透力弱，不能通過玻璃和紙張，因此，只適用于直接照射的物體表面消毒或空氣消毒。第十二頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二紫外線殺菌實(shí)驗(yàn)方法：

1.涂板（先用無菌接種環(huán)取葡萄球菌菌種少許在無菌固體培養(yǎng)基上劃線接種）

2.將涂有細(xì)菌的平板用黑紙片遮住平板中央，放置在距紫外線60-100cm處，直接接受紫外線照射30min；

3.照射完畢，取出黑紙片，蓋好瓊脂平板，放37℃溫箱孵育24h，觀察結(jié)果。第十三頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二第十四頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)的目的：

檢出細(xì)菌對藥物的敏感性，以確定病原細(xì)菌對哪種藥物敏感藥物敏感實(shí)驗(yàn)的臨床意義指導(dǎo)臨床用藥、及時控制感染第十五頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二K-B（紙片擴(kuò)散）法原理抑菌圈藥物可干擾細(xì)菌的代謝，阻礙和影響細(xì)菌細(xì)胞壁的合成、膜的通透性及核酸和蛋白質(zhì)的合成，不同的細(xì)菌種類或菌株，對同一藥物的敏感性不同，通過將藥敏紙片放于已接種細(xì)菌的培養(yǎng)基上，測量其抑制細(xì)菌生長所產(chǎn)生的抑菌圈的大小來判定病原菌對抗菌類藥物的敏感性第十六頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二K-B(紙片擴(kuò)散）法方法無菌接種環(huán)取菌固體培養(yǎng)基上劃線接種放置含藥紙片37℃溫箱孵育24h>24mm>15mm第十七頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二K-B法結(jié)果抑菌圈直徑用毫米尺量取抑菌圈直徑,根據(jù)參照表判斷結(jié)果>24mm>15mm第十八頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二K-B法第十九頁，共二十頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：1觀察液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長現(xiàn)象時不要搖動試管2培