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文檔簡(jiǎn)介
第一節(jié)
透射電子顯微鏡(TransmissionElectronMicroscope)分析測(cè)試中心1本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第1頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分主要內(nèi)容電子顯微鏡概述透射電子顯微鏡及相關(guān)技術(shù)2本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第2頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
電子顯微鏡概述電子顯微鏡發(fā)展史電子顯微鏡的基本類(lèi)型電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)電子顯微鏡的醫(yī)學(xué)應(yīng)用3本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第3頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
電子顯微鏡概述電子顯微鏡:根據(jù)電子光學(xué)原理,用電子束和電磁透鏡代替光束和光學(xué)透鏡來(lái)照射樣品,獲得極高分辨率的顯微鏡,簡(jiǎn)稱(chēng)電鏡。產(chǎn)生基礎(chǔ):
根據(jù)波動(dòng)學(xué)說(shuō),運(yùn)動(dòng)著的電子可以看作是一種電子波。軸對(duì)稱(chēng)分布的電磁場(chǎng)具有能使電子束偏轉(zhuǎn)、聚焦的作用。4本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第4頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
電子顯微鏡概述5本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第5頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分電子束與物質(zhì)的作用俄歇電子感應(yīng)電導(dǎo)入射電子二次電子背散射電子吸收電子樣品特征X射線熒光透射電子
電子顯微鏡概述6本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第6頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分一、電子顯微鏡發(fā)展史1924,DeBroglie提出波粒二象性假說(shuō)1926,Busch發(fā)現(xiàn)電子可由外加電磁場(chǎng)的改變而偏折1933,Knoll和Ruska發(fā)明第一臺(tái)電子顯微鏡(50nm)1935,Knoll第一部掃描電子顯微鏡1938,Ruska第一部透射電子顯微鏡1939,西門(mén)子商用透射電子顯微鏡(10nm)1942,實(shí)驗(yàn)用掃描電子顯微鏡1958,中國(guó)研制成功透射式電子顯微鏡,其分辨本領(lǐng)為3nm1979,大型電子顯微鏡0.3nm
電子顯微鏡概述7本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第7頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分ErnstRuskaGerdBinnigHeinrichRohrer因?yàn)榘l(fā)明EM和STM而分享1986年的諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)
電子顯微鏡概述8本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第8頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分二、電子顯微鏡基本類(lèi)型
電子顯微鏡概述
透射電鏡
(Transmissionelectronmicroscope,TEM)
觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)
掃描電鏡(Scanningelectronmicroscope,SEM)
觀察組織或細(xì)胞表面的立體形貌9本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第9頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
電子顯微鏡概述10本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第10頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分俄歇電子感應(yīng)電導(dǎo)入射電子二次電子背散射電子吸收電子樣品特征X射線熒光透射電子能譜儀(EDS)波譜儀(WDS)電子探針(EPMA)TEMSEM
電子顯微鏡概述電子束與物質(zhì)的作用11本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第11頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分我室現(xiàn)有兩臺(tái)電子顯微鏡
電子顯微鏡概述SEMHITACHIS-3000NTEMHITACHIH-750012本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第12頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分三、電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)電子光學(xué)系統(tǒng)真空系統(tǒng)電源系統(tǒng)操作控制系統(tǒng)觀察系統(tǒng)
電子顯微鏡概述13本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第13頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分電子光學(xué)系統(tǒng)電子槍——
發(fā)射自由電子形成電子束電磁透鏡——
用一個(gè)對(duì)稱(chēng)于鏡筒軸線的空間電場(chǎng)或磁場(chǎng)使電子軌跡向軸線彎曲聚焦形成電子束
電子顯微鏡概述14本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第14頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分四、電子顯微鏡的醫(yī)學(xué)應(yīng)用細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)中的應(yīng)用解剖學(xué)中的應(yīng)用病毒研究方面的應(yīng)用臨床超微病理診斷中的應(yīng)用
電子顯微鏡概述15本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第15頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)中的應(yīng)用
電子顯微鏡概述細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖
組織細(xì)胞內(nèi)亞顯微結(jié)構(gòu)16本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第16頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分骨骼肌肌絲縱斷面SEM×30000TTMiNZSR
電子顯微鏡概述17本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第17頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分骨骼肌肌絲縱斷面TEM×29000
*Z**SRTT
18本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第18頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分骨骼肌肌絲橫斷面
TEM×40000
電子顯微鏡概述19本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第19頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分解剖學(xué)中的應(yīng)用
電子顯微鏡概述肛門(mén)內(nèi)括約肌
內(nèi)耳毛細(xì)胞
20本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第20頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分病毒研究方面的應(yīng)用H1N1流感病毒
電子顯微鏡概述21本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第21頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分H1N1流感病毒
電子顯微鏡概述22本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第22頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分臨床超微病理診斷中的應(yīng)用—腎活檢
電子顯微鏡概述足突融合系膜基質(zhì)增生23本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第23頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分肌營(yíng)養(yǎng)不良肌肉糖原貯積病臨床超微病理診斷中的應(yīng)用—肌活檢
電子顯微鏡概述24本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第24頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分嬰兒肝炎綜合癥臨床超微病理診斷中的應(yīng)用—肝活檢
電子顯微鏡概述25本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第25頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分臨床超微病理診斷中的應(yīng)用—神經(jīng)活檢軸索變性節(jié)段性脫髓鞘
電子顯微鏡概述26本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第26頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分臨床超微病理診斷中的應(yīng)用—皮膚活檢
電子顯微鏡概述角質(zhì)層疏松變成纖細(xì)胞沉積致密顆粒27本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第27頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分臨床超微病理診斷中的應(yīng)用
電子顯微鏡概述毛細(xì)胞性白血病28本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第28頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
透射電子顯微鏡及相關(guān)技術(shù)透射電鏡基本結(jié)構(gòu)透射電鏡成像原理透射電鏡主要性能指標(biāo)透射電鏡相關(guān)技術(shù)
——超薄切片技術(shù)
——負(fù)染色技術(shù)
——免疫電鏡技術(shù)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介29本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第29頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)電子光學(xué)系統(tǒng)觀察記錄顯示系統(tǒng)真空系統(tǒng)電源系統(tǒng)操作控制系統(tǒng)30本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第30頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分電子照明系統(tǒng)成像系統(tǒng)觀察記錄顯示系統(tǒng)電子光學(xué)系統(tǒng)一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)31本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第31頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分陰極控制極陽(yáng)極電子束聚光鏡樣品1.電子照明系統(tǒng)—
電子槍?zhuān)酃忡R一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)電子槍32本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第32頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分電子槍
——
電子束的發(fā)射源。常用的是發(fā)夾形熱鎢絲三電極式電子槍。燈絲(陰極)由鎢絲制成,通電加熱后發(fā)射電子發(fā)射出的電子束受處于負(fù)電位的柵極所調(diào)制,并被陽(yáng)極的高電位(幾十~幾百千伏)區(qū)加速后形成一束“光源”,即電子源。另外還有六硼化鑭陰極、點(diǎn)陰極和場(chǎng)發(fā)射電子槍等幾種高亮度新型電子槍。一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)33本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第33頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分聚光鏡
——
一種電磁透鏡,由外包鐵殼的線圈形成。當(dāng)線圈中通有電流時(shí),鐵殼的縫隙處集中產(chǎn)生磁場(chǎng),控制電子束的運(yùn)動(dòng)。聚光鏡的作用是將電子槍發(fā)出的電子流會(huì)聚后照射到樣品上。
一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)34本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第34頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分2.電子成像系統(tǒng)
——
樣品及樣品以下的電磁透鏡樣品
經(jīng)特殊制備的超薄樣品被放在直徑3mm的載網(wǎng)上,再把載網(wǎng)放在支架上并插入透射電鏡中。樣品架可以平移、傾動(dòng)和旋轉(zhuǎn)。
一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)35本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第35頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分樣品以下的電磁透鏡——
物鏡、中間鏡和投影鏡改變各透鏡電流可以在很大范圍內(nèi)改變圖像的大小圖像的聚焦是靠調(diào)節(jié)物鏡電流來(lái)實(shí)現(xiàn)的物鏡是整個(gè)儀器中最重要的部分,它決定電鏡分辨率一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)36本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第36頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人眼無(wú)法觀測(cè)電子,TEM中的電子信息通過(guò)熒光屏和照相底版轉(zhuǎn)換為可觀察圖像。3.觀察記錄顯示系統(tǒng)
上圖為我室透射電鏡安裝的側(cè)插式數(shù)碼成像系統(tǒng)——SISMegaviewⅢ一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)37本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第37頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分真空系統(tǒng)一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)由機(jī)械泵、油擴(kuò)散泵、離子泵、真空測(cè)量?jī)x表及真空管道組成。它的作用是排除鏡筒內(nèi)氣體,保持一定的鏡筒真空度。如果真空度低的話,電子與氣體分子之間的碰撞引起散射而影響襯度,還會(huì)使電子?xùn)艠O與陽(yáng)極間高壓電離導(dǎo)致極間放電,殘余的氣體還會(huì)腐蝕燈絲,污染樣品。38本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第38頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分電源系統(tǒng)一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)39本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第39頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分操作控制系統(tǒng)一.透射電鏡基本結(jié)構(gòu)40本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第40頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分ImageSampleObjectiveLens(IlluminationSource)LumpOMCondenserLensProjectionLensScreenImageImageSampleSampleObjectiveLensElectronSourceCondenserLensDeflectionCoilsSEDetectorCRTTEMSEMFluorescentscreenScanningTheoryofTransmissionElectronMicroscopeDifferenceamongOM,TEMandSEM41本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第41頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分二.透射電鏡成像原理
光學(xué)顯微鏡中圖像的襯度(即對(duì)比度或反差)決定于樣品上各部位對(duì)光的不同吸收。電鏡中圖像襯度的形成卻主要靠樣品對(duì)電子波的散射及其相互間的干涉。通??梢园褕D像襯度分成散射吸收襯度,衍射襯度和相位襯度。
42本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第42頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分二.透射電鏡成像原理在真空條件下,電子束經(jīng)高壓加速后,穿透樣品時(shí)形成散射電子和透射電子,它們?cè)陔姶磐哥R的作用下在熒光屏上成像。電子槍和電磁透鏡對(duì)電子束的作用決定電鏡成像質(zhì)量。43本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第43頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分吸收像:當(dāng)電子射到質(zhì)量、密度大的樣品時(shí),主要的成像作用是散射作用。樣品上致密和較厚的部分對(duì)電子的散射角大,被物鏡下方設(shè)置一個(gè)帶孔的圓片(即物鏡光闌)攔掉,這樣通過(guò)的電子較少,像的亮度較暗,反之則為亮區(qū)。這種襯度稱(chēng)散射吸收襯度,可以提供樣品形態(tài)方面的信息。早期的透射電子顯微鏡都是基于這種原理。
二.透射電鏡成像原理44本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第44頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分衍射像:電子束被樣品衍射后,樣品不同位置的衍射波振幅分布對(duì)應(yīng)于樣品中晶體各部分不同的衍射能力,當(dāng)出現(xiàn)晶體缺陷時(shí),缺陷部分的衍射能力與完整區(qū)域不同,從而使衍射波的振幅分布不均勻,反映出晶體缺陷的分布。相位像:當(dāng)極薄、小顆粒或低密度樣品成像時(shí),主要應(yīng)該利用相位襯度。樣品受電子波照射后會(huì)產(chǎn)生不同的散射波。在條件合適時(shí),這些散射波將按一定的相位關(guān)系干涉成像,這就是相位襯度像。它是一種高分辨率的像,可用于研究原子尺度(小于10埃)的樣品微結(jié)構(gòu)。二.透射電鏡成像原理45本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第45頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分一般生物醫(yī)學(xué)常用透射電鏡分辨率0.1~0.3nm放大率50~500000電壓在20~200KV樣品厚度<100nm三.主要性能指標(biāo)46本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第46頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分是TEM的最主要性能指標(biāo),表征電鏡顯示亞顯微組織、結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的能力。點(diǎn)分辨率:能分辨兩點(diǎn)之間的最短距離線分辨率:能分辨兩條線之間的最短距離,通過(guò)拍攝已知晶體的晶格象測(cè)定,又稱(chēng)晶格分辨率。三.主要性能指標(biāo)分辨率47本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第47頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分指電子圖像對(duì)于所觀察試樣區(qū)的線性放大率。目前高性能TEM的M范圍為80~100萬(wàn)倍。不僅考慮最高和最低放大倍數(shù),還要考慮是否覆蓋低倍到高倍的整個(gè)范圍。電鏡不能將其所分辨的細(xì)節(jié)放大到人眼可辨認(rèn)程度。對(duì)細(xì)節(jié)觀察是用電鏡放大在熒光屏上成像,經(jīng)附帶的立體顯微鏡進(jìn)行聚焦和觀察。將儀器的最小可分辨距離放大到人眼可分辨距離所需的放大倍數(shù)稱(chēng)為有效放大倍數(shù)。一般儀器的最大倍數(shù)稍大于有效放大倍數(shù)。放大倍數(shù)—常數(shù)—中間鏡激磁電流三.主要性能指標(biāo)48本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第48頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人眼分辨本領(lǐng)約0.2mm,光學(xué)顯微鏡約0.2μm。把0.2μm放大到0.2mm的放大倍數(shù)是1000倍,是有效放大倍數(shù)。光學(xué)顯微鏡分辨率在0.2μm時(shí),有效放大倍數(shù)是1000倍。光學(xué)顯微鏡的放大倍數(shù)可以做的更高,但高出部分對(duì)提高分辨率沒(méi)有貢獻(xiàn),僅是讓人眼觀察舒服。關(guān)于放大倍數(shù)的幾點(diǎn)說(shuō)明:三.主要性能指標(biāo)49本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第49頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分指電子槍陽(yáng)極相對(duì)于陰極燈絲的電壓,決定了發(fā)射的電子的λ和E。電壓越高,電子束對(duì)樣品的穿透能力越強(qiáng)(厚樣品)、分辨率越高、對(duì)樣品的輻射損傷越小。普通TEM的最高V一般為100kV和200kV,通常所說(shuō)的V是指可達(dá)到的最高加速電壓。加速電壓三.主要性能指標(biāo)50本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第50頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)透射電鏡生物樣品制備要求超薄切片技術(shù)負(fù)染色技術(shù)免疫電鏡技術(shù)51本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第51頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分1.透射電鏡生物樣品制備要求四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)電鏡標(biāo)本觀察條件:高真空、高電壓、能夠散射電子生物樣品特點(diǎn):含有大量水分、電子密度低(主要是C、H、O)生物樣品制備目的:去除水分,增加標(biāo)本中能夠散射電子的重原子52本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第52頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)新刀鋒產(chǎn)生于斷端超薄切片刀:玻璃刀、鉆石刀玻璃制刀機(jī)2.超薄切片技術(shù)53本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第53頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分2.超薄切片技術(shù)四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)超薄切片機(jī)原理示意圖超薄切片機(jī)54本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第54頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分超薄切片技術(shù)——玻璃刀切片四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)55本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第55頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分Thinsections四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)56本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第56頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分載網(wǎng)分類(lèi)及選擇:
1.分類(lèi):銅網(wǎng)、鎳網(wǎng)、金網(wǎng),根據(jù)用途不同分別采用,如酶細(xì)胞化學(xué)、免疫金標(biāo)記技術(shù)等需采用后兩者;
2.支持膜:貼附于載網(wǎng),用來(lái)觀察懸浮的病毒、脂質(zhì)體及其它顆粒物質(zhì)的均質(zhì)性膜,包括Formvar膜、碳膜等。四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)57本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第57頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分SpecimenPreparationforElectronMicroscopyThinSectioningforTEMThewaxsections:3-10um;ThePlasticultrathin-sectionsforTEM:40-50nmSectionsofLM:>5um;SectionsofTEM:<100nm
四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)58本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第58頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分59本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第59頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)超薄切片技術(shù)
—生物樣品制備流程取材——漂洗(緩沖液)——前固定(2.5%戊二醛)——漂洗(緩沖液)——后固定(1%鋨酸)——漂洗(緩沖液)——梯度脫水——浸透(樹(shù)脂)——包埋——聚合——超薄切片——電子染色——TEM
觀察60本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第60頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分定義:染液中的高電子密度物質(zhì)包圍低電子密度的樣品,染色結(jié)果使背景是黑暗的,而樣品部分呈“透明”的光亮區(qū),故稱(chēng)之為負(fù)染色。用途:用于觀察生物大分子、病毒、細(xì)菌、分離的細(xì)胞器以及蛋白質(zhì)晶體等顆粒性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、大小以及形狀等。3.負(fù)染色技術(shù)四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)61本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第61頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分負(fù)染色方法液滴20μL樣品懸液雙蒸水負(fù)染液負(fù)染液Parafilmgrid四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)62本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第62頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分負(fù)染色技術(shù)的應(yīng)用四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)63本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第63頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分負(fù)染色技術(shù)的應(yīng)用四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)來(lái)自于加州一位患者的H1N1流感患者樣本的病毒透射電鏡照片,4月28日f(shuō)rom美國(guó)疾控中心(CDC)經(jīng)過(guò)處理后,病毒的超微結(jié)構(gòu)更將明顯地顯露出來(lái)。64本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第64頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分負(fù)染色技術(shù)的應(yīng)用四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)CDC發(fā)表的1976年流行的豬流感病毒照片
1918流感病毒即為西班牙流感病毒65本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第65頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分4.免疫電鏡技術(shù)免疫電鏡技術(shù)
是免疫化學(xué)技術(shù)與電鏡技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物,是在超微結(jié)構(gòu)水平研究和觀察抗原、抗體結(jié)合定位的一種方法學(xué)主要使用的示蹤物:重金屬(如膠體金)酶(如HRP)四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)66本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第66頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分免疫電鏡技術(shù)類(lèi)型主要分為兩大類(lèi):免疫凝集電鏡技術(shù):即采用抗原抗體凝集反應(yīng)后,再經(jīng)負(fù)染色直接在電鏡下觀察免疫電鏡定位技術(shù):利用帶有特殊標(biāo)記的抗體與相應(yīng)抗原相結(jié)合,在電子顯微鏡下觀察,由標(biāo)示物指示出相應(yīng)抗原所在的部位四.透射電鏡相關(guān)技術(shù)67本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第67頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分免疫凝集免疫電鏡定位68本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第68頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)細(xì)胞核細(xì)胞器69本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第69頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
人胚胎成纖維細(xì)胞核大,胞質(zhì)較少,有較發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(▲)及線粒體,在細(xì)胞及細(xì)胞突起表面均可見(jiàn)質(zhì)膜(↑)包繞。
×18000
細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介70本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第70頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人腸吸收上皮細(xì)胞,細(xì)胞表面有微絨毛(↑),絨毛中心有微絲束組成的軸心,深入胞質(zhì)淺面。絨毛表面可見(jiàn)呈絲網(wǎng)狀的細(xì)胞外衣(▲)。
×16000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介71本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第71頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分兔輸卵管纖毛柱狀上皮細(xì)胞,細(xì)胞表面可見(jiàn)纖毛縱剖面(↑),內(nèi)有微管,纖毛下端有基體(▲)×15000,角圖纖毛橫剖面,可見(jiàn)9+2微管結(jié)構(gòu)。×16000
細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介72本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第72頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)人胚胎腸上皮細(xì)胞橫剖面,核大,胞質(zhì)少,環(huán)繞細(xì)胞四周有質(zhì)膜(↑),細(xì)胞間有原始連接(▲)。
×20000
五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介73本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第73頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)人胃粘液腺細(xì)胞間腺腔,表面有微絨毛(↑),有縱切及橫切面,細(xì)胞間有緊密連接(▲)×20000五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介74本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第74頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人鱗狀上皮棘細(xì)胞,細(xì)胞突起間可見(jiàn)橋粒(↑)。×31000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介75本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第75頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人腸吸收上皮細(xì)胞,細(xì)胞間可見(jiàn)橋粒(↑)
×30000
角圖橋粒放大×70000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介76本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第76頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人鱗狀上皮細(xì)胞,基底面可見(jiàn)半橋粒(↑),相鄰有基板(▲)。
×18000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介77本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第77頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
相鄰血管內(nèi)皮細(xì)胞間可見(jiàn)緊密連接(↑),胞質(zhì)內(nèi)有波形蛋白中絲(▲)?!?0000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介78本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第78頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人鼻咽部纖毛上皮細(xì)胞間緊密連接(黑“↑”)。×21000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介79本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第79頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人腸吸收上皮細(xì)胞間可見(jiàn)復(fù)合連接(黑“↑”),胞質(zhì)內(nèi)有多聚核糖體(黑“▲”)。×45000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介80本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第80頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
人胃粘膜上皮基底細(xì)胞,基底面質(zhì)膜外可見(jiàn)基板(黑“↑”)?!?2000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介81本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第81頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人肌內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量圓形胞飲小泡(↑)及少數(shù)Weibel-Palad小體(▲)?!?6000細(xì)胞膜及特化結(jié)構(gòu)五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介82本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第82頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分細(xì)胞核核膜染色質(zhì)核仁人胃粘液上皮細(xì)胞,可見(jiàn)由核外膜(↑)、核內(nèi)膜(白↑)、核周隙及核孔(▲)組成的核膜,核內(nèi)有常染色質(zhì)及異染色質(zhì)。
×13000五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介83本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第83頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人鼻咽部上皮細(xì)胞,可見(jiàn)部分細(xì)胞核,核內(nèi)外膜、核周隙及核孔均清楚可見(jiàn),核鄰近可見(jiàn)核孔橫剖面(↑)。×32000
細(xì)胞核核膜染色質(zhì)核仁五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介84本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第84頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人鼻咽部上皮細(xì)胞核內(nèi)可見(jiàn)多個(gè)聚集的染色質(zhì)間顆粒(↑),及核模鄰近單個(gè)的染色質(zhì)周顆粒(▲)。
×32000細(xì)胞核核膜染色質(zhì)核仁五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介85本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第85頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分
人鼻咽部上皮細(xì)胞核內(nèi)可見(jiàn)核仁,由深色的核仁絲(白“↑”)及淺色的基質(zhì)(白“▲”)組成?!?8000
細(xì)胞核核膜染色質(zhì)核仁五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介86本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第86頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分大白鼠肝細(xì)胞核內(nèi)核仁,可見(jiàn)核仁絲由顆粒狀(白“↑”)及原纖維狀(黑“↑”)結(jié)構(gòu)組成。×12000細(xì)胞核核膜染色質(zhì)核仁五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介87本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第87頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器
大鼠肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)線粒體(↑),游離多聚核糖體(▲)及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜旁核糖體?!?5000
五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介88本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第88頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分大鼠肝細(xì)胞胞質(zhì),內(nèi)有線粒體(↑)及高爾基體(▲),線粒體由外膜、內(nèi)膜、外腔、內(nèi)腔、嵴、基質(zhì)及基質(zhì)顆粒組成。
×40000細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介89本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第89頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人腎曲小管上皮細(xì)胞,基底端胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量線粒體(白“↑”),基質(zhì)電子密度高,質(zhì)膜鄰近有基板(黑“▲”)。
×32000細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介90本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第90頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(▲)及管泡狀線粒體,嵴呈管狀及泡狀(↑)?!?4000細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介91本文檔共103頁(yè);當(dāng)前第91頁(yè);編輯于星期二\7點(diǎn)31分大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)散在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(↑),游離多聚核糖體及線粒體(▲)。
×34000細(xì)胞內(nèi)各細(xì)胞器五.細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介92本文檔共10
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