生化實(shí)驗(yàn)心得生化試驗(yàn)心得

生化試驗(yàn)心得

生化試驗(yàn)心得

劉欣怡201*00140057201*級生物基地班我很喜愛做試驗(yàn)，并且樂于熬煉自己的動手力量。

本學(xué)期的生化試驗(yàn)，雖然只從其次周上到第十五周，但是我收獲了許多并且留下了深刻的印象。對于本次試驗(yàn)心得的撰寫，我將分為以下3個部分來進(jìn)行：本學(xué)期試驗(yàn)回顧、本學(xué)期試驗(yàn)總結(jié)以及對于生化試驗(yàn)課的支持和建議。一、本學(xué)期試驗(yàn)回顧：

本學(xué)期的生化試驗(yàn)課上，我們一共進(jìn)行了11次試驗(yàn)，分別是Folin-酚試劑法測定血清蛋白質(zhì)含量、酵母RNA的提取、醋酸纖維薄膜電泳、紫外汲取法測定RNA含量、聚酰胺薄膜層析、纖維素酶活力的測定（三硝基水楊酸法）、還原糖和總糖含量的測定（三硝基水楊酸法）、酶最適PH的測定、費(fèi)林試劑熱滴定糖、肌糖原酵解作用、微量凱氏定氮法。這些試驗(yàn)具有代表性，是典型的生化試驗(yàn)。在這些試驗(yàn)中，涵蓋了以前無機(jī)試驗(yàn)和有機(jī)試驗(yàn)的基礎(chǔ)試驗(yàn)操作，還有全新的試驗(yàn)操作以及試驗(yàn)儀器。

在這學(xué)期的生化試驗(yàn)課上，我既復(fù)習(xí)并嫻熟了大一無機(jī)試驗(yàn)和有機(jī)試驗(yàn)的基本試驗(yàn)操作和儀器（比如移液管、滴定管、蒸餾等），又學(xué)習(xí)并把握了很多新操作以及新儀器的使用，比如紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)、聚酰胺薄膜、熱滴定、凱氏定氮儀器等。最重要的是，我學(xué)習(xí)并把握了一些重要的試驗(yàn)方法和原理，比如Folin-酚試劑法、紫外汲取法、三硝基水楊酸法、費(fèi)林試劑與糖的反應(yīng)、微量凱氏定氮法等。把握了這些試驗(yàn)原理以及方法，有利于我們在以后中敏捷運(yùn)用設(shè)計(jì)試驗(yàn)。

總體來說，本學(xué)期生化試驗(yàn)教會了我測定蛋白質(zhì)、糖、核酸的方法，電泳和層析分別物質(zhì)、如何測定酶的相關(guān)特性、驗(yàn)證肌糖原酵解作用、如何提取RNA。二、本學(xué)期試驗(yàn)總結(jié)

通過這學(xué)期的生化試驗(yàn)，我的試驗(yàn)技能的到了大大地提升，同時，試驗(yàn)中的細(xì)節(jié)、留意事項(xiàng)以及老師拓展的學(xué)問令我獲益匪淺，也讓我深深地熟悉到科學(xué)是特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?，尤其是在做試?yàn)的時候，要全神貫注，井井有條，否則很簡單出差錯，而這個小小的差錯很有可能就使試驗(yàn)前功盡棄，既耽擱時間又鋪張?jiān)噭?/p>

回顧這一學(xué)期我的試驗(yàn)課程，每一次我都能完成試驗(yàn)任務(wù)。大多數(shù)都比較順當(dāng)，小組內(nèi)兩人也大多協(xié)作默契，但是有一些美中不足的地方。有的一些試驗(yàn)比較麻煩，試驗(yàn)步驟較為繁瑣，我們在做試驗(yàn)時間或會產(chǎn)生不耐煩的思想，只想著抓緊結(jié)束，但是在這種時候往往更簡單出差錯。我有兩次記憶很深，一次是在測定纖維素酶活力（三硝基水楊酸法）時，沒能準(zhǔn)時貼上空白標(biāo)簽，導(dǎo)致又重新制作空白，拜拜鋪張了時間；另一次是在鑒定肌糖原酵解作用時，試驗(yàn)步驟較為繁瑣，并且老師對黑板上的簡易試驗(yàn)步驟進(jìn)行了多個補(bǔ)充，其中一點(diǎn)是要在水浴后取出大塊肉再加下一步驟的試劑，結(jié)果我們當(dāng)時產(chǎn)生了不耐煩心情，就直接加了試劑而沒有取出大肉塊。對于這兩次狀況，雖然對最終的試驗(yàn)結(jié)果沒有產(chǎn)生什么明顯的影響，但是，它實(shí)實(shí)在在體現(xiàn)了自己的操作并不是很嚴(yán)謹(jǐn)，需要留意和努力。

在本學(xué)期生化試驗(yàn)報(bào)告的撰寫中，我重點(diǎn)留意老師強(qiáng)調(diào)的試驗(yàn)分析部分。上課仔細(xì)聽老師的試驗(yàn)講解并仔細(xì)記錄有關(guān)的可能試驗(yàn)結(jié)果的分析。在課后撰寫試驗(yàn)報(bào)告時對這些點(diǎn)重點(diǎn)分析和總結(jié)，有時甚至是查找相關(guān)資料然后再進(jìn)行分析。通過這一些列的做法，我的試驗(yàn)分析力量得到了提升，我能在爭論試驗(yàn)結(jié)果或者試驗(yàn)操作時找到更好、更精確的切入點(diǎn)，能得出更好的結(jié)論。

同時，本學(xué)期老師將我們分為兩人一組來進(jìn)行試驗(yàn)，兩人之間的磨合和合作是一種熬煉，對今后很有關(guān)心。三、對于生化試驗(yàn)課的支持和建議

我特別感謝老師在這一學(xué)期中的辛勤勞動。老師在課前為我們做好試驗(yàn)預(yù)備很不簡單，配試劑等都很辛苦。感謝老師您了。

我覺得咱們的額生化試驗(yàn)課設(shè)計(jì)的挺好的。兩人一組可以分工合作，加快試驗(yàn)效率，同時又避開了由于同組同學(xué)人數(shù)多而有的同學(xué)無事可做的現(xiàn)象。老師在課上講解試驗(yàn)時，有關(guān)試驗(yàn)步驟、試驗(yàn)可能結(jié)果、試驗(yàn)留意事項(xiàng)的分析、講解和拓展令我獲益匪淺，有利于培育我的試驗(yàn)思維并且拓寬了學(xué)問視野。

建議方面，我想和老師提的一點(diǎn)建議其實(shí)是有關(guān)試驗(yàn)器材方面的。對于老師所提到的有關(guān)節(jié)省試劑、削減材料鋪張等事項(xiàng)我特別贊同，并且大多數(shù)時候器材和試劑都很全（這和大一的無機(jī)試驗(yàn)和有機(jī)試驗(yàn)相比條件進(jìn)步了許多），只是盼望咱們的一些其他試驗(yàn)儀器能更全面一點(diǎn)，舉一個例子，可以使用的紫外分光光度計(jì)只有3臺，有些過少，試驗(yàn)中要等待的時間較長，并且有的儀器還不是很精確?????，對于我們的試驗(yàn)造成了肯定的困擾，盼望老師能將試驗(yàn)室內(nèi)有些問題的儀器同一修一修。

總之，我很喜愛咱們的生化試驗(yàn)課，并且從中學(xué)到了許多學(xué)問、試驗(yàn)方法和應(yīng)用，熬煉了試驗(yàn)操作，形成了試驗(yàn)要急躁、細(xì)心、恒心的觀念。同時還培育了團(tuán)隊(duì)意識和合作觀念。我獲益匪淺。

擴(kuò)展閱讀：生化試驗(yàn)試驗(yàn)總結(jié)

山東高校試驗(yàn)報(bào)告

姓名王賽賽系班級組別同組者陳燕紅王梓科目生物化學(xué)試驗(yàn)題目生化試驗(yàn)總結(jié)學(xué)號201*14140103

生化試驗(yàn)總結(jié)

一、試驗(yàn)感想：

本學(xué)期的十個生化試驗(yàn)，讓我們學(xué)到了不少新的試驗(yàn)技能和試驗(yàn)操

作方法及試驗(yàn)原理。

酵母RNA的提取及核酸的定量測定讓我們第一次真正的接觸到了對于核酸的一些提取、處理、及討論的方法，例如：利用RNA能溶于堿性溶液的原理來用稀堿法提取RNA，其中對于樣品的處理，以及提取完畢之后堿的中和、乙醇提取、乙醚濾干等操作方法都是以前沒遇到過的。在核酸的定量測定試驗(yàn)中，我們同樣鞏固了分光光度計(jì)的使用方法。在蛋白質(zhì)含量測定的過程中，我們學(xué)習(xí)了兩種方法，一種是folin-酚試劑法，一種是經(jīng)典的凱斯氏定氮法。前者利用folin-酚和酪氨酸和色氨酸的結(jié)合來測定蛋白質(zhì)含量，同時我們也是第一次接觸到了紫外分光光度計(jì)，以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線來測定樣本的蛋白質(zhì)濃度。后者試驗(yàn)原理比較簡單，但總體來說就是將蛋白質(zhì)中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化成無機(jī)氮（硫酸銨），然后再與堿液反應(yīng)，通過測量氨氣的釋放量來間接測得蛋白質(zhì)的含氮量，然后再求蛋白質(zhì)的含量。這次試驗(yàn)我們學(xué)會了使用凱氏定氮儀，并且明白了其基本工作原理。本儀器使用便利，效果良好。使用的過程中，由于要長時間做大量的重復(fù)測定，由此也熬煉了我們堅(jiān)忍不拔的試驗(yàn)精神，磨練了意志，同時也經(jīng)過反復(fù)的練習(xí)而增加了有關(guān)該試驗(yàn)的試驗(yàn)操作技能，如何緩慢山東高校試驗(yàn)報(bào)告

姓名王賽賽系班級組別同組者陳燕紅王梓科目生物化學(xué)試驗(yàn)題目生化試驗(yàn)總結(jié)學(xué)號201*14140103

加液防止倒吸，如何掌握蒸汽發(fā)生器防止暴沸，如何根據(jù)挨次嚴(yán)格的加入試劑，以及如何進(jìn)行滴定等，通過該試驗(yàn)，對這些技能都有了進(jìn)一步的了解。在醋酸纖維素薄膜電泳的試驗(yàn)中，我們主要學(xué)習(xí)到的是在簡單的試驗(yàn)材料處理的過程中如何保持糊涂的頭腦，以及完整的思路，這樣才能把試驗(yàn)做好，并且做的很快。該試驗(yàn)要配制緩沖液、漂洗液、染色液、透亮?????液，從薄膜的制作，到點(diǎn)樣，處理、電泳等要經(jīng)過一系列簡單的試驗(yàn)操作，每一步都很重要，每一步的處理時間，處理程度都要靠自己去把握，最終還要經(jīng)過漂洗、冷風(fēng)吹干，最終的處理是要及其當(dāng)心的，否則會把薄膜弄破，或者消失皺縮，不平整。假如前期點(diǎn)樣不好，或者染色、電泳過程中稍有不慎，便的不好較好的電泳條帶，消失拖尾，或斷續(xù)的現(xiàn)象。因此，這個試驗(yàn)尤其考驗(yàn)我們的操作力量和細(xì)心水平。酶性質(zhì)試驗(yàn)是我們接觸到為數(shù)不多的一個定性試驗(yàn)。

我們從中學(xué)會了對于定性測量的一些處理方法，例如：如何確定最佳ph？如何確定ph梯度比較合適？如何確定最佳保溫時間？這些問題都從試試驗(yàn)中得到了解答。最終是通過顏色反應(yīng)來推斷最相宜ph，精確?????推斷顏色深淺是一個方面，更重要的是顏色指示劑的加入量要肯定掌握好，假如加的太多，則會使全部的試管顏色偏深，甚至都變成黑色，假如加的太少，那么染色就太淺，變色不明顯，所以，太深太淺都不適于顏色梯度變化的觀看。由此可知，在以后的類似試驗(yàn)中尤其要掌握指示劑的加入量，力求達(dá)到一個最佳的顏色梯度。肌糖原酵山東高校試驗(yàn)報(bào)告

姓名王賽賽系班級組別同組者陳燕紅王梓科目生物化學(xué)試驗(yàn)題目生化試驗(yàn)總結(jié)學(xué)號201*14140103

解作用試驗(yàn)中，我們不僅學(xué)到了鑒定糖酵解作用的原理和方法，還學(xué)到了在有關(guān)組織代謝試驗(yàn)時應(yīng)當(dāng)留意的一些問題。本試驗(yàn)將肌糖原轉(zhuǎn)變成乳酸，然后通過測定乳酸的生成量來反應(yīng)糖原的酵解。試驗(yàn)最終要經(jīng)過顏色反應(yīng)來推斷是否有乳酸生成，該反應(yīng)相當(dāng)靈敏，所以試驗(yàn)儀器要嚴(yán)格的洗潔凈。記得我們這次試驗(yàn)時，第一次由于沒有洗凈試管，所以導(dǎo)致空白組也消失了顏色反應(yīng)，后來老師讓用濃硫酸洗過一次試管，然后才得到了正確的試驗(yàn)結(jié)果，這是在這次試驗(yàn)中收獲最大的地方。在纖維素酶活力的測定試驗(yàn)中，第一次學(xué)習(xí)到了空白對比試驗(yàn)，知道了空白對比試驗(yàn)的作用，同時對于標(biāo)準(zhǔn)曲線和分光光度計(jì)的使用已經(jīng)比較嫻熟了。薄膜層析和柱層析試驗(yàn)都是分別試驗(yàn)，兩種層析方法比較學(xué)習(xí)，對于層析又有了進(jìn)一步的熟悉，柱層析的試驗(yàn)中，最主要的還是層析柱的制作，和點(diǎn)樣，加樣量不要過大，過大，分別條帶過寬，假如層析柱不夠長，各組分不易分開，易同時洗脫下來（本試驗(yàn)只分別一種色素，不存在此問題）；加樣量過少，色帶不是很清晰，不易觀看，效果不好。最終，菲林熱滴定定糖法試驗(yàn)，該試驗(yàn)也要做空白測定，將樣品液換成蒸餾水，正確理解空白測定的作用，然后就是熱滴定過程，該滴定不同于以往的滴定試驗(yàn)，要趁熱滴定，并且要保持滴定時間始終，防止空氣中的氧氣對試驗(yàn)結(jié)果造成影響，還有，提前加入葡萄糖的作用，是為了削減滴定過程中的加入量，縮短滴定時間，增加滴定精確?????度。最終還有在滴定時候顏色的變化，通過親自的觀看對顏色的變化深有體會。山東高校試驗(yàn)報(bào)告

姓名王賽賽系班級組別同組者陳燕紅王梓科目生物化學(xué)試驗(yàn)題目生化試驗(yàn)總結(jié)學(xué)號201*14140103

通過這學(xué)期的一系列試驗(yàn)，我們學(xué)到了好多試驗(yàn)技能，同時也發(fā)覺了不少的問題，以及理論學(xué)問的缺乏，我以后會更加努力，不斷成長。

二、72型分光光度計(jì)

1、72型分光光度計(jì)原理：

72型分光光度計(jì)是可見光分光光度計(jì)，波長范圍為420nm～700nm，它由三大部分組成:磁飽和穩(wěn)壓器、光源、單色光器和測光機(jī)構(gòu)、微電計(jì)。它的基本依據(jù)是朗伯比耳定律，它是依據(jù)相對測量原理工作的，即先選定某一溶劑作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)定其透光率為100%，被測試樣的透光率是相對于標(biāo)準(zhǔn)溶液而言的，即讓單色光分別通過被測試樣和標(biāo)準(zhǔn)溶液，二者能量的比值就是在肯定波長下對于被測試樣的透光率。如圖所示，白色光源經(jīng)入射狹縫、反射鏡和透光鏡后，變成平行光進(jìn)入棱鏡，色散后的單色光經(jīng)鍍鋁的反射鏡反射后，再經(jīng)過透鏡并聚光于出射狹縫上，狹縫寬度為0.32nm。反射鏡和棱鏡組裝在一可旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)盤上并由波長調(diào)整器的凸輪所帶動，轉(zhuǎn)動波長調(diào)整器便可以在出光狹縫后面選擇到任一波長的單色光。單色光透過樣品汲取池后由一光量調(diào)整器調(diào)整為適度的光通量，最終被光電電池汲取，轉(zhuǎn)換成電流后由微電計(jì)指示，從刻度標(biāo)尺上直接讀出透光率的值。2、為什么要做空白?

分光光度計(jì)測的是溶液的總體吸光度，而待測溶液中除了待測物質(zhì)外還有其他的一些雜質(zhì)等，會給試驗(yàn)帶來肯定的誤差，用空白組調(diào)0.可以消退由于溶液本身的吸光性質(zhì)給試驗(yàn)帶來的影響，確保吸光度山東高校試驗(yàn)報(bào)告

姓名王賽賽系班級組別同組者