抗酸染色技術(shù)基本技能單項訓(xùn)練診斷活動性肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn)

患者王某，男，50歲，出現(xiàn)低熱、咳嗽、咯痰二十余天，X線檢查顯示肺部有炎癥病灶，初步判斷為肺部感染。取病人痰液標(biāo)本送檢驗科微生物室檢驗。病人痰液帶血絲。請問該病人可能是何種病原菌感染？將如何鑒定？能力目標(biāo)會操作細(xì)菌抗酸染色能正確觀察細(xì)菌抗酸染色結(jié)果知道細(xì)菌抗酸染色的臨床意義知道細(xì)菌抗酸染色的原理、影響因素學(xué)習(xí)目標(biāo)素質(zhì)目標(biāo)

進(jìn)一步強化生物安全的意識樹立嚴(yán)肅認(rèn)真、實事求是、高度負(fù)責(zé)的科學(xué)態(tài)度，具有良好的職業(yè)素質(zhì)和崇高的職業(yè)道德?？顾崛旧ǚ种U菌屬的細(xì)菌（包括結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌等）為抗酸性細(xì)菌，一般染色法不易著色，須用抗酸染色法。分枝桿菌呈紅色(+)其他細(xì)菌和背景為藍(lán)色(-)。實驗原理分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，主要是分枝菌酸，它包圍在外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色(齊-尼氏抗酸染色法)。實驗材料細(xì)菌：卡介苗染液：石炭酸復(fù)紅液、3%鹽酸酒精、堿性美蘭溶液其它：接種環(huán)、酒精燈、載玻片等

染色步驟1、細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備涂片干燥固定2、染色染色步驟1）初染：用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。2）脫色：

3%鹽酸酒精脫色30秒至1分鐘，用水沖洗。3）復(fù)染：用堿性美蘭溶液復(fù)染1分鐘，用水沖洗后用吸水紙吸干。3、油鏡觀察實驗結(jié)果結(jié)核桿菌呈紅色，常堆積成團(tuán)，排列無序，偶呈分枝狀生長。偶爾有桿菌著色不均，呈顆粒狀者。背景及非抗酸性細(xì)菌呈蘭色?？顾崛旧Y(jié)果抗酸染色結(jié)果抗酸染色結(jié)果抗酸染色結(jié)果注意事項1、無菌操作2、涂片厚度要適中3、固定4、沖洗5、染色時間6、初染加熱的溫度，勿沸騰初染加熱時，一定避免加熱過度，否則會使染液干涸或載玻片炸裂。鏡檢時應(yīng)按一定方向和順序檢查全部視野，發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌便可報告結(jié)果。檢查為陰性結(jié)果，應(yīng)復(fù)查3次以上方能報告結(jié)果?？顾崛旧袔追N