專題2細胞工程動物細胞融合與單克隆抗體

肺癌在全國的發(fā)病率居腫瘤之首，小細胞肺癌是惡性程度最高的一種，上海腫瘤研究所細胞與分子免疫研究室在國內(nèi)率先研制出一種名叫“2F7”的靶向生物導彈。這種生物導彈對小細胞肺癌具有特定靶向性?！吧飳棥边@個“生物導彈”與你知道的哪個物質(zhì)有關(guān)？問題：什么是抗體？抗體由什么細胞產(chǎn)生？與抗原作用的特點？其化學本質(zhì)是什么？機體受抗原刺激后，漿細胞產(chǎn)生的，能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的免疫球蛋白抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的缺點：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差多種漿細胞動物體內(nèi)多種抗體抗原注射抗原，血清分離抗原免疫抗血清讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內(nèi)的漿細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個漿細胞只分泌一種化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個漿細胞進行無性繁殖，即克隆。1.單克隆抗體的概念單:單個細胞克隆:無性繁殖單克隆抗體:單個細胞克隆產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一特異性強的抗體提示1：對B細胞進行細胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？提示3：如何使一種細胞既能產(chǎn)生特異性抗體， 又能大量繁殖？問題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？2.單克隆抗體的制備的設計方案

分泌一種特異性抗體的B淋巴細胞能無限增殖的骨髓瘤細胞雜交瘤細胞1975年科學家米爾斯坦和柯勒的制備單克隆抗體實驗3.單克隆抗體的制備過程

閱讀并分組討論，單抗制備過程分哪幾步？請用箭頭把下列各圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞多種雜交細胞單克隆抗體1.注射抗原的目的是什么？注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞融合多種雜交細胞單克隆抗體2.誘導細胞融合的方法有哪些？注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞融合多種雜交細胞單克隆抗體3.若細胞兩兩融合后，有幾種融合情況？注射抗原B淋巴細胞融合選擇性培養(yǎng)基篩選單克隆抗體4.怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何優(yōu)點？骨髓瘤細胞實驗中使用的骨髓瘤細胞是HGPRT酶缺陷細胞,在含有次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中，因為不能正常合成DNA而無法生長;B細胞雖含有HGPRT酶，但不能在體外培養(yǎng)存活（只存活5~7d，且功能下降)；雜交瘤細胞融合了B細胞和瘤細胞，其中瘤細胞核利用B細胞的HGPRT酶合成DNA而存活。參考上述材料，簡述篩選過程與結(jié)果選擇培養(yǎng)基中

細胞不能存活，

細胞存活下來注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞融合多種雜交細胞選擇性培養(yǎng)基篩選專一抗體檢測克隆化單克隆抗體有限稀釋法培養(yǎng)篩選5.為何要進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選？有限稀釋法計數(shù)103/ml102/ml10/ml1個細胞/孔克隆化培養(yǎng)抗體檢測注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞融合多種雜交細胞選擇性培養(yǎng)基篩選專一抗體檢測克隆化單克隆抗體有限稀釋法培養(yǎng)篩選6.大量增殖雜交瘤細胞獲得單抗的方法特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大4.單克隆抗體的優(yōu)點5.單克隆抗體的應用診斷試劑——準確、高效、簡易、快速治療疾病——癌癥運載藥物

(“生物導彈”—單抗做導向，藥物為彈頭)課堂練習下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設計的實驗方案2、該方案能達到預期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實驗方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細胞