金黃色葡萄球菌定性檢驗金黃色葡萄球菌定性檢驗

1.了解金黃色葡萄球菌生物學特性。

2.掌握金黃色葡萄球菌定性檢測程序和檢驗方法。

學習目的與要求1.了解金黃色葡萄球菌生物學特性。學習目的一、生物學特性——菌體形態(tài)及培養(yǎng)特征革蘭氏陽性球菌，直徑為0.5-1.0微米，鏡檢時呈單個、成對、四聯(lián)或不規(guī)則的簇群，如葡萄狀，故稱為葡萄球菌。一、生物學特性——菌體形態(tài)及培養(yǎng)特征革蘭氏陽性球菌，直徑為0大多數(shù)菌株產生類胡蘿卜素，使細胞團呈現(xiàn)出深橙色到淺黃色，色素的產生取決于生長的條件，故稱金黃色葡萄球菌(高鹽甘露醇平板：金黃色葡萄球菌為淡黃色菌落；其他葡萄球菌為白色菌落)。大多數(shù)菌株產生類胡蘿卜素，使細胞團呈現(xiàn)出深橙色到淺黃色，色素

最適生長溫度37℃，最適pH為7.4；兼性厭氧菌，在好氧條件下生長最好；可在高鹽環(huán)境下生長，15%氯化鈉環(huán)境下還能生長；一般用含10%氯化鈉的胰酪胨大豆肉湯增菌或7.5%氯化鈉肉湯增菌。最適生長溫度37℃，最適pH為7.4；

所有的毒株產生血漿凝固酶，人和動物來源的菌株通常可凝固兔、人、馬和豬的血漿。金黃色葡萄球菌產生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶等，大多數(shù)菌株可水解天然的動物蛋白并釋放脂肪酸。在BP平板產生磷脂環(huán)。所有的毒株產生血漿凝固酶，人和動物來源的菌株通?？赡飳W特性——致病性金黃色葡萄球菌為條件致病菌，菌株致病力的強弱主要取決于其產生的毒素和侵襲性酶：a.溶血素：外毒素，能損傷血小板，破壞溶酶體，引起肌體局部缺血和壞死；在血平板培養(yǎng)出現(xiàn)溶血環(huán)。b.殺白細胞素：可破壞人的白細胞和巨噬細胞；c.血漿凝固酶：當金黃色葡萄球菌侵入人體時，該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固，阻礙吞噬細胞的吞噬作用。d.耐熱核酸酶

e.腸毒素：引起急性胃腸炎。生物學特性——致病性金黃色葡萄球菌為條件致病菌，菌株致葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌腸毒素所引起的疾病，可引發(fā)不同程度的急性胃腸炎癥狀，惡心、嘔吐最為突出而且普遍，腹痛、腹瀉次之。當金黃色葡萄球菌污染了含淀粉及水分較多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在溫度條件適宜時，經8-10小時即可相當數(shù)量的腸毒素。葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌腸毒素所引起的疾病，可引發(fā)不同程二、檢驗程序與操作方法食品安全國家標準GB4789.10-2016食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗第一法金黃色葡萄球菌定性檢驗

二、檢驗程序與操作方法食品安全國家標準GB4789.10-檢樣25g(ml)樣品+225ml7.5%氯化鈉肉湯，均質Baird-parker平板，血平板BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂小斜面涂片染色觀察溶血血漿凝固酶試驗報告36±1℃36±1℃18h-

24hBP平板

24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-

24h檢樣25g(ml)樣品+225ml7.5%氯化鈉肉湯，均質Baird-parker平板，血平板BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂小斜面涂片染色觀察溶血血漿凝固酶試驗報告36±1℃36±1℃18h-

24hBP平板

24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-

24h檢樣25g(ml)樣品+225ml7.5%氯化鈉肉湯，均質Baird-parker平板，血平板BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂小斜面涂片染色觀察溶血血漿凝固酶試驗報告36±1℃36±1℃18h-

24hBP平板

24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-

24h檢樣25g(ml)樣品+225ml7.5%氯化鈉肉湯，均質Baird-parker平板，血平板BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂小斜面涂片染色觀察溶血血漿凝固酶試驗報告36±1℃36±1℃18h-

24hBP平板

24h-48h血平板18h-24h36±1℃18h-

24h檢樣25g(ml)樣品+225ml7.5%氯化鈉肉湯，均質檢樣Baird-parker平板，血平板BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂檢驗程序——樣品處理

稱取25g（mL）樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯的無菌均質杯內,8000r/min~10000r/min均質1min~2min,或放入盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1min~2min。檢驗程序——樣品處理稱取25g（mL）樣品至檢驗程序——增菌

利用金黃色葡萄球菌耐鹽的特性（最高可耐受15%的氯化鈉），用7.5%氯化鈉肉湯增菌。

36±1℃培養(yǎng)18h~24h。檢驗程序——增菌利用金黃色葡萄球菌耐鹽的特檢驗程序——分離培養(yǎng)（血平板和BP平板）血平板：金黃色葡萄球菌可以產生溶血素，因此在血平板上產生明顯的溶血環(huán)。典型菌落：呈金黃色，有時也為白色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，菌落周圍有完全透明溶血環(huán)。檢驗程序——分離培養(yǎng)（血平板和BP平板）血平板：金黃色葡萄大而突起，圓形，不透明，表面光滑，有溶血環(huán)陽性陰性大而突起，圓形，不透明，表面光滑，有溶血環(huán)陽性陰性BP（貝爾德-帕克）平板：胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、維生素和礦物元素丙酮酸鈉是一種生長促進劑亞碲酸鹽對除金黃色葡萄球菌外的其他能分解卵黃的菌株有毒性，并使菌落產生黑色卵黃提供營養(yǎng)和有利于觀察卵磷脂環(huán)甘氨酸和氯化鋰對金黃色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。檢驗程序——分離培養(yǎng)BP（貝爾德-帕克）平板：檢驗程序——分離培養(yǎng)

在BP平板上典型菌落為：圓形,表面光滑、凸起、濕潤、菌落直徑為2mm~3mm,顏色呈灰黑色至黑色,有光澤,常有淺色(非白色)的邊緣,周圍繞以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰帶。當用接種針觸及菌落時具有黃油樣黏稠感。有時可見到不分解脂肪的菌株,除沒有不透明圈和清晰帶外,其他外觀基本相同。從長期貯存的冷凍或脫水食品中分離的菌落,其黑色常較典型菌落淺些,且外觀可能較粗糙,質地較干燥。

在BP平板上典型菌落為：圓形,表面光滑、凸起B(yǎng)-P平板圓形、光滑、黑色有光澤,周圍繞以不透明圈,其外有清晰帶B-P平板圓形、光滑、黑色有光澤,周圍繞以不透明圈,其外有革蘭氏陽性，球形，葡萄狀，無芽孢，無莢膜檢驗程序——確證鑒定1.革蘭氏染色鏡檢革蘭氏陽性，球形，葡萄狀，無芽孢，無莢膜檢驗程序——確證鑒檢驗程序——確證鑒定2.血漿凝固酶試驗

金黃色葡萄球菌可以產生血漿凝固酶，因此對其鑒別的主要試驗是測定其凝固酶。試管法挑取BP平板或血平板上至少5個可疑菌落（少于5個全選，分別接種于BHI肉湯和營養(yǎng)瓊脂小斜面，36±1℃培養(yǎng)18h-24h。取0.5mL無菌生理鹽水加入瓶裝凍干兔血漿中至完全溶解，加入培養(yǎng)后的BHI肉湯培養(yǎng)物0.2-0.3mL，振蕩搖勻，放36±1℃恒溫箱或水浴內，每半小時觀察一次，觀察6h，如凝固體積大于原體積一半時，判定為陽性。如結果可疑，從營養(yǎng)瓊脂小斜面挑去菌落到BHI肉湯，重復凝固酶試驗。檢驗程序——確證鑒定2.血漿凝固酶試驗金不凝固少量、零散凝固明顯的塊狀凝固巨大塊凝固完全凝固，倒置不流動陰性陽性不凝固少量、零散凝固明顯的塊狀凝固巨大塊凝固完全凝固，倒置不試管法試管法結果報告在25g(mL)樣品中檢出或未檢出金黃色葡萄球菌。即：檢出/25g(mL)或未檢出/25g(mL)結果報告在25g(mL)樣品中檢出或未檢出金黃色葡萄球菌。小結了解金黃色葡萄球菌的生物學特性（耐鹽，能產毒素、凝固酶等）掌握檢驗流程知識點：增菌液，BP平板和血平板的典型菌落特征，凝固酶試驗。小結了解金黃色葡萄球菌的生物學特性（耐鹽，能產毒素、凝固酶等歷史ⅱ岳麓版第13課交通與通訊的變化資料精品課件歡迎使用歷史ⅱ岳麓版第13課交通與通訊的變化資料精品課件歡迎使用金黃色葡萄球菌檢驗課件金黃色葡萄球菌檢驗課件金黃色葡萄球菌檢驗課件[自讀教材·填要點]一、鐵路，更多的鐵路1．地位鐵路是

建設的重點，便于國計民生，成為國民經濟發(fā)展的動脈。2．出現(xiàn)1881年，中國自建的第一條鐵路——唐山

至胥各莊鐵路建成通車。1888年，宮廷專用鐵路落成。交通運輸開平[自讀教材·填要點]一、鐵路，更多的鐵路交通運輸開平

3．發(fā)展(1)原因：①甲午戰(zhàn)爭以后列強激烈爭奪在華鐵路的

。②修路成為中國人

的強烈愿望。(2)成果：1909年

建成通車；民國以后，各條商路修筑權收歸國有。4．制約因素政潮迭起，軍閥混戰(zhàn)，社會經濟凋敝，鐵路建設始終未入正軌。修筑權救亡圖存京張鐵路3．發(fā)展修筑權救亡圖存京張鐵路

二、水運與航空1．水運(1)1872年,

正式成立，標志著中國新式航運業(yè)的誕生。(2)1900年前后，民間興辦的各種輪船航運公司近百家，幾乎都是在列強排擠中艱難求生。2．航空(1)起步：1918年，附設在福建馬尾造船廠的海軍飛機工程處開始研制

。(2)發(fā)展：1918年，北洋政府在交通部下設“

”；此后十年間，航空事業(yè)獲得較快發(fā)展。輪船招商局水上飛機籌辦航空事宜處二、水運與航空輪船招商局水上飛機籌辦航空事宜處三、從驛傳到郵政1．郵政(1)初辦郵政：1896年成立“大清郵政局”，此后又設

，郵傳正式脫離海關。(2)進一步發(fā)展：1913年，北洋政府宣布裁撤全部驛站；1920年，中國首次參加

。郵傳部萬國郵聯(lián)大會三、從驛傳到郵政郵傳部萬國郵聯(lián)大會2．電訊(1)開端：1877年，福建巡撫在

架設第一條電報線，成為中國自辦電報的開端。(2)特點：進程曲折，發(fā)展緩慢，直到20世紀30年代情況才發(fā)生變化。3．交通通訊變化的影響(1)新式交通促進了經濟發(fā)展，改變了人們的通訊手段和

，

轉變了人們的思想觀念。(2)交通近代化使中國同世界的聯(lián)系大大增強，使異地傳輸更為便捷。(3)促進了中國的經濟與社會發(fā)展，也使人們的生活

。臺灣出行方式多姿多彩2．電訊臺灣出行方式多姿多彩[合作探究·提認知]

電視劇《闖關東》講述了濟南章丘朱家峪人朱開山一家，從清末到九一八事變爆發(fā)闖關東的前塵往事。下圖是朱開山一家從山東輾轉逃亡到東北途中可能用到的四種交通工具。[合作探究·提認知]

電視劇《闖關東》講述了濟南章丘依據(jù)材料概括晚清中國交通方式的特點，并分析其成因。

提示：特點：新舊交通工具并存(或：傳統(tǒng)的帆船、獨輪車，近代的小火輪、火車同時使用)。

原因：近代西方列強的侵略加劇了中國的貧困，阻礙社會發(fā)展；西方工業(yè)文明的沖擊與示范；中國民族工業(yè)的興起與發(fā)展；政府及各階層人士的提倡與推動。依據(jù)材料概括晚清中國交通方式的特點，并分析其成因。[串點成面·握全局][串點成面·握全局]金黃色葡萄球菌檢驗課件

一、近代交通業(yè)發(fā)展的原因、特點及影響1．原因(1)先進的中國人為救國救民，積極興辦近代交通業(yè)，促進中國社會發(fā)展。(2)列強侵華的需要。為擴大在華利益，加強控制、鎮(zhèn)壓中國人民的反抗，控制和操縱中國交通建設。(3)工業(yè)革命的成果傳入中國，為近代交通業(yè)的發(fā)展提供了物質條件。一、近代交通業(yè)發(fā)展的原因、特點及影響2．特點(1)近代中國交通業(yè)逐漸開始近代化的進程，鐵路、水運和航空都獲得了一定程度的發(fā)展。(2)近代中國交通業(yè)受到西方列強的控制和操縱。(3)地域之間的發(fā)展不平衡。3．影響(1)積極影響：促進了經濟發(fā)展，改變了人們的出行方式，一定程度上轉變了人們的思想觀念；加強了中國與世界各地的聯(lián)系，豐富了人們的生活。(2)消極影響：有利于西方列強的政治侵略和經濟掠奪。2．特點1．李鴻章1872年在上海創(chuàng)辦輪船招商局，“前10年盈和，成為長江上重要商局，招商局和英商太古、怡和三家呈鼎立之勢”。這說明該企業(yè)的創(chuàng)辦 (

)A．打破了外商對中國航運業(yè)的壟斷B．阻止了外國對中國的經濟侵略C．標志著中國近代化的起步D．使李鴻章轉變?yōu)槊褡遒Y本家1．李鴻章1872年在上海創(chuàng)辦輪船招商局，“前10年盈和，成解析：李鴻章是地主階級的代表，并未轉化為民族資本家；洋務運動標志著中國近代化的開端，但不是具體以某個企業(yè)的創(chuàng)辦為標志；洋務運動中民用企業(yè)的創(chuàng)辦在一定程度上抵制了列強的經濟侵略，但是并未能阻止其侵略。故B、C、D三項表述都有錯誤。答案：A解析：李鴻章是地主階級的代表，并未轉化為民族資本家；洋務運動二、近代以來交通、通訊工具的進步對人們社會生活的影響(1)交通工具和交通事業(yè)的發(fā)展，不僅推動各地經濟文化交流和發(fā)展，而且也促進信息的傳播，開闊人們的視野，加快生活的節(jié)奏，對人們的社會生活產生了深刻影響。(2)通訊工具的變遷和電訊事業(yè)的發(fā)展，使信息的傳遞變得快捷簡便，深刻地改變著人們的思想觀念，影響著人們的社會生活。二、近代以來交通、通訊工具的進步對人們社會生活的影響2．清朝黃遵憲曾作詩曰：“鐘聲一及時，頃刻不少留。雖有萬鈞柁，動如繞指柔?！边@是在描寫 (

)A．電話B．汽車C．電報 D．火車解析：從“萬鈞柁”“動如繞指柔”可推斷為火車。答案：D2．清朝黃遵憲曾作詩曰：“鐘聲一及時，頃刻不少留。雖金黃色葡萄球菌檢驗課件[典題例析][例1]

上海世博會曾吸引了大批海內外人士利用各種交通工具前往參觀。然而在19世紀七十年代，江蘇沿江居民到上海，最有可能乘坐的交通工具是 (

)A．江南制造總局的汽車B．洋人發(fā)明的火車C．輪船招商局的輪船D．福州船政局的軍艦[典題例析][例1]上海世博會曾吸引了大批海內外人[解析]由材料信息“19世紀七十年代，由江蘇沿江居民到上?！笨膳袛嘧钣锌赡苁禽喆猩叹值妮喆?。[答案]

C[解析]由材料信息“19世紀七十年代，由江蘇沿江居[題組沖關]1．中國近代史上首次打破列強壟斷局面的交通行業(yè)是(

)A．公路運輸 B．鐵路運輸C．輪船運輸 D．航空運輸解析：根據(jù)所學1872年李鴻章創(chuàng)辦輪船招商局，這是洋務運動中由軍工企業(yè)轉向兼辦民用企業(yè)、由官辦轉向官督商辦的第一個企業(yè)。具有打破外輪壟斷中國航運業(yè)的積極意義，這在一定程度上保護了中國的權利。據(jù)此本題選C項。答案：C[題組沖關]1．中國近代史上首次打破列強壟斷局面的交通行業(yè)是2.右圖是1909年《民呼日報》上登載的一幅漫畫，其要表達的主題是(

)A．帝國主義掠奪中國鐵路權益B．西方國家學習中國文化C．西方列強掀起瓜分中國狂潮D．西方八國組成聯(lián)軍侵略中國2.右圖是1909年《民呼日報》上登載的解析：從圖片中可以了解到各國舉的燈籠是火車形狀，20世紀初的這一幅漫畫正反映了帝國主義掠奪中國鐵路權益。B項說法錯誤，C項不能反映漫畫的主題，D項時間上不一致。答案：A解析：從圖片中可以了解到各國舉的燈籠是火車形狀，20世紀初的金黃色葡萄球菌檢驗課件[典題例析][例2]

(2010·福建高考)上海是近代中國茶葉的一個外銷中心。1884年，福建茶葉市場出現(xiàn)了茶葉收購價格與上海出口價格同步變動的現(xiàn)象。與這一現(xiàn)象直接相關的近代事業(yè)是(

)A．電報業(yè) B．大眾報業(yè)C．鐵路交通業(yè) D．輪船航運業(yè)[解析]材料主要反映了信息交流的快捷，故選A。[答案]

A[典題例析][例2](2010·福建高考)上海是近[題組沖關]3．假如某愛國實業(yè)家在20世紀初需要了解全國各地商業(yè)信息，可采用的最快捷的方式是 (

)A．乘坐飛機赴各地了解B．通過無線電報輸送訊息C．通過互聯(lián)網(wǎng)D．乘坐火車赴各地了解解析：本題考查中國近代物質生活的變遷。注意題干信息“20世紀初”“最快捷的方式”，因此應選B，火車速度遠不及電報快。20世紀30年代民航飛機才在中國出現(xiàn)，互聯(lián)網(wǎng)出現(xiàn)在20世紀90年代。答案：B[題組沖關]3．假如某愛國實業(yè)家在20世紀初需要了解全國各地4．下列不屬于通訊工具變遷和電訊事業(yè)發(fā)展影響的是(

)A．信息傳遞快捷簡便B．改變著人們的思想觀念C．阻礙了人們的感情交流D．影響著人們的社會生活解析：新式通訊工具方便快捷，便于人們感情的溝通和交流。答案：C4．下列不屬于通訊工具變遷和電訊事業(yè)發(fā)展影響