項(xiàng)目六

魚類人工繁殖技術(shù)任務(wù)六受精卵孵化方法任務(wù)六孵化孵化是指受精卵經(jīng)胚胎發(fā)育到仔魚出膜的全過程。一、受精卵的孵化卵子質(zhì)量鑒定

特征好卵差卵形狀質(zhì)量好不成熟或過熟吸水情況吸水膨脹快吸水膨脹慢，脹不足彈性及大小卵球飽滿，富有彈性，大小整齊卵球稍癟皺，彈性差，脹不足顏色鮮明，輪廓清晰黯淡，輪廓模糊魚卵在盤中靜止時(shí)胚體位置胚體（動(dòng)物極）側(cè)臥胚體向上，植物極向下胚胎發(fā)育情況卵裂整齊，發(fā)育正常卵裂不規(guī)則，分裂球大小不整齊，發(fā)育不正常（一）漂流性卵的孵化（以四大家魚為例）家魚屬敞水性產(chǎn)卵類型，其卵子的孵化需要充足的溶氧和一定的流水。漂浮性卵一般在孵化環(huán)道中流水孵化，孵化密度為100萬(wàn)粒卵/m3。受精卵剛放入時(shí)，水流不宜太大，一般水流速度為0.15～0.30m/s，以卵剛好呈漂浮狀為宜。在胚胎發(fā)育過程中，可適當(dāng)增大水流以保持氧氣的足夠供應(yīng)。仔魚破膜時(shí)，氧氣消耗量大，且剛出膜的仔魚，器官發(fā)育不全、鰾未形成，無(wú)胸鰭，不會(huì)游泳，非常嬌嫩，易下沉窒息，此時(shí)應(yīng)加大水流，使其能在水中漂游。當(dāng)仔魚能平游時(shí)，體內(nèi)卵黃囊逐漸消失，并能頂流，此時(shí)宜適當(dāng)減緩水流，以免消耗仔魚體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)。（二）粘性卵的孵化（以鯉為例）1、池塘孵化生產(chǎn)上多直接使用魚苗培育池進(jìn)行孵化，以減少魚苗轉(zhuǎn)塘的麻煩和損失。將粘有魚卵的魚巢放入池中水下10cm即可孵化，每666.7m2水面可放30～50萬(wàn)粒卵（以下塘魚苗20萬(wàn)為準(zhǔn)）。魚苗剛孵出時(shí)，不可立即將魚巢取出，此時(shí)魚苗大部分時(shí)間附著在魚巢上，靠卵黃囊提供營(yíng)養(yǎng)，到魚苗能主動(dòng)游泳覓食時(shí)，才能撈出魚巢。2、淋水孵化將粘附魚卵的魚巢懸吊在室內(nèi)或平鋪在架子上，用淋水的方法使魚巢保持濕潤(rùn)。孵化期間，室溫保持在20～25℃。此法能人為控制孵化時(shí)室內(nèi)溫度、濕度，觀察胚胎發(fā)育情況，具有孵化速度一致，減少水霉病感染，孵化不受天氣變化影響等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)胚胎發(fā)育到發(fā)眼期時(shí)應(yīng)立即將魚巢移到孵化池內(nèi)孵化，注意室內(nèi)與水池溫度相差不超過5℃。3、脫粘流水孵化鯉的粘性卵在人工授精后2～3min，通過去粘性處理，便可用四大家魚的孵化設(shè)備進(jìn)行流水孵化。（1）泥漿脫粘法先用黃泥土與水混合成稀泥漿水，一般5kg水加0.5～1kg黃泥，經(jīng)40目網(wǎng)布過濾。脫粘方法是先將泥漿水不停翻動(dòng)，同時(shí)將受精卵緩慢倒入泥漿水中，待全部受精卵撒入泥漿水中后，繼續(xù)翻動(dòng)泥漿水2～3min。最后將脫粘受精卵移入網(wǎng)箱中洗去多余的泥漿，即可放入孵化器中流水孵化。（2）滑石粉脫粘法將100g滑石粉即硅酸鎂加20～25g食鹽溶于10L水中，攪拌成懸濁液，即可用來(lái)脫除有粘性的鯉魚卵1～1.5kg。操作時(shí)一邊向懸濁液中慢慢倒入魚卵，一邊用羽毛輕輕攪動(dòng)，經(jīng)30min后，受精卵呈分散顆粒狀，達(dá)到脫粘效果。經(jīng)漂洗后放入孵化器中進(jìn)行流水孵化。

（3）尿素脫粘法受精后3～5min，將受精卵先加入1.5倍的1號(hào)脫粘液（3g/L的尿素和4g/L的氯化鈉混合水溶液），用羽毛攪拌1.5～2h，倒去1號(hào)脫粘液再加入相當(dāng)于受精卵10倍的2號(hào)脫粘液（8.5g/L的尿素水溶液），每隔15min攪拌一次，經(jīng)2～3h即可用清水清洗魚卵，便完全脫粘，然后放入孵化器中孵化。該法脫粘效果較好，卵膜透明，易觀察胚胎發(fā)育情況，但脫粘時(shí)間過長(zhǎng)，生產(chǎn)效率較低。（4）清水機(jī)械脫粘法將500g的受精卵放入100～150mL水中，用人工或機(jī)械方法帶動(dòng)羽毛，輕輕攪動(dòng)1min，再加入0.5L水，并迅速攪拌2～3min，然后加入1.0～1.5L水，繼續(xù)攪動(dòng)25～30min，即可將粘性脫去。此法可以避免脫粘劑顆粒對(duì)卵膜的損傷，從而減少水霉病發(fā)生。（三）浮性卵的孵化（以石斑魚為例）石斑魚產(chǎn)浮性卵，可以在孵化環(huán)道、水泥池、土池中人工孵化，生產(chǎn)上大多采用孵化桶在室內(nèi)孵化，孵化密度不宜超過80萬(wàn)粒/m3水體，在桶中央放置一氣石，氣流速度以能使魚卵或仔魚較均勻懸浮在水中為度。受精卵發(fā)育到原腸期后，發(fā)育正常的胚胎無(wú)色透明，死卵呈白色，有死卵時(shí)應(yīng)停止充氣10～15min，正常卵上浮，未受精的卵和發(fā)育不正常的死卵及少量雜物沉于孵化桶底部，開啟孵化桶底部排水閥，緩慢排水，將死卵及雜物排除，之后立即恢復(fù)充氣，并加水至正常水位。孵化用水必須清新，需經(jīng)過砂濾，并用紫外光殺菌。孵化過程中的污物漂浮在水面上，可以用軟吸管清除。海水魚卵在孵化時(shí)需要注意調(diào)節(jié)鹽度，在不同鹽度條件下，卵的沉浮狀態(tài)不同。如水溫25～26℃條件下，鹽度低于25.6時(shí)，鞍帶石斑魚的卵沉底；鹽度高于27.1時(shí)，卵則上浮。（四）沉性卵的孵化（以虹鱒為例）虹鱒的受精卵吸水膨脹后，放入孵化器進(jìn)行孵化。通常在孵化室內(nèi)進(jìn)行，避免陽(yáng)光直射。目前廣泛采用孵化桶或平列槽（一種用玻璃鋼制成的仔魚飼育槽，上口長(zhǎng)3m，寬0.42m；底長(zhǎng)2.98m，寬0.42m，后部有一直徑為5cm可上下活動(dòng)調(diào)節(jié)槽內(nèi)水位的排水管，槽內(nèi)套6個(gè)小槽，共可容納仔魚5～6萬(wàn)尾），根據(jù)孵化桶的大小，孵化密度介于2萬(wàn)粒到10萬(wàn)粒魚卵之間。孵化用水自下部流經(jīng)全部魚卵后從上部溢出，每桶注水量4～7L/min。孵化過程中，當(dāng)明顯出現(xiàn)眼點(diǎn)時(shí)應(yīng)轉(zhuǎn)入平列槽，并人工揀除死卵。也可單獨(dú)在孵化桶（圖4-16）或平列槽（圖4-17）中孵化。水溫在8～10℃時(shí)，30～35d魚苗孵出。整個(gè)孵化期間均使魚卵處于安靜狀態(tài)，并嚴(yán)格避免光照。項(xiàng)目六

魚類人工繁殖技術(shù)任務(wù)六受精卵孵化方法二、孵化管理措施(1)前期準(zhǔn)備工作催產(chǎn)前必須對(duì)孵化設(shè)施進(jìn)行一次徹底的檢查、試用，若有不符合要求的就及時(shí)修復(fù)，特別是進(jìn)出水系統(tǒng)，水流情況，進(jìn)水水源情況，排水濾水窗紗有無(wú)損壞，進(jìn)水過濾網(wǎng)布是否安好，所用工具是否備齊等。然后將有關(guān)工具及設(shè)施清洗干凈或消毒后備用。(2)孵化容器的流速調(diào)節(jié)使流速大致控制在不使卵粒、仔魚下沉堆集為度，魚苗平游后應(yīng)適量減低流速。(3)洗刷濾水紗窗隨時(shí)清洗排出水過濾窗紗，以保證排水暢通。(4)注意防止早脫膜現(xiàn)象

早脫膜會(huì)導(dǎo)致胚胎大量死亡。導(dǎo)致早脫膜的原因常見有：①不同批產(chǎn)的魚卵在同一環(huán)道內(nèi)套孵，早批卵正常出膜時(shí)生成的孵化酶引起后一批魚卵的溶膜；②循環(huán)使用孵化用水致使孵化酶在水體中濃度增大而導(dǎo)致早脫膜；③孵化水溶氧太低或pH較低(pH值低于6.5)從而使孵化酶活性提高產(chǎn)生早脫膜；④孵化密度太大，使孵化酶濃度提高引起早脫膜；⑤卵粒質(zhì)量太差有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)早脫膜。生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)具體情況預(yù)防或解決。當(dāng)出現(xiàn)少量脫膜現(xiàn)象時(shí)，可從孵化工具底部緩緩加入高錳酸鉀溶液，使卵膜變?yōu)辄S色可抑制早脫膜。(5)防除敵害若孵化水體中劍水蚤量較大時(shí)，可用0.1ppm的晶體敵百蟲水溶液潑灑。或生物防除。(6)注意防止水霉病導(dǎo)致水霉病發(fā)生的原因一般有下面幾種：①水溫較低；②魚卵、魚苗質(zhì)量較差，受精率較低，從而使水體中死卵、死苗較多，大量感染水霉；③水質(zhì)較差。若孵化中出現(xiàn)水霉嚴(yán)重現(xiàn)象，可用孔雀石綠溶液潑灑，使水體呈深綠色，維持該濃度15分鐘左右，連用兩次。(7)預(yù)防氣泡病氣泡病是在魚卵或仔魚身上形成若干個(gè)氣泡，使其漂浮于水面不能下沉。發(fā)病的主要原因是水中浮游植物較多，導(dǎo)致水中溶氧過飽和，因此可從改善水質(zhì)方面予以解決，如立即改用較清潔的瘦水或沖注部分井水等。(8)計(jì)算受精率和孵化率通常在胚胎發(fā)育至原腸中期(即胚盤下包2/3時(shí))計(jì)算魚卵的受精率。在水溫20—25℃時(shí)，約需8小時(shí)。受精率=受精卵數(shù)/檢查卵的總數(shù)×100%孵化率是指受精卵中能孵出魚苗的百分率，一般在出膜完成后進(jìn)行計(jì)算。孵化率=受精卵出苗總數(shù)/受精卵總數(shù)×100%

項(xiàng)目六

魚類人工繁殖技術(shù)任務(wù)六受精卵孵化方法三、影響孵化的環(huán)境因子

受精卵孵化過程中，水溫、溶解氧、鹽度、光照、混濁度、敵害生物等因子均影響胚胎發(fā)育，如果環(huán)境因子不適宜，就會(huì)大大降低孵化率。1、水溫水溫是胚胎發(fā)育的重要因素之一，受精卵孵化所需溫度范圍隨親魚種類而變化，如冷水性魚類虹鱒胚胎發(fā)育適溫范圍為7～13℃，最適水溫為9℃；溫水性魚類，如四大家魚受精卵孵化適溫范圍為22～28℃，最適宜水溫為26±1℃；熱帶魚類，如斜帶石斑魚胚胎發(fā)育的適宜水溫為25～28℃。2、溶氧魚類胚胎個(gè)體發(fā)育耗氧率存在較大差異，同種不同個(gè)體之間、不同種之間胚胎發(fā)育所需要氧氣均不同，發(fā)育時(shí)期不同差異也較大。隨著胚胎的發(fā)育，耗氧量逐漸增加，鰱在胚胎期的尾芽出現(xiàn)后，耗氧量驟然增加，為早期的2倍多。鰱胚胎不同發(fā)育階段的耗氧量發(fā)育時(shí)期2～8細(xì)胞期

囊胚期原腸期尾芽出現(xiàn)心臟搏動(dòng)出膜開始血液循環(huán)開始mg/（h·1000粒）0.2720.3180.3180.6570.8460.5830.983mg/（g·h）0.190.2230.2230.460.590.5970.593、水流受精卵在流動(dòng)的水體中孵化時(shí)，可以得到充足的氧氣。流水可以溶解并及時(shí)帶走胚胎代謝產(chǎn)物，減少水質(zhì)污染。流水還能刺激孵化酶的分泌，使仔魚提前出膜，鱖受精卵在流水孵化環(huán)道中孵化要比在靜水中孵化快得多。通過調(diào)節(jié)水的流量，使受精卵在水中適度地懸浮，可以有效抑制真菌的感染，同時(shí)也可將死卵和活卵分開。

在胚胎發(fā)育早期，胚胎對(duì)外界刺激比較敏感，此時(shí)流量不應(yīng)過大，微懸浮即可。達(dá)到眼點(diǎn)期后，流量可增大，使受精卵懸浮運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)。在魚苗孵化出膜時(shí)，對(duì)流量變化更為敏感，應(yīng)適當(dāng)調(diào)小水流量。在確定水流量時(shí)，還應(yīng)考慮魚的種類差異，有些魚類可能對(duì)懸浮較為敏感。4、光線魚類胚胎發(fā)育對(duì)光的反應(yīng)具有遺傳因素。因此，光線對(duì)不同生態(tài)類群的魚類胚胎發(fā)育有著不同的影響。鱘卵在有光線條件比在黑暗條件下胚胎發(fā)育速度平均要快18～26h。而且，在有光線情況下發(fā)育孵出的仔魚個(gè)體較長(zhǎng)和較重。黃鱔受精卵的發(fā)育需要有光的條件，500～1500lx范圍時(shí)孵化率較高，在這范圍內(nèi)隨著照度的升高出膜時(shí)間逐漸縮短，但不能超過1500lx，否則孵化率下降。直射的光線對(duì)于產(chǎn)卵于石礫中的鮭鱒魚類的胚胎發(fā)育不利，引起胚胎畸形率增加。

一般來(lái)說，浮性卵發(fā)育所需的光照強(qiáng)度比沉性卵、尤其是比埋在砂下的卵要強(qiáng)一些。5、鹽度鹽度對(duì)胚胎的影響因魚種類而異，且與魚的生態(tài)習(xí)性密切相關(guān)。當(dāng)鹽度過高或過低時(shí)，卵膜難以調(diào)節(jié)細(xì)胞與周圍介質(zhì)之間的物質(zhì)平衡，會(huì)造成卵細(xì)胞損傷。不同鹽度會(huì)造成受精卵沉浮性變化，鹽度低時(shí)會(huì)導(dǎo)致完全沉性，較高時(shí)會(huì)導(dǎo)致完全浮性，完全沉性和完全浮性均不利于孵化。軍曹魚在鹽度29～38范圍內(nèi)，胚胎的孵化率無(wú)顯著差異，當(dāng)鹽度超出或低于此范圍時(shí)，孵化率降幅達(dá)到18～49%，且仔魚畸形率明顯提高。魚類受精卵沉性鹽度受精卵浮性鹽度胚胎發(fā)育適鹽范圍胚胎發(fā)育最適鹽度范圍真鯛＜27.8＞31.211.08～48.8528.15～32.70黑鯛＜26.25＞32.1518.12～32.1520.22～34.11平鯛－－12～5228～32高體鰤＜30＞3230～4032～35鮻＜20.0＞25.210～35.615～35.6雙棘黃姑魚＜25＞3230～40