第22章

引起侵襲性感染的真菌

第22章

引起侵襲性感染的真菌

1概論引起侵襲性感染的真菌，又稱深部感染真菌，是指能侵襲深部組織和內(nèi)臟及全身的真菌，主要有假絲酵母菌、隱球菌、曲霉、毛霉、組織胞漿菌和卡氏肺孢菌等，其中以隱球菌感染較常見。組織胞漿菌為二相性真菌，假絲酵母菌、曲霉菌、毛霉菌和卡氏肺孢菌等為條件致病性真菌，只有在一定條件下才引起機體致病。概論引起侵襲性感染的真菌，又稱深部感染真菌，是指能侵襲深部2假絲酵母菌屬假絲酵母菌（Candida），俗稱念珠菌，生物學(xué)分類為半知菌亞門、半知菌綱、隱球菌目、假絲酵母菌屬。本屬菌有150多個種，其中有11種對人有致病性，其中以白假絲酵母菌為最常見的致病菌。假絲酵母菌屬假絲酵母菌（Candida），俗稱念珠菌，生物學(xué)3白假絲酵母菌臨床意義：女性的假絲酵母菌性陰道炎、外陰炎；男性假絲酵母菌龜頭炎、包皮炎；體質(zhì)虛弱嬰兒的鵝口瘡；假絲酵母菌性腸炎、肺炎、膀胱炎、腎孟腎炎和心內(nèi)膜炎等；中樞神經(jīng)系統(tǒng)白色假絲酵母菌病，如腦膜炎、腦膜腦炎、腦膿腫等。白假絲酵母菌臨床意義：4引起侵襲性感染的真菌--課件5白假絲酵母菌微生物檢驗一、標(biāo)本直接檢查二、分離培養(yǎng)鑒定三、藥物敏感試驗四、抗體檢測五、動物試驗

白假絲酵母菌微生物檢驗一、標(biāo)本直接檢查6分離培養(yǎng)及鑒定菌落特征:標(biāo)本沙氏培養(yǎng)基上25℃或37℃培養(yǎng)1~4d后，培養(yǎng)基表面可出現(xiàn)奶油色類酵母型菌落。鏡檢可見假菌絲和芽生孢子。鑒定試驗:芽管形成試驗，厚膜孢子形成試驗，糖同化或發(fā)酵試驗，產(chǎn)色培養(yǎng)基鑒定。分離培養(yǎng)及鑒定菌落特征:標(biāo)本沙氏培養(yǎng)基上7沙氏斜面血平板沙氏斜面血平板8芽管形成試驗芽管形成試驗9產(chǎn)色培養(yǎng)基產(chǎn)色培養(yǎng)基10熱帶假絲酵母菌

直接顯微鏡檢查將標(biāo)本作涂片革蘭染色后鏡檢，觀察革蘭陽性的假絲酵母菌。分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本沙氏培養(yǎng)基上形成色暗而干燥的菌落取菌落作TZC反應(yīng)取菌落作糖發(fā)酵或同化試驗。芽管形成較遲（血清中6h以上），不形成厚膜孢子、動物試驗陰性。熱帶假絲酵母菌直接顯微鏡檢查將標(biāo)本作涂片革蘭染色后鏡11隱球菌屬其中對人致病的最主要是新生隱球菌及其變種（新型隱球菌新型變種、新型隱球菌格特變種和新型隱球菌格魯比變種。新生隱球菌廣泛分布于自然界，也可存在于人體體表、口腔和腸道中。隱球菌屬其中對人致病的最主要是新生隱球菌及其變種（新型12新生隱球菌（墨汁負染色）

新生隱球菌（墨汁負染色）13隱球菌微生物檢驗

直接鏡檢：用患者腦脊液作墨汁負染色檢查是診斷隱球菌腦膜炎最簡便、快速之方法?？乖瓩z測：用免疫學(xué)方法檢測隱球菌莢膜多糖特異性抗原，以乳膠凝集試驗最為常用，此法簡便、快速。核酸檢測、藥物敏感試驗、抗體檢測。分離培養(yǎng)：將標(biāo)本接種在沙氏培養(yǎng)基上，病原性隱球菌在25℃和37℃孵育的可生長，而非病原性隱球菌在37℃時不生長。培養(yǎng)2~5d后觀察菌落形態(tài)特點，并取菌落作印度墨汁負染色鏡檢。隱球菌微生物檢驗直接鏡檢：用患者腦脊液作墨汁負染色檢查是診14新生隱球菌菌落新生隱球菌菌落15新生隱球菌微生物鑒定1.酚氧化酶試驗將菌接種L-多巴枸櫞酸鐵和咖啡酸培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2~5d，新生隱球菌呈棕黑色菌落。用已知新生隱球菌和淺白隱球菌分別作陽性和陰性對照。2.脲酶試驗新生隱球菌能產(chǎn)生脲酶，可分解尿素瓊脂培養(yǎng)基的尿素形成NH4和CO2，使培養(yǎng)基pH升高，培養(yǎng)基由黃色變?yōu)榉奂t色。白假絲酵母菌則為陰性。3.糖同化及發(fā)酵試驗新生隱球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能發(fā)酵糖類、不同化硝酸鹽。非致病性隱球菌則不能同化肌醇。新生隱球菌微生物鑒定1.酚氧化酶試驗將菌接種L-多巴枸櫞16曲霉菌

曲霉菌是條件致病菌，人體對其有極強免疫力，只有在人體免疫功能降低時才能致病。曲霉可引起呼吸系統(tǒng)曲霉??；全身性曲霉??；曲霉可產(chǎn)生毒素引起機體食物中毒；致癌作用。

曲霉菌曲霉菌是條件致病菌，人體對其有極強免疫17曲霉微生物檢驗

直接顯微鏡檢查取痰液等被檢材料涂于載玻片上，在鏡下可見分枝的菌絲、較粗的分生孢子頭，頂端膨大形成頂囊，頂囊上有小梗，小梗上有許多小分生孢子。抗原檢測、抗體檢測、藥敏試驗、皮膚試驗。分離培養(yǎng)與鑒定：標(biāo)本接種沙氏瓊脂，室溫培養(yǎng)后菌落形成快，呈毛狀，一般為黃綠色。將菌落涂片鏡檢可見特征性的分子孢子頭和足細胞。根據(jù)不同的曲霉的形態(tài)和菌落特征確定菌種。

曲霉微生物檢驗直接顯微鏡檢查取痰液等被檢材料涂于載玻片18曲霉結(jié)構(gòu)圖曲霉結(jié)構(gòu)圖19煙曲霉菌落煙曲霉,光鏡X400煙曲霉菌落煙曲霉,光鏡X40020黃曲霉菌落黃曲霉,光鏡X200

黃曲霉菌落黃曲霉,光鏡X20021黑曲霉菌落

黑曲霉,光鏡X200黑曲霉菌落黑曲霉,光鏡X20022土曲霉菌落

土曲霉，光鏡X200

土曲霉菌落土曲霉，光鏡X20023構(gòu)巢曲霉菌落

構(gòu)巢曲霉,光鏡X400構(gòu)巢曲霉菌落構(gòu)巢曲霉,光鏡X40024雜色曲霉菌落雜色曲霉,光鏡X400雜色曲霉菌落雜色曲霉,光鏡X40025曲霉菌

曲霉菌是條件致病菌，人體對其有極強免疫力，只有在人體免疫功能降低時才能致病。曲霉可引起呼吸系統(tǒng)曲霉病；全身性曲霉病；曲霉可產(chǎn)生毒素引起機體食物中毒；致癌作用。最常見的是煙曲霉、黃曲霉和黑曲霉。曲霉菌曲霉菌是條件致病菌，人體對其有極強免疫26曲霉微生物檢驗

直接顯微鏡檢查取痰液等被檢材料涂于載玻片上，在鏡下可見分枝的菌絲、較粗的分生孢子頭，頂端膨大形成頂囊，頂囊上有小梗，小梗上有許多小分生孢子?？乖瓩z測、抗體檢測、藥敏試驗、皮膚試驗。分離培養(yǎng)與鑒定：標(biāo)本接種沙氏瓊脂，室溫培養(yǎng)后菌落形成快，呈毛狀，一般為黃綠色。將菌落涂片鏡檢可見特征性的分子孢子頭和足細胞。根據(jù)不同的曲霉的形態(tài)和菌落特征確定菌種。

曲霉微生物檢驗直接顯微鏡檢查取痰液等被檢材料涂于載玻片27曲霉結(jié)構(gòu)圖曲霉結(jié)構(gòu)圖28煙曲霉菌落煙曲霉,光鏡X400煙曲霉菌落煙曲霉,光鏡X40029黃曲霉菌落黃曲霉,光鏡X200

黃曲霉菌落黃曲霉,光鏡X20030黑曲霉菌落

黑曲霉,光鏡X200黑曲霉菌落黑曲霉,光鏡X20031土曲霉菌落

土曲霉，光鏡X200

土曲霉菌落土曲霉，光鏡X20032構(gòu)巢曲霉菌落

構(gòu)巢曲霉,光鏡X400構(gòu)巢曲霉菌落構(gòu)巢曲霉,光鏡X40033雜色曲霉菌落雜色曲霉,光鏡X400雜色曲霉菌落雜色曲霉,光鏡X40034組織胞漿菌屬有兩個種：莢膜組織胞漿菌、組織孢漿菌的杜波變種。本菌傳染性極大，主要侵犯網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，有時也可由血行播散而侵犯全身各臟器。組織胞漿菌是一種雙相型真菌，在25℃培養(yǎng)時呈典型菌絲體，在37℃培養(yǎng)時為酵母型，位于細胞內(nèi)或外。

組織胞漿菌屬有兩個種：莢膜組織胞漿菌、組織孢漿菌的杜波變種。35微生物檢驗1.直接顯微鏡檢查應(yīng)涂片染色后檢查。痰液等標(biāo)本：涂片后先用甲醇固定10min，再用姬姆薩染色鏡檢。皮損、膿液等標(biāo)本：用20%KOH涂片后鏡檢2.抗原檢測、藥物敏感試驗、抗體檢測3.分離培養(yǎng)與鑒定①標(biāo)本含抗生素的沙氏培養(yǎng)基25℃培養(yǎng)，生長緩慢，有時需4~6周才開始生長，逐漸形成白色至棕色絨毛狀菌落。

微生物檢驗1.直接顯微鏡檢查應(yīng)涂片染色后檢查。36②轉(zhuǎn)種于血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，很快形成酵母型菌落。③培養(yǎng)物顯微鏡特征：25℃沙氏培養(yǎng)，可以發(fā)現(xiàn)特征性的大分生孢子，但初代培養(yǎng)不典型，繼代培養(yǎng)可有典型大分生孢子。④鑒定：取可疑菌落涂片染色鏡檢，并作脲酶試驗和明膠液化試驗。②轉(zhuǎn)種于血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，很快形成酵母型菌落。37莢膜組織胞漿菌菌落為棉絮狀，鏡檢可見細長有隔菌絲，菌絲側(cè)面或孢子柄上長有特殊的圓形大分生孢子，厚壁，四周有棘突，排列如齒輪直徑8～14μm，表面有指狀突起，形成對組織胞漿菌有突出診斷意義的特征性齒輪狀大分生孢子。血液標(biāo)本油鏡下鏡檢可見在中性粒細胞或單核細胞中有卵圓形或圓形的酵母細胞。莢膜組織胞漿菌菌落為棉絮狀，鏡檢可見細長有隔菌絲，菌絲側(cè)面或38卡氏肺孢菌卡氏肺孢菌（pneumocycsiscarinii,PC），曾稱為卡氏肺孢子蟲。卡氏肺孢菌可寄生于多種動物，也可寄生于健康人體。廣泛分布于自然界，如土壤和水等?？ㄊ戏捂呔〉膫鞑ネ緩街饕强諝鈧鞑?，在健康人體內(nèi)，多為無癥狀的隱性感染。當(dāng)宿主免疫力下降，如長期使用免疫抑制劑、器官移植、腫瘤、艾滋病等，潛伏的卡氏肺孢菌在病人肺內(nèi)大量繁殖擴散，使肺泡上皮細胞受損，導(dǎo)致間質(zhì)性漿細胞肺炎，又稱卡氏肺孢菌性肺炎（PCP）。

卡氏肺孢菌卡氏肺孢菌（pneumocycsiscarini39卡氏肺孢菌微生物檢驗

直接顯微鏡檢查從患者痰液、支氣管肺泡灌洗液或肺活檢組織中檢查PC是確診本病的重要依據(jù)。常用的染色方法有吉姆薩染色、果氏環(huán)六亞甲基四胺銀染色(GMS)和亞甲胺藍染色。可以檢出包囊和滋養(yǎng)體兩種形態(tài)?？乖瓩z測，核酸檢測，抗體檢測等?？ㄊ戏捂呔⑸餀z驗直接顯微鏡檢查40卡氏包囊卡氏包囊和滋養(yǎng)體卡氏包囊卡氏包囊和滋養(yǎng)體41毛霉目真菌

毛霉目真菌屬于接合菌門、接合菌綱，有7個科，主要是毛霉科。本病是一種發(fā)病急，進展快、病死率極高的系統(tǒng)性條件致病性真菌感染。毛霉目真菌有無隔菌絲，在一些陳舊培養(yǎng)基中偶見有隔菌絲。毛霉目真菌毛霉目真菌屬于接合菌門、接合菌綱，有7個科，主要42毛霉目真菌微生物檢驗

直接鏡檢臨床標(biāo)本＋20%KOH濕片，直接鏡檢可見折光性強的粗大菌絲，偶見孢子囊及孢子囊梗。分離培養(yǎng)臨床標(biāo)本接種于不含放線菌酮的麥芽糖培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基及沙氏瓊脂培養(yǎng)基，25℃或37℃培養(yǎng)。藥物敏感試驗，抗體檢測。鑒定根據(jù)毛霉、根霉與梨頭霉的形態(tài)特點。毛霉目真菌微生物檢驗直接鏡檢臨床標(biāo)本＋20%KOH43毛霉

根霉

梨頭霉

毛霉根霉梨頭霉44馬尼爾菲青霉

雙相性，在自然界中以菌絲形式存在，在組織中則可形成小圓形到橢圓形細胞。馬尼爾菲青霉可引起馬尼爾菲青霉病，引起廣泛性播散性感染，主要侵犯人的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)。

馬尼爾菲青霉雙相性，在自然界中以菌絲形式存在，在45馬尼爾菲青霉微生物檢驗

標(biāo)本直接檢驗：取骨髓涂片、皮膚印片或淋巴結(jié)活體組織瑞氏染色后鏡檢，可見到典型圓形或卵圓形有明顯橫隔的細胞，常在巨噬細胞內(nèi)。分離培養(yǎng)與鑒定：標(biāo)本接種沙氏培養(yǎng)基上，在25℃培養(yǎng)為青霉相；37℃酵母相。抗原檢測鑒別要點：馬尼爾菲青霉的孢子易與莢膜組織胞漿菌孢子相混淆，但前者孢子常有橫隔，從不出芽。

馬尼爾菲青霉微生物檢驗標(biāo)本直接檢驗：取骨髓涂片、皮膚印片46引起侵襲性感染的真菌--課件47馬尼爾菲青霉菌絲相馬尼爾菲青霉菌絲相48馬尼爾菲青霉

酵母相馬尼爾菲青霉酵母相49鐮刀菌

鐮刀菌生態(tài)適應(yīng)性強，廣泛分布于自然界土壤、植物的地上及地下部分或植物碎片，甚至可存在于沙漠及北極地區(qū)。鐮刀菌引起人類感