實驗九海水中氨-氮的測定、實驗?zāi)康牧私獯武逅徕c氧化法測定海水中氨-氮的方法原理，掌握其實驗條件。、實驗原理在強(qiáng)堿性條件下，海水中的氨-氮被次溴酸鈉氧化為亞硝酸-氮，然后在酸性條件下，用重氮-偶氮法測定亞硝酸-氮的總含量，扣除海水中原有的亞硝酸-氮的含量，即為海水中氨-氮的含量。BrQ+5Br+6Hf3B「2+3HOB「2+NaOH>NaBrO+NaBr+HOBrO--+NH++2OH-fNO-+3HO+3Br-三、 實驗儀器與實驗試劑21、 儀器：UNICO200C分光光度計；5cm比色皿，4只；100mL容量瓶，1只；50mL比色管，9支；5mL移液管，1支；1mL移液管，2支；洗瓶，2個；洗耳球，1個。2、 試劑及其配制：注意：試劑配制使用高純水或者無氨去離子水配制。（1） 氫氧化鈉溶液（40%:稱取400g氫氧化鈉（G.R），溶于1000mL無氨去離子水中，貯存于試劑瓶中。（2）次溴酸鈉氧化劑：①次溴酸鈉貯備液：稱取 2.5g（A.R）溴酸鉀及20g溴化鉀溶于1000mL無氨去離子水中，貯存于試劑瓶中，此試劑常年穩(wěn)定。②次溴酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：取1mL貯備溶液于試劑瓶中，加無氨去離子水50mL加3mL1:1鹽酸溶液，混勻，放暗處，5min后，加50mL40氫氧化鈉溶液，混勻。注意該溶液不穩(wěn)定，臨用前配制。（3）磺胺溶液（1%：稱取109磺胺（A.R）溶于1000mL1:1鹽酸溶液中，貯存于棕色瓶中。（4）a-鹽酸萘乙二胺溶液（0.1%）：稱取1.0ga-鹽酸萘乙二胺（A.R）溶于1000mL去離子水中，貯存于棕色試劑瓶中，有效期1個月。（5）鹽酸溶液（1:1）:1體積濃鹽酸與1體積水混合。（6）氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：準(zhǔn)確稱取在110C115C干燥過的氯化銨2.6745g，溶于無氨去離子水中，轉(zhuǎn)移于500mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，其濃度為25.00Pmol/mL。四、 實驗步驟1、 配制氯化銨使用標(biāo)準(zhǔn)溶液I：移取貯備標(biāo)準(zhǔn)溶液1mL于100mL容量瓶中，用無氨去離子水定容至100mL混勻，濃度為1.000Pmol/mLo2、配制氯化銨使用標(biāo)準(zhǔn)溶液U:移取使用標(biāo)準(zhǔn)溶液 10.60mL于100mL容量瓶中，用無氨去離子水定容至100mL混勻，濃度為6Pmol/mLo3、 標(biāo)準(zhǔn)系列：分別移取使用標(biāo)準(zhǔn)U0.00mL,0.50mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL，于50mL比色管中，加無氨去離子水至50ml，依次加入5mL次溴酸鈉氧化劑，混合。氧化30min,加5mL磺胺溶液，混勻。5min后，力P1mLa-鹽酸萘乙二胺溶液，混勻。15min后以去離子水為參比（L=3cn），測定各個溶液的543nm下的吸光度A,其中容白吸光度值為A已扣除空白吸光度值A(chǔ)后的吸光值A(chǔ)為橫坐標(biāo)，氨氮濃度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，并用線性回歸去除標(biāo)準(zhǔn)曲線的截

距a和斜率b。4、 水樣的測定（雙樣）：取50mL經(jīng)0.45Pm濾膜過濾的水樣于50mL比色管中加入5mL次溴酸鈉氧化劑，混勻。氧化30min,加5mL磺胺溶液，混勻。5min后,加1mLa-鹽酸萘乙二胺溶液，混勻。15min后以去離子水為參比測定溶液在543nm處的吸光度（A）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出實際樣品中氨氮濃度。5、實際海水樣品的測定（雙樣）：根據(jù)實際海水污染情況，取1025mL實際海水水樣于50mL比色管中，加無氨去離子水至50mL然后加入5mL次溴酸鈉氧化劑，混勻。氧化30min，加5mL磺胺溶液，混勻。5min后，力P1mLa-鹽酸萘乙二胺溶液，混勻。15min后以去離子水為參比測定溶液的吸光度（Aw）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出實際樣品中的按氮濃度。6、 水樣空白的測定：取上述相同體積的水樣于50mL比色管中，加無氨去離子水至50mL加5mL磺胺溶液，混勻。加入5mL次溴酸鈉氧化劑，混勻。5min后，加1mLa-鹽酸萘乙二胺溶液，混勻。15min后以蒸餾水為參比測定溶液的吸光度（A）。五、實驗結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合。應(yīng)用Excel繪制亞硝酸鹽氮（NM-N）濃度與吸光度之間關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線（一）上午組第1組②加氧化劑A」②加氧化劑A」104 0132-0.1182b=0.059sw-A=0.079該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:111=111 0.1102A=0.051bA=A'-Ab=0.059A=0.051bA=A'-Ab=0.059該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=2.56A-0.0054…C=2.56X0.059-0.0054=0.146Pmol/LA=AC=1.75A+0.036…C=1.75X0.079+0.036=0.174 Pmol/LC=2(C2-C1)=2X(0.114-0.146)③故樣那么實際75氮XH為mg/L第2組不加氧化劑②加氧化劑0119+0J20A'』竺02 “120Ab1=0.038Ab2=0.068--A=Aw~Ab2=0.083該組--A=Aw~Ab2=0.083該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=2.81A+0.003=2.81X0.083+0.00302Pmol/LC-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=1.75A+0.030.C=0.082X1.75+0.030C=0.174Pmol/L =0.236③故樣品中實際氨氮含量為C=2(C2-C1)=2X(0.236-0.174)=0.124Pmol/L即C=8.71X10-4mg/L第3組

①不加氧化劑A』0」01 0.①不加氧化劑A』0」01 0.104=0.102A2A1=0.025--A"'-'"077該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=2.70A-0.019…C=2.70X0.077-0.019=0.189Pmol/L截距開始為正數(shù)了③故樣品中實際氨氮含量為C=2(G-C"=2X(0.459-0.189)=0.540那么C=7.56X10-3mg/L第4組(本組)①不加氧化劑②加氧化劑0.2030.201n9n9=0.2022b2=0.025Ae=Asv-A：=0.177該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=2.66A-0.012' …C2=2.66X0.1770.012=0.459Pmol/LSW②加氧化劑A，0.151+0.251A=0.099b1-A=A-Ab1=0.052該組C-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=2.68A+0.004…C=2.68X0.052+0.004=0.059b2-A=AwrAb2=0.109該組c-A標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=2.68A-0.012…C2=2.68X0.1090.012=0.280Pmol/L故樣品審實際氨氮含量為C=2(C2-C1)=2X(0.280-0.143)=0.274 Pmol/L那C=3.83X10-3mg/L（二）（二）下午組C=2.90A-0.022第1組①不加氧化劑A'=bA=0.048b加氧化劑0.0660.080 _0.073AeWF 2Ab2=0.048--A=(AsWAb)-(Ab'-Ab2)=0.033.../C=0.033X2.90-0.022=0.074Pmol/L那么海水中氨氮含量為(稀釋5倍)

0.0670.051Ab'= 2c=dC=0.370Pmol/L=5.18x10.0670.051Ab'= 2°」190.046-0.165A= 2SWAb=Ab2=0.048--A=(Asw-Ab1)-(Ab'-Ab2)=0.106/C=0.106x2.98-0.822=0.285Pmol/L那海水中氨氮含量為C=5dC=5X0.285=1.427Pmol/L=2.00x10m2g/L第3組八0.258Aw=0.2412=0.250=0.0590.0470.055A=——2=0.051Ab1=Ab2=0.048A=(AwAb2)-(Ab'-Ab1)=0.199/C=0.199X2.90-0.22=0.797Pmol/L那海水中氨氮含量(同上組判斷相同，稀釋倍數(shù)應(yīng)為 5倍)C=5dC=5X0.797=3.986Pmol/L=5.58x10-2mg/L(三)經(jīng)上下午各組測定海水中氨氮濃度分別為(mg/L)上午組1組2組3組4 =^-7= 均值 =^-7= S7.91X10-48.71X10-4:7.56X10-33.83X10-33.26X10-327.667下午組1組2組3均值5.18X10-32.00X10-2= [5.58X10-2 2.70X10-421.249上午組Q檢驗（置信度95%Q計算=(8.71-7.91)X10-4/[(38.3-7.91) X10-4]=0.026-Q表=0.85故應(yīng)保留下午組Q檢驗(置信度95%Q計算=(20X10-3-5.18X10-3)/(55.8X10-3-5.18X10-3))=0.29<Q表=0.98故保留本組數(shù)據(jù)檢驗相對于偏差d=[(3.83X10-3-3.26X10-3)/(3.26X10-3)]x100%=17.5%六、 注意事項1、 在測定中注意避免在空氣中氨的影響，玻璃儀器用濃硫酸洗劑2、 工作曲線與水樣溫差不應(yīng)超過20C3、 所用水均為高純水。七、 思考與討論1、 溫度對實驗有何影響？溫度對吸光度的測定有影響，若溫度變化較大，會導(dǎo)致配合反應(yīng)的平衡移動，只有當(dāng)配離子濃度與配合物濃度相等時，吸光度率最大，這樣會使數(shù)據(jù)小于正常吸光度率，吸光率與濃度成正比，結(jié)果便不準(zhǔn)了。2、 過量的次氯酸鈉對實驗有什么影響？如何消除？重氮反應(yīng)必須在酸性條件下才能