一、名詞解釋（122分 2.假基因 3．反義RNA 4.營養(yǎng)缺陷型 5.噬菌斑6.前噬菌體二、判斷題（共10分，每小題1分）紫外誘變時(shí)是將菌懸液放在培養(yǎng)皿中，并置于燈管下30cm處的電磁攪拌器上。一般處理時(shí)要先打開紫外燈預(yù)熱20min，然后再開啟攪拌器。 （）從土壤中分離菌種時(shí)首先要進(jìn)行采樣。采樣時(shí)是從地表下10-15cm的土壤中用 （）無菌的生理鹽水可用于稀釋制備好的噬菌體裂解液 （烈性噬菌體是指噬菌體在繁殖過程中會(huì)引起宿主細(xì)胞的裂解 （噬菌體和λ缺陷噬菌體(dλ)侵染。雙重溶源性菌株一般用于低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。（）細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子可分為4插入序列、轉(zhuǎn)座子、接合型轉(zhuǎn)座子、某些溫和性噬菌體(如 （）所有質(zhì)粒都是獨(dú)立于染色體外、能進(jìn)行自我復(fù)制的遺傳因子 （SD5GA（第一個(gè)被測序的原核微生物：大腸桿菌；第一個(gè)被測序的真核微生物：畢赤酵母。（能被轉(zhuǎn)錄成mRNA。 （）三、填空題（200.5 雙重效應(yīng)。隨著紫外線照射時(shí)間的增加，殺菌率和突變率隨之 但當(dāng)照射時(shí)間延長到某一程度時(shí)，繼續(xù)延長照射時(shí)間，其殺菌率 3．經(jīng)UV誘變后獲得的營養(yǎng)缺陷型常包 、核酸三大類 微生物細(xì)胞經(jīng)紫外線照射后，菌液要在黑暗或者黃光下進(jìn)行操作，主要目的是。紫外線照射細(xì)胞后的存活率計(jì)算公式 在制備營養(yǎng)缺陷型遺傳標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中，為了避免表型延遲要進(jìn)行，而在二倍氮源 DNA是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)是和。證明RNA是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)是。以上這三個(gè)實(shí)驗(yàn)證明了遺傳物質(zhì)是核酸。用酶和DNA大文單詞的前三個(gè)字母。突變型基因的表示方法是在基因符號(hào)的右上角加“”，如亮氨酸缺陷型用來表示?？顾幮曰蚴窃诨蚍?hào)的右上角加“”，加“”表示敏感；(lac,pro)o基因定位；基因組學(xué)是研究基因不同序列結(jié)構(gòu)的不同功能、基因表達(dá)的調(diào)控、基因與環(huán)境，基因與蛋白，基因與基因之間的相互作用。11．細(xì)菌插入序列的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：兩端 （IR； (transposnase,TnP)基因，啟動(dòng)子位于IR中，終止子位于另一IR之前或之內(nèi)；轉(zhuǎn)座時(shí)需要，轉(zhuǎn)座后該序列重復(fù)成為DR；IS可獨(dú)立12．質(zhì)粒純化檢測方法主要包 法 法和電鏡觀察法等13．操縱子的結(jié)構(gòu)一般包括4部分： 四、簡答題（共34分）1．簡述噬菌體和宿主間的溶源性關(guān)系。UV的作用和在獲得噬菌體裂解液時(shí)加入氯仿處理的目的（5分）2．堿變性法提取質(zhì)粒的主要步驟？（6分）接合型轉(zhuǎn)座子的特點(diǎn)主要包括哪些？（5分轉(zhuǎn)座因子的遺傳學(xué)效應(yīng)有哪些？（6分什么是細(xì)菌的應(yīng)急反應(yīng)？應(yīng)急反應(yīng)的調(diào)控機(jī)理？（6分同源重組與位點(diǎn)特異性重組的主要區(qū)別有哪些？（6分） 五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（共24分）（15分）2（9分一、名詞解釋（122分ORF：所謂的編碼區(qū)，就是開放閱讀框架(ORF)DNA鏈上，從起始密碼子開始到RNARNARNA序列，參與調(diào)節(jié)基因表達(dá)，這RNARNA。二、判斷題（101分1.30cm處的電磁攪拌器上。20min，然后再開啟攪拌器。（√）2.從土壤中分離菌種時(shí)先要進(jìn)行采樣。采樣時(shí)是從地表下10-15cm的土壤中 （）3.無菌的生理鹽水可用于稀釋制備好的噬菌體裂解液。（）4.烈性噬菌體是指噬菌體繁殖過程中會(huì)引起宿主細(xì)胞的裂解。(√) 5.攜帶λ/dλ噬菌體的大腸桿菌，體和λ缺陷噬菌體(dλ)侵染。雙重溶源性菌株一般用于低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。（64( （√）7．所有質(zhì)粒都是獨(dú)立于染色體外、能進(jìn)行自我復(fù)制的遺傳因子。（）8．SD序列存在于核糖體結(jié)合位點(diǎn)中，一般為5個(gè)核苷組成的富含G和A的短小序列。 的原核微生物：大腸桿菌；第一個(gè)被測序的真核微生物：畢赤酵母（）10．終止子位于一個(gè)基因或一個(gè)操縱子的末端，提供轉(zhuǎn)錄停止信號(hào)的DNA區(qū)段終止子不能被轉(zhuǎn)錄成mRNA。 （）三、填空題（200.5分外線具有殺菌和誘變雙重效應(yīng)。隨著紫外線照射時(shí)間的增加，殺菌率和突變率隨提高。但當(dāng)照射時(shí)間延長到某一程度時(shí)，繼續(xù)延長照射時(shí)間，其殺菌率增加，突變率。的特性，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)篩選高產(chǎn)酶活的菌株。(H)和菌落直徑(C)之比值(H/C)3UV誘變后獲得的營養(yǎng)缺陷型常定。紫外線照射細(xì)胞后的存活率計(jì)算公式為誘變后活菌數(shù)*100/誘變前活菌數(shù)。DNA。證RNA遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)是煙草花葉病毒的拆開和重建實(shí)驗(yàn)。以上這三個(gè)實(shí)驗(yàn)證明了遺RNA酶和胰蛋白酶進(jìn)行部分處理可消除掉擬核骨架大分子有所展開，但仍維持比自由DNA分子緊湊的結(jié)構(gòu)。利用這個(gè)方法可證明擬核骨英文單詞的前三個(gè)字母。突變型基因的表示方法是在基因符號(hào)的右上角加“—”，如亮氨酸缺陷型用leu-來表示?？顾幮曰蚴窃诨蚍?hào)的右上角加“r （IR(transposnase,TnP)IR中,終止子位于另一IR（targetsequenceDR；IS可獨(dú)立存在，也常常作為其它轉(zhuǎn)座子的一部分-EB密度梯度離法和電鏡觀察4部分：啟動(dòng)子、操縱基因、結(jié)構(gòu)基因和終止子（2分）③DNA重排(缺失、擴(kuò)增和倒位)：當(dāng)一個(gè)轉(zhuǎn)座因子插入后由于不準(zhǔn)確的（2分）什么是細(xì)菌的應(yīng)急反應(yīng)？應(yīng)急反應(yīng)的調(diào)控機(jī)理？（6分細(xì)胞中鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸(pppGpp)RNA合成速度調(diào)控機(jī)理：①(p)ppGppRNAPol結(jié)合，改變酶的構(gòu)型以識(shí)別不同的啟動(dòng)子，改變基因轉(zhuǎn)錄的效率，或關(guān)閉、減弱或增加（aa的基因（2分）②(p)ppGpp與啟動(dòng)RNAPol（1分）6．同源重組與位點(diǎn)特異性重組的主要區(qū)別有哪些？（6分）答：1）；（1DNA之間有較高的同源性和較大范圍的聯(lián)會(huì)。而位點(diǎn)特異性DNA（1分）DNA片段的長度是不固定的，而位點(diǎn)特異性重組的插入部分或交換部分基（1分）RecA蛋白質(zhì)；位點(diǎn)特異性重組依賴Int（整合酶）等。（1分）轉(zhuǎn)化，紫外線損傷修復(fù)。位點(diǎn)特異性重組則不同，如：λDNAE.coliDNA的兩側(cè)（2分）得分四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（24分1（15分16~18h（1分）對數(shù)培養(yǎng)取1ml培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接于另一只裝有完全培養(yǎng)基的三角瓶中，30℃振蕩培養(yǎng)6~8h（1分）誘變處理制備細(xì)胞懸浮液，于培養(yǎng)皿中（帶磁棒（1分1mlUV處理過的菌液于裝有完全培養(yǎng)基的三角瓶中，30（1分）（5）10ml無氮基本培養(yǎng)基中，306~8h（1分10ml二倍氮源基本培養(yǎng)基中，301~2h，加入青霉素繼續(xù)培5~6h（1分）10ml（1分）（6）營養(yǎng)缺陷型菌株的檢出0.1ml菌懸液，涂布于限制培養(yǎng)基平板上（3皿或更多，3048h，野生型形成（1分）4（30個(gè)格為好分（2分）（7）營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定5ml（1分）（1分）維生素混合液、核酸水