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類風濕因子(RF)測試:原理,步驟,解釋和臨床意義類風濕因子(RF)是與個體自身免疫球蛋白反應(yīng)的自身抗體。這些抗體通常針對人IgG的Fc片段。RA)RFRA)RF已與三種主要的免疫球蛋白類別相關(guān):IgM,IgG和IgA。在這些中,最常見的是IgM和IgG。關(guān)節(jié)間隙中免疫復合物的形成導致補體的活化和破壞性炎癥,從而引起類風濕關(guān)節(jié)炎如其名稱所示,RF特別適用于類風濕關(guān)節(jié)炎的診斷和監(jiān)測。類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種慢性炎癥性疾病,主要影響關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍組織。在診斷出類風濕關(guān)節(jié)炎的病例中,有60-80%的人檢出了類風濕因子。但是,有時在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的血清中和某些非風濕性疾病中也可以檢測到。在正常的老年人□中也可以觀察到升高的值。測試原理 有許多方法可用于測試RFO最常用的血清學方法是基于乳膠凝集試驗。由于RF是針對IgG分子Fc部分的IgM類抗體,因此可以通過其凝集涂有IgG分子的乳膠顆粒的能力來檢測。使用的試劑是聚苯乙烯膠乳顆粒在甘氨酸鹽水溶液中的懸浮液,pH值為8.6±.1,并涂有人丙種球蛋白。定性方法 程序1.將所有試劑和標本置于室溫。2?將一滴陽性對照和40ul患者血清分別放入幻燈片上的圓圈中。輕輕地在每個要測試和控制的樣品圓上添加一滴RF乳膠試劑。使用單獨的涂藥棒/攪拌棒將反應(yīng)混合物散布在特定區(qū)域的整個區(qū)域在旋轉(zhuǎn)搖床上將載玻片前后傾斜2分鐘,使混合物緩慢旋轉(zhuǎn)。2分鐘后在明亮的人造光下觀察凝集。解釋膠乳顆粒的凝集被認為是陽性反應(yīng),表明類風濕因子的存在處于可檢測的顯著水平。陽性結(jié)果:乳膠顆粒懸浮液會在兩分鐘內(nèi)發(fā)生凝集,表明RF水平超過18IU/ml陰性結(jié)果:乳膠顆粒懸浮液在兩分鐘內(nèi)沒有凝集。
半定量法 使用等滲鹽水以定.性方法.1.:::2、、i■:::4、、1::8、、1:::16、“”"1::”32、""”1:::64、、1:":128"等方式制備陽性樣品的系列稀釋液,如下所示:對于每個要測試的樣品,將100L的0.9%鹽水加入1至5的試管中。將100L樣品加到試管1上。混合混合物。避免形成氣泡。從管1到2轉(zhuǎn)移100L混合樣品。在試管3至4中重復此系列稀釋步驟,然后進行5次。混合后,從試管5中棄置100L。試管1至5現(xiàn)在代表如下稀釋系列:管號1個2345稀釋1:21:41:81:161:32使用每種稀釋液作為測試樣品進行定性測試程序。滴度報告為最高稀釋度的倒數(shù),顯示陽性測試結(jié)果。在可見的凝集下,讀取最后一個稀釋步驟中的滴定度,類風濕因子的大致濃度可以如下確定:RF單位為IU/mL乳膠Y球蛋白試劑的靈敏度,單位為IU/mL)滴定度。在所有診斷為RA…的患者中未檢測到祁”; 患有傳染性單核細胞增多癥,結(jié)節(jié)病,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,結(jié)核病或麻風病以及其他急性或慢性免疫反應(yīng)的患者中,RF的含量可能增加。積極結(jié)果的重要
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