食品微生物與檢驗普通光學(xué)顯微鏡的使用任務(wù)描述任務(wù)完成條件任務(wù)驗收標(biāo)準(zhǔn)操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求師生互動12345目錄正確取放顯微鏡用低、高倍鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)用油鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)一、任務(wù)描述每位學(xué)生獨立完成以下操作：1.金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌的染色標(biāo)本片；2.顯微鏡、香柏油、二甲苯、擦鏡紙等。二、任務(wù)完成條件了解普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和工作原理；掌握普通光學(xué)顯微鏡的使用方法；掌握顯微鏡的保養(yǎng)方法。三、任務(wù)驗收標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡顯微鏡的結(jié)構(gòu)機(jī)械部分光學(xué)部分鏡座、鏡柱、鏡臂、鏡筒傾斜關(guān)節(jié)、轉(zhuǎn)換器載物臺目鏡、物鏡遮光器反射鏡目鏡鏡臂物鏡鏡柱鏡座反光鏡遮光器載物臺鏡筒粗調(diào)焦螺旋細(xì)調(diào)焦螺旋鏡頭轉(zhuǎn)換器通光孔壓片夾光學(xué)顯微鏡構(gòu)造示意圖目鏡與物鏡的比較放大倍數(shù)透鏡放大倍數(shù)鏡頭長度透鏡大小10x12.5x長短大小放大倍數(shù)鏡口率鏡筒長度蓋玻片厚度放大倍數(shù)鏡頭長度透鏡大小10x40x長短大小目鏡與物鏡的比較目鏡與物鏡的比較鏡頭透鏡大小鏡頭長短視野亮度物像大小細(xì)胞數(shù)目鏡低倍大長亮小多高倍小短暗大少物鏡低倍大短亮小多高倍小長暗大少目鏡與物鏡的比較普通生物顯微鏡顯微圖象系統(tǒng)生物顯微鏡(含攝影系統(tǒng))數(shù)碼生物顯微鏡其他幾種顯微鏡介紹檢測顯微鏡SFC-86雙筒解剖顯微鏡其他幾種顯微鏡介紹倒置顯微鏡光路圖倒置顯微鏡偏振光顯微鏡其他幾種顯微鏡介紹

顯微鏡是微生物檢驗中最常用的精密光學(xué)儀器。顯微鏡的種類很多，在實驗室中常用的有：普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡和電子顯微鏡等。食品微生物檢驗中最常用的是普通光學(xué)顯微鏡。四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求

用光學(xué)顯微鏡觀察微生物形態(tài)時，一般遵循先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察，再油鏡觀察。

四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求（一）顯微鏡的使用方法1.取鏡和安放

4.高倍鏡觀察

2.對光3.低倍鏡觀察5.油鏡觀察四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求(1)打開顯微鏡箱,一手握鏡臂,一手托鏡座,將顯微鏡取出。(2)把顯微鏡放在實驗臺上自己身體的前方稍偏左，鏡座距實驗臺邊沿約10cm，右側(cè)放記錄本或繪圖紙。(3)讓鏡筒向前,鏡臂向自己,然后安放好目鏡和物鏡。Part11.取鏡和安放顯微鏡的拿取四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡對準(zhǔn)通光孔。轉(zhuǎn)動載物臺下的遮光器,選一較大的光圈對準(zhǔn)光孔。左眼注視目鏡(右眼也要睜開),轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi),通過目鏡,可看到白亮的視野。當(dāng)光線強時,讓平面鏡對著光源,光線弱的時候,用凹面鏡對著光源。自帶光源的顯微鏡，可通過電流旋鈕來調(diào)節(jié)光照強弱。光圈反光鏡視野Part12.對光四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求（1）把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對通光孔的中心。（2）眼睛從側(cè)邊看著物鏡頭和標(biāo)本之間，轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止。（3）左眼看目鏡內(nèi)，同時反向緩緩轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦螺旋，使鏡筒上升，直到看到物象為止，再稍稍轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)焦螺旋，使看到的物象更加清晰。（4）看不到物像的重復(fù)第（2）、（3）兩個步驟。Part13.低倍鏡觀察使用顯微鏡的正確姿勢四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求（1）移動裝片，在低倍鏡下使需要放大的部分移動到視野中央。（2）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，移走低倍物鏡，換上高倍物鏡。緩緩調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使物象清晰。（3）調(diào)節(jié)光圈，使視野亮度適宜。換上高倍物鏡后禁止向下轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，且光線需要增強。Part14.高倍鏡觀察四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求（1）將高倍鏡觀察到的目標(biāo)移動至視野中央；（2）將高倍鏡鏡頭挪開，于載玻片上滴一滴香柏油；（3）將載物臺下降或鏡筒提升約2cm，再將油鏡鏡頭移動至視野，讓油鏡鏡頭浸入香柏油（至油暈不再擴(kuò)大為止）；（4）用微調(diào)焦螺旋調(diào)至清晰。注意：油鏡的操作需要較強的關(guān)線，故需將光線調(diào)至最強。

（油鏡鏡筒上通?？逃蠬.I.OIL或油等標(biāo)志）Part15.油鏡操作四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求油鏡用后的處理：第一遍：用擦鏡紙拭去鏡頭上的油；第二遍：用擦鏡紙蘸少許二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去頭上殘留的油跡；第三遍：再用干凈的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。四、操作步驟與標(biāo)準(zhǔn)要求(1)

顯微鏡應(yīng)放在通風(fēng)干燥的地方，避免陽光直射或曝曬，避免受潮，避免與酸、堿和易揮發(fā)的、具腐蝕性的化學(xué)試劑等放在一起。(2)顯微鏡應(yīng)防止震動。搬動時，要左手握持鏡臂，右手托鏡座，讓顯微鏡直立于胸前，防止目鏡從鏡筒脫落。鏡檢時不能隨意移動顯微鏡。(3)用過油鏡的，應(yīng)先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著二甲苯擦拭2-3次，最后再用擦鏡紙將二甲苯擦去。注意二甲苯用量不能太多。(4)鏡頭須保持清潔，用軟而沒有短絨毛的擦鏡紙，不能用手、布或其他物品擦拭。普通顯微鏡的維護(hù)與保養(yǎng)

(5)顯微鏡用后，需將物鏡轉(zhuǎn)成“八”字形，勿使物鏡鏡頭與集光器相對放置，同時將物鏡下降或?qū)⑤d物臺提升以縮短物鏡和載物臺之間的距離，避免因鏡筒脫落或操作不小心，損壞物鏡和集光器。

(6)鏡檢時可通過調(diào)整凳子高度以便舒適觀察，勿將顯微鏡傾斜。

(7)觀察時，應(yīng)兩眼同時睜開，既能同時繪圖，又能減少疲勞。

(8)實驗中，顯微鏡發(fā)生故障，應(yīng)立即向指導(dǎo)老師匯報，不得隨意更換顯微鏡。更不得交換顯微鏡之間的鏡頭。

(9)不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。

普通顯微鏡的維護(hù)與保養(yǎng)五、師生互動根據(jù)大家對微生物標(biāo)本片的觀察，指出下面分別是什么菌，放大倍數(shù)為多少？五、師生互動食品微生物與檢驗普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)及工作原理光學(xué)顯微鏡的原理光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)目錄Contents12341、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)目鏡鏡臂物鏡鏡柱鏡座反光鏡遮光器載物臺鏡筒粗調(diào)焦螺旋細(xì)調(diào)焦螺旋鏡頭轉(zhuǎn)換器通光孔壓片夾341、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)機(jī)械部分光學(xué)部分鏡座、鏡柱、鏡臂、鏡筒壓片夾、轉(zhuǎn)換器載物臺目鏡、物鏡遮光器反射鏡

鏡筒

b

鏡座a鏡座是顯微鏡的基本支架，是用來安裝光學(xué)放大系統(tǒng)部件的基礎(chǔ)。由底座和鏡臂兩部分組成，在它上面連接有載物臺和鏡筒。鏡筒上接接目鏡，下接物鏡轉(zhuǎn)換器，形成接目鏡與接物鏡(裝在物鏡轉(zhuǎn)換器下)間的暗室。1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)（1）顯微鏡的機(jī)械部分

載物臺

d物鏡轉(zhuǎn)換器c物鏡轉(zhuǎn)換器上可安裝3~4個接物鏡。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，可以按需要將其中的任何一個接物鏡和鏡筒接通，從而與鏡筒上面的接目鏡構(gòu)成一個放大系統(tǒng)。載物臺中央有一孔，為光線通路。在臺上裝有彈簧標(biāo)本夾和推動器，其作用為固定或移動標(biāo)本的位置，使得鏡檢對象恰好位于視野中心。1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)（1）顯微鏡的機(jī)械部分細(xì)調(diào)焦螺旋f粗調(diào)焦螺旋e粗調(diào)焦螺旋是移動鏡筒，調(diào)節(jié)接物鏡和標(biāo)本間距離的機(jī)件。粗調(diào)焦螺旋每轉(zhuǎn)一圈鏡筒或載物臺移動2mm左右。用粗調(diào)焦螺旋只可以粗放的調(diào)節(jié)焦距，要得到最清晰的物象，需要用微調(diào)焦螺旋做進(jìn)一步調(diào)節(jié)。微調(diào)焦螺旋每轉(zhuǎn)一圈鏡筒或載物臺移動0.1mm(100μm)。新式顯微鏡的粗調(diào)焦螺旋和微調(diào)焦螺旋是共軸的。

1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)（1）顯微鏡的機(jī)械部分b聚光器：聚光器在載物臺下面，由聚光透鏡、虹彩光圈和升降螺旋組成的。其作用是將光源經(jīng)反光鏡反射來的光線聚焦于樣品上，以得到最強的照明，使物像獲得明亮清晰的效果。a反光鏡：在鏡座上裝有反光鏡，可以將投射在它上面的自然光反射到聚光器透鏡的中央，照明標(biāo)本。新式顯微鏡鏡座上裝有光源，并有電流調(diào)節(jié)螺旋，可通過調(diào)節(jié)電流大小調(diào)節(jié)光照強度。（2）顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)物鏡：安裝在鏡筒前端轉(zhuǎn)換器上，利用光線使被檢物體第一次造像。物鏡的性能取決于物鏡的數(shù)值孔徑(NA)，每個物鏡的數(shù)值孔徑都標(biāo)在物鏡的外殼上，數(shù)值孔徑越大，物鏡的性能越好。

c（2）顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)放大倍數(shù)數(shù)值孔徑鏡筒長度蓋玻片厚度干燥系物鏡：以空氣為介質(zhì)，如常用的40×以下的物鏡，數(shù)值孔徑均小于1。

油浸系物鏡：常以香柏油為介質(zhì)，此物鏡又叫油鏡頭，其放大率為90×~100×，數(shù)值孔值大于1。按透鏡與被檢物之間介質(zhì)不同1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)（2）顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)低倍物鏡:指1×~6×，NA值為0.04~0.15。1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)（2）顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)高倍物鏡:指25×~63×，NA值為0.35~0.95。中倍物鏡:指6×~25×，NA值為0.15~0.40。油浸物鏡:指90×~100×，NA值為1.25~1.40。目鏡：作用是把物鏡放大了的實像再放大一次，并把物像映入觀察者的眼中。目鏡的結(jié)構(gòu)較物鏡簡單，普通光學(xué)顯微鏡的目鏡通常由兩塊透鏡組成，上端的一塊透鏡稱“接目鏡”，下端的透鏡稱“場鏡”。上下透鏡之間或在兩個透鏡的下方裝有由金屬制的環(huán)狀光闌或叫“視場光闌”，物鏡放大后的中間像就落在視場光闌平面處，所以其上可安置目鏡測微尺。d（2）顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)1、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)BA顯微鏡總的放大倍數(shù)是目鏡和物鏡放大倍數(shù)的乘積。物鏡的放大倍數(shù)越大，分辨率越高；而目鏡只能起放大作用，不能提高分辨率，標(biāo)準(zhǔn)目鏡放大倍數(shù)為10倍。顯微鏡的放大效能（分辨率）是由所