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微生物發(fā)酵技術(shù)-搖瓶種子制備搖瓶種子制備概述01工藝流程0203注意事項(xiàng)及設(shè)備04質(zhì)量檢查定義:將斜面種子或米孢子接種于錐形搖瓶?jī)?nèi)的液體培養(yǎng)基中,在搖床上振蕩培養(yǎng)得到的液體種子。用搖床旋轉(zhuǎn)供氧,進(jìn)行種子擴(kuò)培。流程:注:一定是冷卻至室溫后接種,也可于種子適溫時(shí)接種;震蕩頻率即供氧速率,由搖床轉(zhuǎn)速控制。培養(yǎng)基配制
分裝錐形瓶
加塞或覆蓋八層紗布
滅菌
冷卻
接種
震蕩培養(yǎng)
液體培養(yǎng)物
斜面種子制備過程中應(yīng)保持:營養(yǎng)成分較斜面豐富;培養(yǎng)基裝量適當(dāng)參考裝量為40-50ml/250ml瓶,60-80ml/500ml瓶,90-110ml/750ml瓶,120-150ml/1000ml瓶;如果是厭氧培養(yǎng),則裝量應(yīng)增加一倍以上;滅菌時(shí)加蓋牛皮紙或雙層報(bào)紙;注意搖床轉(zhuǎn)速,轉(zhuǎn)速越快,偏心距越大,通氣越好。經(jīng)常檢查,皮帶松弛時(shí)要緊一緊;5)注意搖床中心與邊緣、上層與下層的溫差。流程:注意事項(xiàng):流程:設(shè)備:流程:設(shè)備:立式旋轉(zhuǎn)搖床流程:設(shè)備:超凈工作臺(tái)
搖瓶種子質(zhì)量應(yīng)遵循:菌體濃度:外觀稠度,靜置沉降率,離心沉降率;
菌體生長(zhǎng)階段:顯微鏡檢查細(xì)胞分化情況;(3)代謝情況:對(duì)殘余糖、氮進(jìn)行化學(xué)分析,并測(cè)量pH值;(4)
生產(chǎn)能力:搖瓶發(fā)酵試驗(yàn);(5)
污染雜菌情況:鏡檢及無菌試驗(yàn)檢查。
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