復(fù)方酮康唑凝膠劑處方配比的優(yōu)化

灰指甲和各種癬是一種脆弱的皮膚細(xì)菌感染疾病?；抑讣椎闹委熜Чǔ２幻黠@，容易復(fù)發(fā)。通常使用康福唑酮類口服藥物。這種方法對(duì)肝臟有顯著的傷害。本文通過正交試驗(yàn)法進(jìn)行處方的優(yōu)化設(shè)計(jì),采用將酮康唑作為主藥,輔以尿素促進(jìn)酮康唑的滲透;以月桂氮酮作透皮促進(jìn)劑;用高分子材料卡波姆-940為凝膠基質(zhì),用三乙醇胺調(diào)節(jié)稠度;甘油作保濕劑兼具防腐作用。制成的復(fù)方酮康唑凝膠劑用于治療灰指甲及各種癬癥,效果滿意。1儀器、試劑和儀器Agilent1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);Cary-100紫外分光光度計(jì)(美國Varian公司);PB20酸度計(jì)(德國賽多利斯公司);BT25S精密電子天平(德國賽多利斯公司)。SD大鼠(南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理教研室提供)。酮康唑?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所,純度99.9%,批號(hào):0294-9801);甲醇(色譜純);乙醇(分析純);尿素、月桂氮酮、卡波姆-940等均為藥用級(jí)。2方法2.1影響因子選取采用月桂氮酮(Azone)、尿素、卡波姆-940為影響因子,因素與水平設(shè)計(jì)見表1。采用L9(34)正交表進(jìn)行處方的優(yōu)化,用直觀分析法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,見表2。2.2酮康唑凝膠的制備將卡波姆-940用甘油調(diào)成糊狀,加入月桂氮酮攪勻,另取尿素加適量水溶解后加入到卡波姆-940糊中攪拌,再取酮康唑加適量乙醇水浴加熱,使酮康唑溶解后慢慢加入到上項(xiàng)中,邊加邊攪,用三乙醇胺調(diào)成半透明狀,最后加水至全量,攪勻即得(每10g凝膠中含酮康唑500mg)。2.3酮康唑含量測(cè)定取酮康唑?qū)φ掌放涑梢欢舛鹊娜芤?在200～400nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描,結(jié)果在242nm處酮康唑有最大吸收,空白基質(zhì)在此波長(zhǎng)處也有吸收,干擾測(cè)定,故采用HPLC法測(cè)定酮康唑的含量。2.3.1對(duì)照品溶液的制備色譜條件:流動(dòng)相為甲醇-水(75∶25,v∶v);流速1.0mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)242nm。在此色譜條件下,配制酮康唑?qū)φ掌啡芤?10μg·mL-1)。取復(fù)方酮康唑凝膠劑適量配制樣品溶液及不含酮康唑的陰性對(duì)照溶液,各進(jìn)樣20μL,結(jié)果酮康唑的保留時(shí)間為5.6min左右,理論塔板數(shù)為5182,與雜質(zhì)的分離度為3.5。2.3.2《清咸動(dòng)力量表》精密稱取酮康唑?qū)φ掌?0mg(含量99.9%)置100mL量瓶中,加乙醇水浴加熱使其溶解,加乙醇至刻度,搖勻;精密量取此液2、3、4、5、6、7、8mL置100mL量瓶中,加乙醇至刻度,搖勻,然后在“2.3.1”色譜條件下進(jìn)樣20μL測(cè)定峰面積,將測(cè)得的峰面積(A)對(duì)濃度(c)進(jìn)行線性回歸,結(jié)果回歸方程為:A=27.465c-1.820(r=0.9999),線性范圍4.0～16.0μg·mL-1。2.3.3精密度測(cè)試取高、中、低3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別在日內(nèi)及日間進(jìn)行測(cè)定,每個(gè)濃度測(cè)定5次,結(jié)果日內(nèi)RSD為0.86%,日間RSD為1.02%。2.3.4測(cè)定復(fù)方酮康唑凝膠的制備按處方比例稱取各輔料和不同量酮康唑,分別制成低,中、高(相當(dāng)于藥物含量80%、100%、120%)3種濃度的復(fù)方酮康唑凝膠各50g;精密稱取此凝膠樣品2g,用乙醇水浴加熱使酮康唑溶解,并加乙醇至100mL,搖勻過濾;取續(xù)濾液按“2.3.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣20μL進(jìn)行測(cè)定,將測(cè)得的峰面積代入回歸方程計(jì)算濃度,其結(jié)果平均回收率為99.51%,RSD為0.80%。2.4皮膚組織純化取SD大鼠處死,用剪刀仔細(xì)剪去腹部皮膚上的毛,取下無損傷皮膚,除去皮下脂肪組織,用純化水沖洗干凈,置于0.9%氯化鈉注射液中、4℃條件下保存,備用。2.5單位面積累積滲透量測(cè)定將“2.4”項(xiàng)下處理的SD大鼠皮膚,固定于Franz擴(kuò)散裝置的擴(kuò)散室和接受室之間,接受室注入10mL0.9%氯化鈉溶液作為接受液,表面恰與皮膚內(nèi)層接觸,排出氣泡,開動(dòng)攪拌器,并恒溫于37℃,然后在皮膚表面均勻涂布1g復(fù)方酮康唑凝膠,有效擴(kuò)散面積為2.5cm2,并于涂布后12h停止實(shí)驗(yàn),取樣5mL置100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,取稀釋液5mL置50mL量瓶中,再加水稀釋至刻度,搖勻,作為樣品溶液,按“2.3.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣20μL,測(cè)定峰面積,計(jì)算單位面積累積滲透量。3凝膠劑的最優(yōu)配方由表2可知,根據(jù)直觀分析,月桂氮酮(B)是影響復(fù)方酮康唑凝膠經(jīng)皮滲透性的首要因素,其1%水平最佳;其次是尿素(A);而卡波姆-940(C)對(duì)凝膠劑影響最小。各因素影響順序?yàn)锽>A>C,由綜合平均值的大小,選取出各因素的最佳組合為A3B2C2,即月桂氮酮含1%,尿素含10%,卡波姆-940含1%。所得處方為:酮康唑5%,月桂氮酮1%,尿素10%,卡波姆-9401%,甘油20%,三乙醇胺適量,純化水加至全量。以優(yōu)選處方配比制備凝膠,成品為無色半固體、半透明,成品