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§20蛋白質(zhì)和核酸第二十章蛋白質(zhì)和核酸ProteinandNucleicacid授課學(xué)時(shí):6學(xué)時(shí)本章目錄第一節(jié)氨基酸第二節(jié)多肽第三節(jié)蛋白質(zhì)第四節(jié)核酸本章學(xué)習(xí)要求1.掌握α-氨基酸的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和制備方法;2.掌握蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)的性質(zhì);3.了解蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)、酶的特異性、核酸的組成、結(jié)構(gòu)以及蛋白質(zhì)、核酸在生物體中的重要作用。第一節(jié)氨基酸Aminoacid一、分類、命名和構(gòu)型1.命名

多按其來(lái)源或性質(zhì)而命名

-氨基酸(按烴基類型)分為:脂肪族氨基酸,芳香族氨基酸,含雜環(huán)氨基酸2.分類(按分子中氨基和羧基的數(shù)目)分為:

中性氨基酸,酸性氨基酸,堿性氨基酸3.構(gòu)型用D/L體系表示——在費(fèi)歇爾投影式中氨基位于橫鍵右邊的為D型,位于左邊的為L(zhǎng)型。

例如:L-氨基酸D-氨基酸二、氨基酸的性質(zhì)1.氨基酸的酸-堿性——兩性與等電點(diǎn)(1)兩性(2)等電點(diǎn)羧基和氨基的離子化程度相等(即氨基酸分子所帶電荷呈中性——處于等電狀態(tài))時(shí)溶液的pH值稱為氨基酸的等電點(diǎn)。常以pI表示。2.氨基酸氨基的反應(yīng)(2)氨基的烴基化(1)氨基的?;?)與亞硝酸反應(yīng)α-氨基酸在堿性溶液中與茚三酮作用,生成顯藍(lán)色或紫紅色的有色物質(zhì),是鑒別α-氨基酸的靈敏的方法。(4)與茚三酮反應(yīng)3.氨基酸羧基的反應(yīng)三、氨基酸的制備蛋白質(zhì)水解、有機(jī)合成和發(fā)酵法。2.α-鹵代酸的氨化1.由醛制備(斯垂克Strecker法)例:苯丙氨酸74%常用加布里埃爾法(Gabriel)代替上法加布里埃爾法生成的產(chǎn)物較純,適用于實(shí)驗(yàn)室合成氨基酸3.由丙二酸酯法合成CH2(COOEt)2BrCH(COOEt)2Br2/CCl4例題用化學(xué)合成的方法合成蛋氨酸蛋氨酸第二節(jié)多肽Polypeptide一、肽和肽鍵氨端羧端肽2.肽的命名丙氨酸絲氨酸苯丙氨酸丙氨酰絲氨酰苯丙氨酸(丙-絲-苯丙)二、多肽結(jié)構(gòu)的測(cè)定2.氨基酸的定量分析1.測(cè)定分子量3.端基分析(測(cè)定N端和C端)(1)測(cè)定N端a2,4-=硝基氟苯法此法的缺點(diǎn)是所有的肽鍵都被水解掉了b異硫氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法部分水解法常用的蛋白酶有:

胰蛋白酶——只水解羰基屬于賴氨酸、精氨酸的肽鍵

糜蛋白酶——水解羰基屬于苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的肽鍵

溴化氰———只能斷裂羰基屬于蛋氨酸的肽鍵a多肽與肼反應(yīng)b羧肽酶水解法(2)測(cè)定C端4.肽鏈的選擇性斷裂及鑒定三、多肽的合成1.保護(hù)-NH2或-COOH2.活化反應(yīng)基團(tuán)(活化-NH2或-COOH)3.生物活性第三節(jié)蛋白質(zhì)Protein一、蛋白質(zhì)的分類(1)纖維蛋白質(zhì):如絲蛋白、角蛋白等;(2)球狀蛋白質(zhì):如蛋清蛋白、酪蛋白、血紅蛋白、γ-球代表蛋白(感冒抗體)等1.根據(jù)蛋白質(zhì)的形狀分為:(1)活性蛋白按生理作用不同又可分為;酶、激素、抗體、收縮蛋白、運(yùn)輸?shù)鞍椎取#?)非活性蛋白擔(dān)任生物的保護(hù)或支持作用的蛋白,但本身不具有生物活性的物質(zhì)。2.根據(jù)組成分:(1)單純蛋白質(zhì)——其水解最終產(chǎn)物是α-氨基酸(2)結(jié)合蛋白質(zhì)——α-氨基酸+非蛋白質(zhì)(輔基)3.根據(jù)蛋白質(zhì)的功能分:二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)1.蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)由各氨基酸按一定的排列順序結(jié)合而形成的多肽鏈(50個(gè)以上氨基酸)稱為蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。2.蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)多肽鏈中互相靠近的氨基酸通過(guò)氫鍵的作用而形成的多肽在空間排列(構(gòu)象)稱為蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)由一條或幾條多肽鏈構(gòu)成蛋白質(zhì)的最小單位稱為蛋白質(zhì)亞基,由幾個(gè)亞基借助各種副鍵的作用而構(gòu)成的一定空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。3.蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)由蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)在空間盤繞、折疊、卷曲而形成的更為復(fù)雜的空間構(gòu)象稱為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)。4.蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)三、蛋白質(zhì)的性質(zhì)1.兩性及等電點(diǎn)重金屬鹽作用,或有機(jī)溶劑(如丙酮、乙醇等)2.膠體性質(zhì)與沉淀作用(1)可逆沉淀(鹽析)(2)不可逆沉淀3.蛋白質(zhì)的變性作用變性作用:蛋白質(zhì)在變性條件的影響下,改變其分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的作用。變性后的特點(diǎn):

①喪失生物活性②溶解度降低③易被水解(對(duì)水解酶的抵抗力減弱)變性條件包括物理因素和化學(xué)因素:干燥、加熱、高壓、激烈振蕩或攪拌、紫外線、X射線、超聲波;強(qiáng)酸、堿、尿素、重金屬、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。4.蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)(1)縮二

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