模塊九微生物的菌種保藏技術(shù)Microbialculturepreservationtechnology內(nèi)容導(dǎo)入菌種保藏主要是根據(jù)微生物生理生化特點(diǎn)，人工創(chuàng)造條件，使微生物代謝處于不活潑、生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài)，即采取低溫、干燥、缺氧3個(gè)條件，使菌種暫時(shí)處于休眠狀態(tài)。任務(wù)內(nèi)容菌種保藏目的及原理常用菌種的保藏方法一、菌種保藏目的及原理目的使菌種不生長(zhǎng)不死亡不污染不降低或不喪失其優(yōu)良性以盡量延長(zhǎng)使用時(shí)間原理：創(chuàng)造不利于菌種生長(zhǎng)的一切條件，使其代謝處于休眠狀態(tài)。不利條件干燥無氧缺營(yíng)養(yǎng)低溫保藏注意1、用保種培養(yǎng)基2、及時(shí)保藏（菌絲占斜面2/3）3、最好換膠塞4、用時(shí)活化5、嚴(yán)防棉塞受潮基本原則1、挑選典型菌種的優(yōu)良純種。2、盡量使用分生孢子、芽孢等休眠體3、創(chuàng)造有利于休眠的保藏環(huán)境（如干燥、低溫）。4、盡可能多的采用不同的手段保藏一些比較重要的微生物菌株。二、常用菌種的保藏方法以母種形式保藏1.斜面低溫法

斜面菌種置4~6℃冰箱中（3~6個(gè)月）特點(diǎn)簡(jiǎn)便

保藏時(shí)間短

易污染及退化

不適于草菇等菌類2.礦油保藏法斜面或半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)物上加滅菌石蠟（約1cm高），保存時(shí)間1-2年。用途：用于霉菌、酵母菌、放線菌、好氧性細(xì)菌等的保存礦油處理注入種管無菌檢驗(yàn)？口堵膠塞滅菌：121℃、30min

去水：40~50℃烘至無色透明

淹沒斜面約1cm用時(shí)轉(zhuǎn)管再轉(zhuǎn)管3.自然基質(zhì)保藏法基質(zhì)的處理麥粒浸透、煮熟

麩皮拌濕裝管滅菌接種培養(yǎng)干燥器去水特點(diǎn)防衰老、保藏時(shí)間長(zhǎng)

轉(zhuǎn)接后生長(zhǎng)旺

易污染，滅菌要徹底4、沙土保藏法特點(diǎn)：干燥、無營(yíng)養(yǎng)用途：保存比較干燥的微生物孢子或芽孢、放線菌。保存時(shí)間數(shù)年或數(shù)十年5、冷凍真空干燥法原理：在極低溫度下快速的將菌體細(xì)胞凍結(jié)且保持完整，在減壓條件下利用升華現(xiàn)象除去水分，真空條件下熔封管口稱為凍干法。特點(diǎn)：干燥、低溫、無氧、保護(hù)劑，保存時(shí)間可達(dá)15年以上。保護(hù)劑：牛乳血清、糖類、甘油、二甲基亞砜6、液氮冷凍保藏技術(shù)原理：將安瓿管置于-70℃冰箱中冷凍4h，然后迅速移入液氮罐中保存。使用時(shí)從液氮罐中取出，立即放置在38～40℃水浴中使其溶化，而后直接將其接種到適宜的培養(yǎng)基中即可。特點(diǎn)：此法存活率高，穩(wěn)定性強(qiáng)，保藏時(shí)間長(zhǎng)，是長(zhǎng)期保藏菌種的最好方法。冷凍保護(hù)劑在液氮冷凍保藏中，最常用的冷凍保護(hù)劑是二甲亞砜和甘油，最終使用濃度一般為甘油10％、二甲亞砜5％。所使用的甘油—般用高壓蒸汽滅菌，而二甲亞砜最好為過濾滅菌。幾種常用菌種保藏方法的比較方法名稱主要措施適宜菌種保藏期評(píng)價(jià)冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固體）石蠟油封藏法*沙土保藏法冷凍干燥法低溫低溫低溫、缺氧干燥、無營(yíng)養(yǎng)干燥、無氧、低溫、有保護(hù)劑各大類細(xì)菌、酵母菌各大類**產(chǎn)孢子微生物各大類3~6月6~12月1~2年1~10年5~15年以上簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便有效簡(jiǎn)便有效1、菌種保藏