3.1牛子宮內(nèi)膜炎Bovineen是指母牛分娩時或產(chǎn)后由于致病性病原微生物感染或胎衣不下、3.2MHA培養(yǎng)基Mueller-Hi3.3麥康凱培養(yǎng)基MacConkeyAg具有中等強度選擇性，主要抑制革蘭陽性菌3.4伊紅美藍培養(yǎng)基EosinMethylene2病原菌侵入子宮的途徑可分為上行性感染(陰道感染)和下行性感染(血源性或淋巴源性感染)兩臨床癥狀分為四種（具體見附件A）：急性化膿性子宮內(nèi)膜炎；黏液膿性子宮內(nèi)膜炎；隱性子血斑；重癥有時可見子宮阜充血（見附錄C）。鏡下：初期黏膜毛細血管充血和滲出，黏膜淺層的宮腺管上皮細胞，發(fā)生變性壞死脫落，可有紅細胞道，至少停留30s以上，對側(cè)面、腹面和背面陰道壁至宮頸口進行觸診，退出時對陰道內(nèi)的性狀和2mL，立即注入備好的無菌瓶內(nèi)，封蓋，標記，冷藏保存。如待用。樣品解凍時，置于38℃~40℃水浴解凍。綿羊血瓊脂培養(yǎng)基、MHA培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、伊紅美藍培養(yǎng)基和KF鏈球菌培養(yǎng)基，實驗4A.3環(huán)境因素A.4營養(yǎng)和激素因素圍產(chǎn)期飼養(yǎng)管理不當、飼料品質(zhì)不佳造成母牛營養(yǎng)代謝失調(diào)，如飼糧中缺乏維生素A和微量元病牛精神沉郁，體溫略有升高，食欲減退，陰道檢查時可見黏膜充血、腫脹，從陰門不斷排6鈉0.4g，瓊脂13.0g，溴甲酚紫0.015g，加熱溶解于1000mL蒸餾水中，121℃高壓15min，冷卻至4)結(jié)晶紫染色將載玻片置于廢液缸上，加適量（以蓋滿細菌涂面）的染液染色1min。6)媒染滴加盧哥氏碘液，媒染1min。89)復(fù)染滴加石炭酸復(fù)紅染5min。E.1取培養(yǎng)物2mL，12000r/min離心10min，用細菌基因組DNA提取試劑盒對沉淀物進行基因組DNA的提取。以菌液DNA為模板，采用通用引物（16SrRNA），對細菌16SrRNA基因（1）革蘭氏染色試驗：細菌涂片用革蘭氏染色液進行染色后，顯微鏡下10×100倍觀察，革蘭（2）溶血試驗：用劃線法將待檢菌落接種于血液平板，置37℃培養(yǎng)18～混勻，然后加1滴3％過氧化氫后進行觀察，有氣泡產(chǎn)生者為陽性（+）。做過氧化氫酶試驗不宜用觸酶試驗必須用18～24h的培養(yǎng)物，陳舊培養(yǎng)物可能失去觸酶活性，而出現(xiàn)假陰性。試驗用雙氧水（4）血漿凝固酶試驗：采用玻片法，于玻片上滴加1滴生理養(yǎng)24h，觀察其反應(yīng)情況。產(chǎn)酸（+）培養(yǎng)基變黃；產(chǎn)酸產(chǎn)氣(⊕)培養(yǎng)基變黃有氣泡；培養(yǎng)基變紅 (Δ);硫化氫陽性或陰性反應(yīng)（+/。瓊脂高層。用接種針挑取培養(yǎng)物，沿試管壁作穿刺接種，37℃培養(yǎng)1～2d后觀察，培養(yǎng)基變黑色為d，能利用檸檬酸鹽的細菌表現(xiàn)為有細菌生長，培（－）無色，加入對二甲基氨基苯甲醛試劑，可形成紅色的玫瑰靛基質(zhì)。將被檢菌接種于半固體瓊脂，37℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)24～48h，沿管壁滴加歐氏試劑0.5mL，覆蓋于無癥狀物的表面。結(jié)果判定：陽（12）甲基紅（M.R）試驗：接種細菌于生化管培養(yǎng)液（含葡萄糖、K2HPO4、蛋白胨）中，37℃恒溫培養(yǎng)2～7d，于培養(yǎng)物中加入幾滴甲基紅試劑，變紅色者為陽性反應(yīng)（+）。（13）維培（V-P）試驗：用Barritt′s試劑法，接種細菌于培養(yǎng)液（含葡萄糖、K2HPO4、蛋白（15）明膠液化試驗：明膠是一種動物蛋白質(zhì)，能在20℃時凝固，高于20℃時則液化。某些菌能產(chǎn)生明膠酶，可使明膠分解成為多肽和氨基酸而不再凝菌，另1管不接種細菌作為對照，同置于37℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)24～48h，取出，同放于4℃冰箱中30min，結(jié)果判定：陽性，明膠呈液態(tài)不凝固，并觀察液化