中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究現(xiàn)狀及其發(fā)展趨勢部分藥材基原混亂栽培中藥材質(zhì)量問題嚴重人為造假人為添加“再生藥材”——提取后的藥材一、當(dāng)前中藥質(zhì)量面臨的挑戰(zhàn)基原混亂的常用中藥材石斛及其楓斗：石斛屬及石仙桃屬植物混用白花蛇舌草：全屬植物混用大黃：掌葉大黃、唐古特大黃、藥用大黃、河套大黃、水根黃、土大黃常山：市場常見小檗屬植物根重樓：重樓屬植物混用蒲公英：蒲公英屬植物混用紫花地丁：堇菜屬植物混用栽培中藥材存在的問題栽培年限縮短：人參三七大黃甘草黃芪遠志黨參北沙參麥冬大量使用化肥：大量使用植物激素：壯根靈大量使用農(nóng)藥或使用禁用農(nóng)藥：三七（二年生）黃芪（二年生）中藥材的人為造假冬蟲夏草假蟲草古尼蟲草沉香3000元/g劣質(zhì)沉香沉香偽品假菟絲子(滑石粉制丸包衣)假菟絲子(泥土制丸包衣)劣質(zhì)菟絲子假冰片(冰糖)蒲黃蒲黃在顯微鏡下觀察蒲黃偽品（非藥用部位打粉加工而成）蒲黃偽品在顯微鏡下觀察中藥材及其飲片的人為造假重樓重樓偽品（萬年青）血竭血竭偽品（松香+染料）白及偽品（黃精）白及偽品（玉竹）黒附片白附片黒附片偽品（紅薯加工）白附片偽品（紅薯加工）白附片偽品（馬鈴薯）白附片偽品（木薯）中藥材增重海馬（泥沙增重）海龍（泥沙增重）全蝎（滑石粉+粘合劑增重）海金沙顯微鏡下觀察海金沙（泥土、滑石粉增重）顯微鏡下觀察白豆蔻白豆蔻（硫酸鎂增重）中藥材美容及“再生藥材”平貝母雙氧水漂白平貝母提取過的紅花再染色、增重提取過的紅花紅花丹參藥材丹參飲片丹參偽品（牛蒡根切片后染色）二、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的構(gòu)建問題：①化學(xué)成分不清楚、有效成分不明確②部分藥材基原不清楚③人為造假現(xiàn)象很嚴重④管理缺陷，地方保護中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)面臨的挑戰(zhàn)整體質(zhì)量控制特點：①來源：植物、動物、礦物②化學(xué)成分復(fù)雜，功能主治廣泛③多成分、多途徑、多靶點作用④化學(xué)成分受基原、產(chǎn)地、生態(tài)環(huán)境、栽培技術(shù)等影響較大中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建思路中藥化學(xué)成分研究闡明化學(xué)成分生物活性研究或文獻調(diào)研闡明有效成分TLC鑒別特征圖譜主要成分含量測定指紋圖譜中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫性狀鑒別組織、粉末顯微鑒別水分總灰分酸不溶性灰分重金屬及有害元素殘留農(nóng)藥真菌毒素有毒有害物質(zhì)限量檢查鑒別——明確真假——第一重要檢查——保障安全——第二重要指紋圖譜+含量測定——品質(zhì)優(yōu)劣——第三重要三、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究現(xiàn)狀性狀鑒別顯微鑒別組織鑒別粉末鑒別西紅花杜仲冬蟲夏草假蟲草蟲草加無機鹽增重1、鑒別TLC鑒別12345678910S1S2S32、檢查重金屬及有害元素：原子吸收光譜、等離子質(zhì)譜殘留農(nóng)藥：GC、GC-MS、LC-MS真菌毒素：HPLC、LC-MS二氧化硫殘留：離子色譜有毒有害物質(zhì)限量檢查：HPLC、LC-MS、GC、GC-MS三、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究現(xiàn)狀三、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究現(xiàn)狀3、指紋圖譜測定方法：HPLC、LC-MS、GC、GC-MS、HPCE等評價方法：指紋圖譜相似度評價軟件4、含量測定方法：HPLC、LC-MS、GC、HPCE指標(biāo)：單一成分或少數(shù)成分四、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)發(fā)展趨勢整體控制突出安全簡便重現(xiàn)1、以對照提取物為對照的中藥TLC鑒別優(yōu)勢：多成分對照，專屬性強大批量生產(chǎn)，一致性、均一性強，成本低微量化、芯片化，攜帶、使用方便，成本更低說明書附TLC圖片，鑒定更加準(zhǔn)確、明了(一)中藥專屬性鑒別2、以對照提取物為對照的特征圖譜鑒別白鮮堿黃柏酮梣酮白鮮皮藥材對照特征圖譜不同產(chǎn)地白鮮皮特征圖譜白鮮皮根皮與木心特征圖譜比較根皮木心基于特征圖譜的沉香藥材的真?zhèn)舞b別瑞香科植物白木香

Aquilariasinensis(Lour.)Gilg含樹脂的木材白木香莖木沉香白木香莖木沉香HPLC色譜圖LC-MS總離子流圖基于特征圖譜的沉香藥材及其偽品鑒定不同產(chǎn)地沉香藥材指紋圖譜分析偽品沉香的指紋圖譜分析劣質(zhì)品沉香樣品指紋圖譜分析特征圖譜在多基原中藥鑒定中的應(yīng)用——

威靈仙多基原藥材鑒定威靈仙(Clematischinensis)東北鐵線蓮(Clematismanshurica)棉團鐵線蓮(Clematishexapetala)威靈仙多基原藥材的特征圖譜分析C.manshuricaC.hexapetalaC.chinensisλ＝320nm具有異阿魏酰基的皂苷，COX-2抑制作用，320nm為IF最大吸收波長因此選擇320nm建立指紋圖譜

C.manshuricaC.chinensisλ＝320nmλ＝320nm指紋圖譜研究曬青毛茶直接飲用普洱綠茶

自然陳化普洱陳茶渥堆發(fā)酵普洱熟茶磚茶餅茶金瓜沱茶普洱茶的指紋圖譜研究與特征圖譜的建立各產(chǎn)地、加工企業(yè)普洱生茶指紋圖譜S1:臨滄市

S2:臨滄市S3:普洱市

S4:普洱市

S5:普洱市

S6:西雙版納

S7:大理州

S8:臨滄市

S9:臨滄市

S10:普洱市

S11:西雙版納

S12:西雙版納

S13:西雙版納

S14:臨滄市

S1:大理州S2:臨滄市S3:臨滄市S4:臨滄市S5:西雙版納S6:普洱市S7:普洱市S8:普洱市S9:普洱市S10:臨滄市S11:臨滄市S12:大理州S13:臨滄市S14:普洱市各產(chǎn)地、加工企業(yè)普洱熟茶指紋圖譜不同茶葉HPLC圖譜（280nm）不同茶葉TIC圖譜（-MS/+MS）HPLC-MRM-MS檢測不同茶葉中的puerinsⅠ-ⅧPuerins的生物合成機理探討普洱茶中微生物發(fā)酵產(chǎn)物普洱生茶各色譜峰的指認：Gallicacid

protocatechuicacidGCTheobromineCatechinCaffeineEpicatechinEGCGGCGMyricetin3-O-D-galactopyranoside

Apegenin-6-C--L-arabinopyranosyl-8-C-D-glucopyranosideApigenin-8-C-glucose-rhamnoseQuercetin3-O-β-D-glucopyranosideECGCG

Kaempferol3-O--L-rhamnopyranosyl(1→6)--D-galactopyranosideQuercetin-3-O-rhamnosidekaempferol3-O-β-D-glucopyranosideEGC普洱熟茶各色譜峰的指認：CytidineGallicacid

protocatechuicacidGCTheobromineEGCCatechinCaffeineEpicatechinEGCGPuerinIGCGPuerinIIApegenin-6-C--L-arabinopyranosyl-8-C-D-glucopyranosideApigenin-8-C-glucose-rhamnose16PuerinIIIPuerinIVQuercetin-3-O-[-L-rhamnopyranosyl(1→6)-O-glucopyranisideN-(3,4-dihydroxybenzoyl)-3,4-dihydroxybenzamideQuercetin3-O-β-D-glucopyranosideKaempferol3-O--[-L-rhamnopyranosyl-(1→

3)--L-rhamnopyranosyl-(1→6)]—D-glucopyranosideKaempferol3-O--L-rhamnopyranosyl(1→6)--D-galactopyranosidekaempferol3-O-β-D-glucopyranoside3.生物學(xué)鑒別(1)DNA鑒別(2)DNA條形碼1.陽性對照2-11.烏梢蛇12.陰性對照13.空白(3)蛋白質(zhì)凝膠電泳(4)基于單克隆抗體技術(shù)的中藥快速鑒別辛天怡，陳士林*等.藥學(xué)學(xué)報.2012,47(8)重金屬及有害元素殘留農(nóng)藥二氧化硫殘留真菌毒素內(nèi)源性有害物質(zhì)(二)高效、靈敏的安全性相關(guān)檢查高效靈敏檢測方法：單克隆抗體化學(xué)反應(yīng)(三)中藥指紋圖譜的深入研究

與檢測標(biāo)準(zhǔn)的建立中藥材、飲片指紋圖譜研究與檢測標(biāo)準(zhǔn)建立LC-DAD-MSn指紋圖譜分析與中藥化學(xué)成分信息庫的構(gòu)建唐古特大黃的HPLC/MS/MS分析唐古特大黃LC-MS對照指紋圖譜

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

流動相以乙酸代替磷酸，其它同HPLC指紋圖譜。MicromassQ-ToFMicroTM質(zhì)譜儀，負離子模式，一級MS碰撞電壓10V，二級MS碰撞電壓30V。

RAPIDCOMMUNICATIONSINMASSSPECTROMETRY,2007;21:2351-2360唐古特大黃LC/MS/MS分析結(jié)果

唐古特大黃41個色譜峰的UV和MS2特征

唐古特大黃LC-DAD-MSn化學(xué)成分信息數(shù)據(jù)庫的建立指紋圖譜在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高與標(biāo)準(zhǔn)修訂中的應(yīng)用檢驗原有標(biāo)準(zhǔn)是否存在問題發(fā)現(xiàn)質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分未調(diào)酸未加鹽pH=6.42A276.60nm＝0.5140A250.00nm＝0.3177

調(diào)酸加鹽pH=6.57A277.80nm＝0.7905A248.60nm＝0.4158

糠醛對照品λmax277.20nmAbs=0.7398樣品UV276nmA0.39B13.06B21.15B31.37B41.22B51.42B61.58B71.49樣品UV276nmB81.49B91.64B101.77B111.78B121.79B131.66B141.94柴胡注射液276nm的吸收主要由糠醛貢獻建議刪除該檢查，增加糠醛的限量檢查糠醛(四)基于藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的多成分含量測定測定方法HPLCLC-MSGCGC-MSHPCESFCNMR解決途徑一標(biāo)多測以對照提取物為對照的多成分含量測定核磁共振1、基于“一標(biāo)多測”方法解決對照品缺乏問題NoCompoundsR1R21EmodinCH3OH2RheinCOOHH3ChrysophanolCH3H4PhyscionCH3OCH35Aloe-emodinCH2OHH蒽醌類混合對照品掌葉大黃樣品色譜圖Table1Calibrationcurves,LODandLOQoftheinvestigatedcompoundsAnalytesLinearregressiondataLOD(ng)LOQ(ng)FRegressiveequationTestrange(μg·ml-1)R2Emodiny=26.76x-2.457.76-612.801.00000.762.321.0000Rheiny=25.47x-2.577.96-636.801.00000.180.480.9518Chrysophanoly=22.86x-1.518.80-352.001.00001.403.800.8543Physciony=20.19x-2.097.64-305.610.99991.102.960.7545Aloe-emodiny=2.03x-3.0110.54-9152.001.00001.002.780.0759SennosideAy=4.11x-1.1018.60-1116.000.99992.806.900.1536SennosideBy=4.44x-1.7025.40-1016.000.99992.907.200.1659Xiao-YanGao,Peng-FeiTu,etal..JournalofChromatographyA,2009,1216(11):2118-2123No.AnalytesContent(%)Relative

deviationaThepresentmethodCalibrationequationmethod1Emodin0.600.600.00Rhein0.190.190.00Chrysophanol0.140.140.00Physcion0.060.060.00Aloe-emodin0.990.980.01SennosideA1.551.550.00SennosideB0.520.510.022Emodin0.430.430.00Rhein0.120.120.00Chrysophanol0.100.100.00Physcion0.090.090.00Aloe-emodin1.041.030.01SennosideA1.631.620.01SennosideB0.740.730.013Emodin0.330.330.00Rhein0.100.100.00Chrysophanol0.990.990.00Physcion0.060.060.00Aloe-emodin1.331.320.01SennosideA1.801.790.01SennosideB1.000.990.0147“一標(biāo)多測”需要探討的問題色譜峰的確認計算方法問題：標(biāo)準(zhǔn)曲線法、外標(biāo)一點法？標(biāo)準(zhǔn)曲線是否過原點的問題不同吸收波長化合物的測定誤差校正系數(shù)(F值)對測定結(jié)果的影響保留時間差別較大的測定誤差低含量成分的測定誤差問題2、以對照提取物為對照的中藥多成分含量測定制備簡單，成本低定量化包裝，使用方便節(jié)省對照品說明書附色譜圖，色譜峰易于鑒別standardizedextract以對照提取物為對照的九里香藥材

多甲氧基黃酮類成分的含量測定-OHa-OCH3aP-1-5,7,8,3',4',5'P-2-5,7,3',4',5'P-3-5,6,7,3',4',5'P-4

-5,6,7,8,3',4',5'P-5

56,7,3',4'P-6

56,7,8,3',4'P-7

56,7,8,3',4',5'標(biāo)化提取物的HPLC色譜圖千里香藥材HPLC色譜圖SampleP-1aP-2aP-3aP-4aP-5aP-6aP-7aTotal

FlavonoidsaS13.5954.1152.1922.8370.7495.2670.99419.749S26.6798.7887.4586.6811.2868.6481.72641.266S317.5309.7162.3221.2901.9088.5690.71742.052S46.16514.0282.5600.94611.62217.9861.69054.997S522.17911.8340.9271.9221.1257.0221.15346.162S69.14112.0048.8698.3431.43210.0972.17352.059S712.4237.3102.0281.1261.8137.2020.67332.575S87.7909.5647.9506.1917.5639.2661.60149.925S920.88910.7723.4381.5422.7959.9290.84850.213S1022.56412.7641.0061.9730.6197.3981.23547.559S1126.11913.9120.9642.8111.3008.1151.30554.526S1224.16212.6041.0151.2411.2407.2241.26548.751S133.1574.1920.9931.3130.4582.0210.55412.688S1421.44011.3070.8061.6841.3526.1981.06843.855S155.1835.5821.4621.3050.6443.0800.63117.887S1612.4267.2132.4930.9961.7656.2470.48531.625Rangeofcontent3.16～26.124.20～14.030.93～8.870.95～8.340.46～11.622.02～17.990.49～2.1712.69～55.00Contentlimit1.0%0.8%0.1%0.1%0.1%0.5%0.08%2.0%Contents(mg/g)ofinvestigatedcompoundsinMurrayapaniculata

3、1HNMR技術(shù)在中藥定量分析中的應(yīng)用

白鮮皮（Dictamnusdasycarpus）dictamnineIS:pyrazineameancontentofthreereplicates.bRSD%ofcontentsofthreereplicatescRE%isexpressedtherelativeerroroftwomethods.Thecontents(mg/g)ofdictamninein

D.dasycarpusfromdifferenthabitats1HNMRspectrumofD.dasycarpusintherangeof

4.0-9.2Sample(habitat)Dictamine(mg·g-1)RE%bqNMRHPLCChangsha,Hunan0.46a(1.96b)0.46(1.96)0Huhehaote,Neimenggu0.21(0.48)0.21(1.90)0Wuchang,Heilongjiang0.49(0.41)0.49(0.82)0Liaoning0.30(2.33)0.29(1.03)3.3Dingyuan,Anhui1.66(0.78)1.67(0.78)0.6Hefei,Anhui0.32(1.88)0.31(1.61)2.7Baotou,Neimenggu0.36(1.11)0.37(0.54)3.2Mudanjiang,heilongjiang0.25(2.80)0.25(0.40)0Jinan,Shandong0.61(0.98)0.62(0.65)1.6Jilin0.31(1.29)0.32(1.88)3.1Tianheng,Liaoning0.26(0.77)0.25(2.40)