陰道感染的實(shí)驗(yàn)室診斷，我們應(yīng)該做什么？

------從技術(shù)角度對(duì)陰道微生態(tài)評(píng)價(jià)系統(tǒng)的詮釋

1整理ppt陰道感染診療中的主要問(wèn)題：---------診療不規(guī)范！突出表現(xiàn)----“診斷不充分”2整理ppt診斷不充分表現(xiàn)：目前的主要手段：“望、聞、問(wèn)”50%不做實(shí)驗(yàn)室檢查基本不做微生態(tài)評(píng)價(jià)3整理ppt|Mobility陰道感染的臨床與實(shí)驗(yàn)室診斷我們應(yīng)該做什么？4整理ppt

陰道感染的臨床與實(shí)驗(yàn)室診斷1、應(yīng)該關(guān)注陰道微生態(tài)5整理ppt陰道原籍菌(乳酸桿菌)數(shù)量:8x107cfu/ml5%95%123由六種不同種類的細(xì)菌以及念珠菌、支原體等組成。正常育齡婦女陰道內(nèi)有200種微生物這些微生物在陰道內(nèi)形成生態(tài)平衡。陰道菌群（陰道的微生態(tài)系統(tǒng)）陰道微生態(tài)的概念6整理ppt陰道粘膜上皮細(xì)胞縱切面示意圖（過(guò)路菌）乳桿菌（原籍菌）（條件致病菌）是由不同種屬的宿主傳來(lái)的是其自身宿主個(gè)體對(duì)其無(wú)免疫反應(yīng)或低免疫反應(yīng)，是宿主個(gè)體固有的菌群是由同種屬不同宿主個(gè)體傳來(lái)的7整理ppt維持酸性環(huán)境形成保護(hù)性菌膜抑制微生物增殖乳酸桿菌正常陰道菌群作用陰道微生態(tài)平衡的核心：維持乳酸菌特別是H2O2LB在陰道菌群中的優(yōu)勢(shì)地位！

在陰道粘膜表面形成一層保護(hù)性菌膜，防止入侵微生物在陰道粘膜上定植

乳酸桿菌產(chǎn)生的乳酸使陰道分泌物維持酸性環(huán)境；乳酸桿菌產(chǎn)生的H2O2可抑制CA、細(xì)菌等條件致病菌的增殖。。。抑制HIV、HPV、支原體、衣原體的增殖。8整理ppt

乳桿菌數(shù)量減少，生化指標(biāo)改變，陰道微生態(tài)破壞陰道菌群失調(diào)各類陰道炎加重陰道菌群失調(diào)各種誘因各類陰道炎的共性：---陰道微生態(tài)破壞！9整理ppt|Mobility

乳酸菌%厭氧菌%需氧菌%支原體%

LB-LB正常80-10070-100

10-400-3020-40AV10-4010-3020-3070-8030-50BV10-500-10

50-7010-3040-60滴蟲(chóng)陰道炎10-400-2010-300-3020-40霉菌陰道炎20-500-3020-3010-4020-30

老年性陰道炎0-200-1020-4060-8030-40菌群演變?cè)斐删航Y(jié)構(gòu)改變，特點(diǎn)：1、厭氧菌、需氧菌及CA等條件致病菌大量增加

2、乳酸桿菌特別是產(chǎn)過(guò)氧化氫乳酸菌減少或消失所有的陰道感染都源于或伴有陰道微生態(tài)改變！10整理ppt|Mobility護(hù)理生殖道關(guān)注微生態(tài)

最重要！11整理ppt|Mobility全國(guó)婦產(chǎn)科感染協(xié)作組提出：

將陰道微生態(tài)恢復(fù)正常作為陰道炎治療的終極目標(biāo)！12整理ppt|Mobility

通過(guò)形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)等方法所獲得的陰道菌群數(shù)量和功能方面的信息分析陰道菌群結(jié)構(gòu)的演替

機(jī)體反應(yīng)水平陰道微生態(tài)評(píng)價(jià)的內(nèi)涵13整理ppt|Mobility

A、正常優(yōu)勢(shì)菌功能生物學(xué)標(biāo)志B、致病微生物與條件致病微生物增殖的生物學(xué)標(biāo)志C、機(jī)體反應(yīng)性的生物學(xué)標(biāo)志了解菌群數(shù)量的變化濕片鏡檢（超高倍顯微鏡）、革蘭氏染色（Nugent）、培養(yǎng)形態(tài)學(xué)檢查生物標(biāo)志物檢查了解菌群數(shù)量與功能的變化陰道微生態(tài)的評(píng)價(jià)系統(tǒng)14整理ppt|Mobility預(yù)成酶酶譜分析糖苷酶:SNa、GluNA酯酶:ALP、LE肽酶：LAP、Prolidase

短鏈脂肪酸（乙酸、琥珀酸）單胺和多胺增加（胺試驗(yàn)陽(yáng)性）菌胞壁糖類（阿拉伯醇糖）

陰道微生態(tài)評(píng)價(jià)的方法學(xué)體系生物化學(xué)方法微生物學(xué)方法分子生物學(xué)方法免疫學(xué)方法1優(yōu)勢(shì)菌(乳酸菌)功能的生化標(biāo)志物2致病與條件致病微生物增殖的生化標(biāo)志物3機(jī)體反應(yīng)性的生化標(biāo)志物白細(xì)胞酯酶LE乳酸菌代謝包括：過(guò)氧化氫、乳酸、乳酸菌素微生物代謝產(chǎn)物

15整理ppt|Mobility產(chǎn)H2O2乳酸菌的數(shù)量和功能是否正常（>90%H2O2正常）產(chǎn)H2O2乳酸菌優(yōu)勢(shì)菌被哪一類微生物取代支原體衣原體陰道菌群結(jié)構(gòu)分析的流程細(xì)菌原蟲(chóng)（滴蟲(chóng)性陰道炎）真菌（VVC）厭氧菌感染（BV）需氧菌感染（AV）16整理ppt|Mobility

陰道感染的臨床與實(shí)驗(yàn)室診斷2、應(yīng)該關(guān)注機(jī)體的反應(yīng)水平17整理ppt|Mobility陰道感染發(fā)病機(jī)理正常（微生態(tài)平衡）組織損傷/炎癥病原菌釋放毒素/宿主反應(yīng)病原菌增殖、微生態(tài)破壞18整理ppt|Mobility感染≠炎癥！炎癥是感染病原體與宿主之間相互反應(yīng)的結(jié)果病原體---釋放毒素（蛋白質(zhì)、因子、酶）攻擊宿主-------I宿主——防御系統(tǒng)（免疫球蛋白、因子、細(xì)胞吞噬功能）I———清除病原體結(jié)局：病原體被清除組織損傷——炎癥19整理ppt|Mobility機(jī)體反映性臨床與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)

粘膜充血吞噬現(xiàn)象、細(xì)胞碎片吞噬細(xì)胞的功能----白細(xì)胞酯酶LE20整理ppt|Mobility

標(biāo)本中細(xì)菌分布、排列的密集程度，即每克或每毫升標(biāo)本中的菌落數(shù)。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(放大倍10×100觀察每視野平均細(xì)菌數(shù))I級(jí)（記為“+”）1個(gè)～9個(gè)

II級(jí)（記為“++”）

10個(gè)～99個(gè)

III級(jí)（記為“+++”）

100個(gè)以上

IV級(jí)（記為“++++”）細(xì)菌聚集成團(tuán)

(涂片中所見(jiàn)細(xì)菌種類)

I級(jí)（記為“+”）能辨別1～3種細(xì)菌；

II級(jí)（記為“++”）

能辨別4～6種細(xì)菌；

III級(jí)（記為“+++”）能辨別7～10種細(xì)菌；

IV級(jí)（記為"++++"）

能辨別11種以上細(xì)菌。(局部有無(wú)炎癥---菌群的致病性)有無(wú)白細(xì)胞、膿細(xì)胞滲出，有無(wú)吞噬現(xiàn)象等。？菌群的密集度機(jī)體炎性反應(yīng)菌群的多樣性優(yōu)勢(shì)菌注釋1：Nugent的內(nèi)容21整理ppt|MobilityNugentMethod:Scores0-10

Normal(0) Intermediate(6) BV(10)22整理ppt|Mobility注釋2、常用的功能（生化）指標(biāo)

乳酸桿菌的功能---過(guò)氧化氫PO吞噬細(xì)胞的功能---白細(xì)胞酯酶LE病源菌的功能厭氧菌：SNa需氧菌：GADP念株菌：GluNAC、PrAP23整理ppt|Mobility1.性狀（色量味）2.鹽水塗片鏡檢（清潔度、滴蟲(chóng)、霉菌、雜菌）

1.預(yù)成酶酶譜2.代謝產(chǎn)物譜3.機(jī)體反應(yīng)性4.微生物組份細(xì)菌分類（S/B，G+/G-）病原微生物檢查一般檢查:塗片革蘭氏染色生化標(biāo)志物檢查培養(yǎng)規(guī)范性陰道分泌物實(shí)驗(yàn)室檢查內(nèi)容24整理ppt|Mobility涂片鏡檢清潔度滴蟲(chóng)霉菌分泌物性狀，量、色、味GalNAcGalGUSALPLENasePYPLAPCystiH2O2規(guī)范性陰道分泌物檢測(cè)流程革蘭氏染色培養(yǎng)血瓊脂（厭氧）、麥康凱、SDA革蘭氏染色（Nugent評(píng)分）臨床信息：臨床診斷確定病原體生化鑒定菌落特征25整理ppt|Mobility

推薦陰道分泌物常規(guī)檢查內(nèi)容

涂片鏡檢細(xì)胞雜菌LEPOSNaGUSGADP革蘭氏染色（Nugent

評(píng)分）生化檢查G+球菌G+桿菌G-球菌G-桿菌清潔度滴蟲(chóng)霉菌WBC.PO功能；厭氧.需氧26整理ppt|Mobility

現(xiàn)行陰道分泌物檢查內(nèi)容

涂片鏡檢清潔度滴蟲(chóng)霉菌氨試驗(yàn)SNapH生化檢查不能了解微生態(tài)變化不能了解機(jī)體反應(yīng)性不能區(qū)分厭氧需氧菌27整理ppt|Mobility過(guò)氧化氫濃度SNa活性LE活性衛(wèi)生部十年百項(xiàng)計(jì)劃推廣項(xiàng)目江西省星火計(jì)劃項(xiàng)目浙江醫(yī)藥衛(wèi)生科技重點(diǎn)推廣項(xiàng)目

可了解陰道微生態(tài)變化可了解機(jī)體的反應(yīng)性

細(xì)菌性陰道病聯(lián)合測(cè)定技術(shù)—“婦炎知”

28整理ppt|Mobility操作簡(jiǎn)便費(fèi)用低廉技術(shù)持有單位：中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所北京中生金域診斷技術(shù)有限公司

29整理ppt|Mobility過(guò)氧化氫過(guò)氧化物酶法唾液酸苷酶5-溴-4-氯-3-吲哚唾液酸鹽法白細(xì)胞酯酶5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽法30整理ppt|Mobility過(guò)氧化氫濃度的意義正常TextText異常TextText乳酸桿菌減少或消失產(chǎn)過(guò)氧化氫乳酸桿菌優(yōu)勢(shì)地位正常優(yōu)勢(shì)菌功能指標(biāo)了解乳酸桿菌產(chǎn)過(guò)氧化氫的功能31整理ppt|Mobility使用陰道乳酸菌對(duì)過(guò)氧化氫的陰轉(zhuǎn)率的影響組別

總例數(shù)

有效數(shù)

轉(zhuǎn)陰數(shù)

轉(zhuǎn)陰率（%）治療組

280

266

136

73.12對(duì)照組

280

142

38

26.76

（嵊州市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，2007）治療組：常規(guī)治療至癥狀后使用一個(gè)療程的依道乳酸菌對(duì)照組：常規(guī)治療至癥狀消失者32整理ppt|Mobility白細(xì)胞酯酶LE活性測(cè)定的意義正常TextText增高TextText提示陰道炎癥反應(yīng)病原體致病性消失炎癥消失機(jī)體反應(yīng)性指標(biāo)了解陰道炎癥及其程度33整理ppt|MobilityLE—炎癥反應(yīng)指標(biāo)白細(xì)胞與白細(xì)胞酯酶的關(guān)系123LE與被破壞的白細(xì)胞數(shù)量成正比白細(xì)胞的數(shù)量與采樣部位、涂片均勻程度、月經(jīng)周期有關(guān)反應(yīng)吞噬細(xì)胞的功能（大部分細(xì)菌、支原體、衣原體感染均可出現(xiàn)吞噬現(xiàn)象）白細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬過(guò)程34整理ppt|Mobility使用陰道乳酸菌對(duì)白細(xì)胞酯酶陰轉(zhuǎn)率的影響組別

總例數(shù)

有效數(shù)

轉(zhuǎn)陰數(shù)

轉(zhuǎn)陰率（%）治療組480474

376

78.3對(duì)照組380

246

142

37.3（紹興市婦幼保健院，2007）治療組：常規(guī)治療至癥狀后使用一個(gè)療程的依道乳酸菌對(duì)照組：常規(guī)治療至癥狀消失者35整理ppt|Mobility唾液酸苷酶活性的意義Text陰性陽(yáng)性Text

BV等致病性厭氧菌增加無(wú)引發(fā)BV的細(xì)菌繁殖致病菌增殖指標(biāo)了解有無(wú)引發(fā)BV病原體的進(jìn)居和增殖36整理ppt|Mobility即將推出：11.5支撐計(jì)劃課題---“ABV聯(lián)合測(cè)定技術(shù)”包括：PO、LE、SNaGUS、GADP可了解：厭氧菌、需氧菌感染情況37整理ppt|Mobility陰道細(xì)菌感染分類

AVBV

病原體需氧菌厭氧菌癥狀炎癥非炎癥藥物硫霉素類甲硝唑38整理ppt|Mobility

正常人和AV、BV患者陰道菌群分析結(jié)果正常人AVBV需氧菌:N(%)N(%)N(%)乳酸桿菌74（100）60（12.5）12（25）產(chǎn)H2O2乳酸桿菌69（89）3（9.6）4（8.3）B族鏈球菌1（1.3）2（6.5）1（2）金黃色葡萄球菌3（4）10（32）6（12.5）糞腸球菌5（6.8）9（29）9（18.7）加德納菌9（12）6（19.5）17（35）埃希氏大腸菌8（10.8）7（22.5）8（16.7）克雷伯菌1（1.3）4（13）4（8.3）變形桿菌6（8.4）2（6.4）3（6.2）厭氧菌:N(%)N(%)N(%)消化鏈球菌7（9.4）6（19.5）16（33.3）梭狀芽胞桿菌8（10.8）1（3.2）3（6.2）丙酸桿菌2（2.7）03（6.2）脆弱擬桿菌3（4）1（3.2）11（22.9）普雷沃菌2（2）4（13）13（27）39整理ppt|Mobility

AV致病菌的抗生素敏感性亞胺硫霉素（泰能）Imipenem哌拉西林（氧哌嗪青霉素）Piperacillin三唑巴坦（b類酰胺酶抑制劑）Tazobatam40整理ppt|Mobility臨床診斷為BV的微生物分析結(jié)果臨床診斷BV74例厭氧菌42例（56%）厭氧菌+需氧菌32例（44%）分離培養(yǎng)41整理ppt|Mobility

陰道常見(jiàn)需氧菌和厭氧菌預(yù)成酶酶譜S.aueasE.coli糞腸球菌GBS加德納菌普雷沃菌消化鏈球菌白色念珠菌AP＋＋＋－－＋＋＋Gal－＋－＋＋－＋＋Glu＋－－－－＋－－Gus－＋－＋－－－－Fuc－－＋－－＋－－Man－＋＋－－＋－－GluNAc＋－－－＋－－＋GalNAc－－－－－－－＋SNa－－＋－＋＋－＋LAP＋＋＋＋－＋－＋AAP＋＋＋－＋－＋－ArAP＋－－－＋＋＋－PAP－－－－＋－－＋PGDP－－＋－＋－－－AADP－＋－－－＋－－GADP＋＋＋－－－－±42整理ppt|Mobility“ABV聯(lián)合測(cè)定技術(shù)”包括：PO、LE、SNaGUS、GADP43整理ppt|Mobility

測(cè)定結(jié)果解釋H2O2、SNa陽(yáng)性,考慮診斷:BVH2O2、LE陽(yáng)性+GUS、GADP一項(xiàng)陽(yáng)性或兩項(xiàng)均為陽(yáng)性,考慮診斷:AV5項(xiàng)指標(biāo)均為陽(yáng)性,或者H2O2、LE、SNa陽(yáng)性伴GUS或GADP陽(yáng)性，考慮AV、BV混合感染。44整理ppt|Mobility

AV/BV聯(lián)合測(cè)定試劑盒檢測(cè)BV的結(jié)果

檢驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)本發(fā)明檢測(cè)結(jié)果合計(jì)陰性陽(yáng)性臨床和微生物學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果陰性1886194陽(yáng)性44751敏感性=47÷51×100%=92%；特異性=188÷194×100%=97%%45整理ppt|Mobility

AV/BV聯(lián)合測(cè)定試劑盒檢測(cè)AV的結(jié)果

檢驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)本發(fā)明檢測(cè)結(jié)果合計(jì)陰性陽(yáng)性臨床和微生物學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果陰性1938201陽(yáng)性44044敏感性=40÷44×100%=91%；特異性=195÷201×100%=96%%46整理ppt|Mobility

技術(shù)適宜人群A.有陰道感染癥狀的患者B.經(jīng)常規(guī)治療后的各類陰道炎患者C.產(chǎn)前與產(chǎn)后陰道微生態(tài)評(píng)價(jià)D.妊娠期無(wú)癥狀體征者47整理ppt|Mobility

乳酸菌%厭氧菌%需氧菌%支原體%

LB-LB正常80-10070-100

10-400-3020-40AV10-4010-3020-3070-8030-50BV10-500-10

50-7010-3040-60滴蟲(chóng)陰道炎10-400-2010-300-3020-40霉菌陰道炎20-500-3020-3010-4020-30

老年性陰道炎0-200-1020-4060-8030-40菌群演變?cè)斐删航Y(jié)構(gòu)改變，特點(diǎn)：1、厭氧菌、需氧菌等條件致病菌大量增加2、乳酸桿菌特別是產(chǎn)過(guò)氧化氫乳酸菌減少或消失所有的陰道感染都源于或伴有陰道微生態(tài)改變48整理ppt|Mobility國(guó)外研究：如果反映陰道微生態(tài)平衡的指標(biāo)未恢復(fù)正常，即使以上3項(xiàng)指標(biāo)都已經(jīng)正常，復(fù)發(fā)的可能性很大。臨床體征，癥狀消失，病原體消失未考慮微生態(tài)是否恢復(fù)正常陰道感染復(fù)發(fā)率高的主要原因----陰道微生態(tài)未恢復(fù)！治療方案療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)2單一消炎殺菌很少考慮生態(tài)治療149整理ppt|Mobility指

征三個(gè)月后的復(fù)發(fā)率（%）例

數(shù)H2O2或乳酸正常

42758

（13）

pH＜4.5582

144

（24）線索細(xì)胞＜10%

615244（39）胺試驗(yàn)正常624321

（51）未檢出病原體766316

（41）體征與癥狀消失971496

（51）綜合46篇包括了滴蟲(chóng)性陰道炎、霉菌性陰道炎、細(xì)菌性陰道病、老年性陰道炎、白帶增多等生殖道感染與癥狀方面的文獻(xiàn)。不同治愈指標(biāo)的近期復(fù)發(fā)率50整理ppt