課時(shí)驗(yàn)收評(píng)價(jià)（五十二）全面落實(shí)“基因工程及生物技術(shù)的安全性,與倫理問(wèn)題”的主干知識(shí)1．若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，其原因不包括()A．目的基因無(wú)法插入受體細(xì)胞DNAB．目的基因無(wú)法復(fù)制C．目的基因無(wú)轉(zhuǎn)錄所需的啟動(dòng)部位D．目的基因與受體細(xì)胞遺傳信息傳遞方式不同解析：選D不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)，無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子。2．下列有關(guān)生物技術(shù)與倫理的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．生命科學(xué)的發(fā)展必須受倫理的規(guī)范和制約B．實(shí)施生命科學(xué)研究必須遵循：自主、不傷害、善行和公正的原則C．關(guān)注倫理問(wèn)題，就是完全限制生命科學(xué)的發(fā)展D．對(duì)于生物技術(shù)應(yīng)科學(xué)地控制，合理地使用，使它的發(fā)展對(duì)人類最有益解析：選C關(guān)注倫理問(wèn)題，并不是完全限制生命科學(xué)的發(fā)展。對(duì)于生物技術(shù)，人類所面臨的關(guān)鍵問(wèn)題是如何科學(xué)地進(jìn)行控制，并合理地使用，使它的發(fā)展對(duì)人類最有益。3．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程，有廣闊的發(fā)展前景。下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述正確的是()A．由于需要對(duì)蛋白質(zhì)直接改造，因此操作更難B．由于蛋白質(zhì)不能遺傳，因此蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物不能大量生產(chǎn)C．蛋白質(zhì)工程也需要設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因D．蛋白質(zhì)工程發(fā)展得已經(jīng)非常成熟，在各個(gè)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用解析：選C蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程，是在分子水平上對(duì)基因分子直接進(jìn)行操作，使其遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可以遺傳給下一代，A、B錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程對(duì)基因分子直接進(jìn)行操作，需要推測(cè)出應(yīng)有的氨基酸序列，設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因，C正確；蛋白質(zhì)工程的發(fā)展并不成熟，仍需一段時(shí)間提升，其目前并不能在各個(gè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，D錯(cuò)誤。4．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化其水解。將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．將幾丁質(zhì)酶基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建表達(dá)載體B．可通過(guò)顯微注射法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞C．可用PCR等技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入D．可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)真菌的抗性程度解析：選BTi質(zhì)粒的T-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，根據(jù)這一特點(diǎn)，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該將目的基因即幾丁質(zhì)酶基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，A正確；可通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞，顯微注射法常用于將目的基因?qū)雱?dòng)物受精卵中，B錯(cuò)誤；可用PCR等技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，C正確；根據(jù)題干信息“幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力”，故可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)真菌的抗性程度，D正確。5．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)分別為：—AATTG—和—AATTC—。如圖表示某一目的基因片段與質(zhì)粒拼接形成重組質(zhì)粒的過(guò)程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．用限制酶EcoRⅠ切割目的基因，同時(shí)用限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒B．兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補(bǔ)配對(duì)C．限制酶能使特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開D．將重組質(zhì)粒同時(shí)用2種限制酶切割則會(huì)形成2種DNA片段解析：選D由圖可知，目的基因兩側(cè)都是限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；質(zhì)粒中含有限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但EcoRⅠ的切割位點(diǎn)位于標(biāo)記基因中，用其切割會(huì)破壞標(biāo)記基因，因此為保證重組質(zhì)粒表達(dá)載體的準(zhǔn)確構(gòu)建，應(yīng)選用限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒，A正確。將重組質(zhì)粒同時(shí)用2種限制酶切割，則會(huì)形成3種DNA片段，D錯(cuò)誤。6．利用人胰島B細(xì)胞構(gòu)建cDNA文庫(kù)，然后通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因，篩選過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．該文庫(kù)保存的人類基因沒(méi)有完整的基因結(jié)構(gòu)B．探針通常用熒光或者放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記C．不能用PCR技術(shù)從該文庫(kù)篩選出目的基因D．該基因文庫(kù)還可能存在呼吸酶的相關(guān)基因解析：選C由于cDNA文庫(kù)是以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，所以形成的cDNA中只包含基因結(jié)構(gòu)中編碼區(qū)的部分序列，即該文庫(kù)保存的人類基因沒(méi)有完整的基因結(jié)構(gòu)，A正確；探針是可以與被檢測(cè)的目的基因序列進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的帶標(biāo)記的單鏈DNA片段，標(biāo)記可以是熒光或者放射性同位素，B正確；凡是在胰島B細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的基因，都可以用PCR技術(shù)從該文庫(kù)篩選出目的基因，C錯(cuò)誤；由于呼吸酶基因在胰島B細(xì)胞內(nèi)能夠表達(dá)，所以該基因文庫(kù)還可能存在呼吸酶的相關(guān)基因，D正確。7．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個(gè)基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽(引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體)基因連接，構(gòu)建多基因表達(dá)載體(載體中部分序列如圖所示)，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑，提高了水稻的產(chǎn)量。下列敘述正確的是()A．可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量B．四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)都以DNA的同一條單鏈為模板C．應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞D．四個(gè)基因都在水稻葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄翻譯解析：選A可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量，雜交帶相對(duì)量越多，表明目的基因翻譯成的蛋白質(zhì)含量越高，A正確；由題圖可知，在同一個(gè)TDNA中OsGLO1啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的方向與其他三個(gè)基因的不同，四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)并不都以DNA的同一條單鏈為模板，B錯(cuò)誤；卡那霉素抗性基因不在TDNA中，而潮霉素抗性基因在TDNA中，應(yīng)選用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞，C錯(cuò)誤；由題意知，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，可使目的基因插入到水稻細(xì)胞中染色體的DNA上，所以與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因連接的四個(gè)基因，在水稻細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，在核糖體中進(jìn)行翻譯，D錯(cuò)誤。8．矮牽?；ò曜仙纳顪\由花青素的含量高低決定，花青素由查耳酮合酶(CHS)催化合成。為獲得紫色更深的矮牽牛，科研人員將CHS基因?qū)胍吧妥匣ò珷颗Ｈ~肉細(xì)胞中，得到的轉(zhuǎn)基因植株花色反而出現(xiàn)了淺紫色。下列敘述正確的是()A．可以從矮牽牛的幼嫩葉肉細(xì)胞中用逆轉(zhuǎn)錄酶和PCR技術(shù)相結(jié)合，獲取CHS基因B．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法都可以將獲得的CHS基因直接導(dǎo)入葉肉細(xì)胞中完成轉(zhuǎn)化過(guò)程C．可以用同位素標(biāo)記的CHS基因檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入葉肉細(xì)胞D．轉(zhuǎn)基因植株花色為淺紫色的原因可能是CHS基因與載體反向連接，轉(zhuǎn)錄出的mRNA與內(nèi)源基因的mRNA互補(bǔ)解析：選DCHS基因只在花瓣細(xì)胞中表達(dá)，因此可以從矮牽牛的花瓣細(xì)胞中用逆轉(zhuǎn)錄酶和PCR技術(shù)相結(jié)合，獲取CHS基因，A錯(cuò)誤；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前都需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體，因此農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法都不可以將獲得的CHS基因直接導(dǎo)入葉肉細(xì)胞中完成轉(zhuǎn)化過(guò)程，B錯(cuò)誤；葉肉細(xì)胞本身就含有CHS基因，因此不可以用同位素標(biāo)記的CHS基因檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入葉肉細(xì)胞，C錯(cuò)誤。9．科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Notch基因編碼一類高度保守的細(xì)胞表面受體，通過(guò)與其相應(yīng)的配體結(jié)合調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡等。為了研究Notch基因表達(dá)產(chǎn)物的功能，科學(xué)家構(gòu)建含Notch基因的重組質(zhì)粒，并在大腸桿菌中表達(dá)。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．可以用逆轉(zhuǎn)錄的方法和PCR技術(shù)獲得Notch基因B．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，高溫代替了解旋酶的功能C．可通過(guò)核酸分子雜交的方法判斷導(dǎo)入的基因是否成功表達(dá)D．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心解析：選C獲取目的基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR擴(kuò)增、人工合成等，故可以用逆轉(zhuǎn)錄的方法和PCR技術(shù)獲得Notch基因，A正確；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，高溫變性可以將DNA雙鏈打開，代替解旋酶的功能，B正確；判斷導(dǎo)入的基因是否成功表達(dá)，需要用抗原—抗體雜交技術(shù)，C錯(cuò)誤。10．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可利用堿性磷酸單酯酶催化載體的5′P變成5′OH，如圖所示。將經(jīng)過(guò)該酶處理的載體與外源DNA連接時(shí)，由于5′OH與3′OH不能連接而形成切口(nick)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會(huì)發(fā)生自身環(huán)化B．外源DNA也必須用堿性磷酸單酯酶處理C．T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端D．重組DNA經(jīng)過(guò)2次復(fù)制可得到不含nick的子代DNA解析：選B將經(jīng)過(guò)該酶處理的載體與外源DNA連接時(shí)，由于5′OH與3′OH不能連接而形成切口(nick)，因此經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會(huì)發(fā)生自身環(huán)化，A正確；外源DNA不能用堿性磷酸單酯酶處理，如用堿性磷酸單酯酶處理，載體與外源DNA不能連接形成重組DNA，B錯(cuò)誤；T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端，C正確；DNA是半保留復(fù)制，重組DNA經(jīng)過(guò)2次復(fù)制，可得到2個(gè)不含nick的子代DNA，D正確。11．B基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞(2n)和精子(n)中正常表達(dá)，在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下圖實(shí)驗(yàn)(Luc基因表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光，融合基因表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．由于DNA聚合酶不能合成導(dǎo)致B基因在水稻卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄B．過(guò)程①中T-DNA以雙鏈形式整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上C．過(guò)程②轉(zhuǎn)化篩選水稻愈傷組織時(shí)，需在培養(yǎng)基中加入潮霉素D．可通過(guò)檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光來(lái)鑒定B基因是否表達(dá)解析：選A轉(zhuǎn)錄過(guò)程不需要DNA聚合酶，需要RNA聚合酶，A錯(cuò)誤；由圖可知，過(guò)程①中T-DNA以雙鏈形式整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，B正確；由圖可知，T-DNA上含有潮霉素抗性基因，因此過(guò)程②轉(zhuǎn)化篩選水稻愈傷組織時(shí)，需在培養(yǎng)基中加入潮霉素，C正確；由圖可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因，因此可通過(guò)檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光來(lái)鑒定B基因是否表達(dá)，D正確。12．(2022·湖南高考)水蛭是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是________，物質(zhì)b是________。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是__________________。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有____________________、____________________和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是_________________________________________________________________。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測(cè)兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的__________(填“種類”或“含量”)有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路__________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)據(jù)題圖分析可知，物質(zhì)a是氨基酸序列(多肽鏈)，物質(zhì)b是mRNA。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是密碼子的簡(jiǎn)并性，即一種氨基酸可能有幾種密碼子。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有從基因文庫(kù)中獲取目的基因、通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是DNA雙鏈復(fù)制。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，據(jù)圖可知，水解產(chǎn)物中的肽含量隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)均上升，且差別不大；而抗凝血活性有差異，經(jīng)酶甲處理后，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，抗凝血活性先上升后相對(duì)穩(wěn)定，經(jīng)酶乙處理后，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，抗凝血活性先上升后下降，且酶甲處理后的酶解產(chǎn)物的抗凝血活性最終高于經(jīng)酶乙處理后的酶解產(chǎn)物的抗凝血活性，差異明顯，據(jù)此推測(cè)兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的種類有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶解時(shí)間和酶的種類不同，導(dǎo)致水蛭蛋白空間結(jié)構(gòu)有不同程度破壞。(4)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路見(jiàn)答案。答案：(1)氨基酸序列(多肽鏈)mRNA密碼子的簡(jiǎn)并性(2)從基因文庫(kù)中獲取目的基因通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成DNA雙鏈復(fù)制(3)種類提取的水蛭蛋白的酶解時(shí)間和處理的酶的種類不同，導(dǎo)致水蛭蛋白空間結(jié)構(gòu)有不同程度破壞(4)取3支試管，分別加入等量的蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一只動(dòng)物(如家兔)的血液，立即將等量的血液加入1、2、3號(hào)三支試管中，靜置相同時(shí)間，統(tǒng)計(jì)三支試管中血液凝固情況13．幽門螺桿菌是一種很容易傳染的細(xì)菌，尤其是家庭內(nèi)部成員之間，發(fā)生交叉感染的概率很高。幽門螺桿菌感染與胃炎、消化道潰瘍、胃癌等主要上消化道疾病密切相關(guān)。某高校研發(fā)的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，其有效成分是該菌表面的一種蛋白質(zhì)。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)可作為________，刺激人體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相關(guān)生理反應(yīng)。(2)在疫苗的制備過(guò)程中，可通過(guò)細(xì)菌表面蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)出目的基因的______________序列，人工合成該目的基因，再利用__________技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。(3)基因工程的核心步驟是________________的構(gòu)建，該過(guò)程構(gòu)建的產(chǎn)物中除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子和____________。(4)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持并表達(dá)的過(guò)程，稱為________。利用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)該疫苗時(shí)，需用____________技術(shù)將目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵中，再利用胚胎工程將受精卵培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，若該轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞沒(méi)有分泌出目標(biāo)蛋白質(zhì)，其原因可能是_______________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。解析：(1)細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)可作為抗原，刺激人體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相關(guān)特異性免疫。(2)在疫苗的制備過(guò)程中，可通過(guò)細(xì)菌表面蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)出目的基因的脫氧核苷酸序列，人工合成該目的基因，再利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。(3)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，必須含有目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因。(4)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持并表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。利用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)該疫苗時(shí)，需用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵中，再利用胚胎工程將受精卵培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，若該轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞沒(méi)有分泌出目標(biāo)蛋白質(zhì)，其原因可能是目的基因未導(dǎo)入受體細(xì)胞、目的基因不能在轉(zhuǎn)基因生物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。答案：(1)抗原(2)脫氧核苷酸PCR(3)基因表達(dá)載體標(biāo)記基因(4)轉(zhuǎn)化顯微注射目的基因未導(dǎo)入受體細(xì)胞、目的基因不能在轉(zhuǎn)基因生物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)14．長(zhǎng)期高血糖可引發(fā)血管細(xì)胞衰老。科研人員為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細(xì)胞衰老中的作用，以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因?qū)胙芗?xì)胞，實(shí)現(xiàn)S蛋白在血管細(xì)胞中的大量表達(dá)。(1)腺病毒的遺傳物質(zhì)為DNA，其復(fù)制需要E1、E2、E3基因共同完成。為將S基因?qū)胂俨《荆蒲腥藛T首先構(gòu)建了含S基因的重組質(zhì)粒，如圖1所示。在構(gòu)建含S基因的重組質(zhì)粒時(shí)，通過(guò)________________________的方法可鑒定重組質(zhì)粒是否插入了S基因。將圖1中含S基因的重組質(zhì)粒用__________酶切割后，獲得改造后的腺病毒DNA；將其導(dǎo)入A細(xì)胞(A細(xì)胞含有E3基因，可表達(dá)E3蛋白)，如圖2所示。腺病毒DNA在A細(xì)胞內(nèi)能夠____________________________________________，從而產(chǎn)生大量重組腺病毒，腺病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后不整合到宿主細(xì)胞染色體上。(2)綜合上述信息，從生物安全性角度分析重組腺病毒載體的優(yōu)點(diǎn)：________________________________________________________________________________________________________________________________________________(寫出2點(diǎn))。(3)用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細(xì)胞，