.頁眉.頁腳..轉(zhuǎn)基因蔬菜研究現(xiàn)狀及展望摘要：就蔬菜轉(zhuǎn)基因技術(shù)在抗病(毒)、抗蟲、抗除草劑和抗逆性育種以及雄性不育和提高耐貯性、提高產(chǎn)量、品質(zhì)改良等方面的研究現(xiàn)狀進行了綜述，并展望轉(zhuǎn)基因技術(shù)在中國蔬菜上將重點向口服疫苗、抗鹽堿、抗真菌細菌、品質(zhì)改良等方向發(fā)展。關(guān)鍵詞：蔬菜；轉(zhuǎn)基因；研究進展；展望Abstract:Thearticlesummarizestheapplicationoftransgenictechnologyinthevegetablebreeding,includingresistancetopests,resistancetoherbicide,resistancetostress,malesterility,improvementofthestorableability,yieldandquality.Meanwhile,thebrilliantprospectoftransgenictechnologyinchinavegetablewilldevelopeinorallythevaccine,antiissaltalkaloid,anti-directionandsoonfungusbacterium,improvingthequalityofdirection.Keywords:Vegetable,Transgenictechnique,Researchprogress,Forecast自1983年首例轉(zhuǎn)基因煙草問世以來，至今人們已獲得了120余種轉(zhuǎn)基因植物，其中蔬菜占了很大比例，包括番茄、甘藍、黃瓜、茄子、菠菜、生菜、豌豆、蘆筍、辣椒、西葫蘆、馬鈴薯、洋蔥、石刁柏、芹菜和胡蘿卜等。世界上第一個商業(yè)化的轉(zhuǎn)基因植物品種就是轉(zhuǎn)基因蔬菜，也就是1994年美國Calgene公司推出的轉(zhuǎn)基因耐貯番茄品種FlavrSavr[1]。目前，國外已經(jīng)批準上市的轉(zhuǎn)基因蔬菜有延熟番茄、抗甲蟲馬鈴薯、抗病毒病的南瓜和西葫蘆等[2]。我國也于1996年批準了第一個轉(zhuǎn)基因延熟番茄商品化[3]，后來還有北京大學的轉(zhuǎn)基因抗黃瓜花葉病毒（CMV）番茄“8805R”和甜椒“雙豐R”也被批準在遼寧省進行商業(yè)化生產(chǎn)[4]。我國轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應用起步比較晚，但這幾年隨著政府政策的導向和廣大研究人員的共同努力，我國的蔬菜轉(zhuǎn)基因呈現(xiàn)出蓬勃生機。到目前為止已進行轉(zhuǎn)基因研究的蔬菜有番茄、茄子、辣椒、馬鈴薯、黃瓜、南瓜、西瓜、甜瓜、西葫蘆、胡蘿卜、甘藍、花椰菜、大白菜、生菜、菠菜、茴香、豌豆、刁柏、芥菜、洋蔥、小白菜等[5]。獲得轉(zhuǎn)基因植株的蔬菜有馬鈴薯、胡蘿卜、芹菜、菠菜、生菜、甘藍、花椰菜、大白菜、黃瓜、西葫蘆、豇豆、茄子、辣椒、石刁柏等，所改良的性狀包括抗蟲、抗病、抗除草劑、延熟保鮮及其它品質(zhì)[6]。1轉(zhuǎn)基因蔬菜的研究現(xiàn)狀1.1抗病蔬菜1.1.1蔬菜病毒病的防治非常困難，是轉(zhuǎn)基因抗病研究最多的一類。目前已經(jīng)從不同的植物中獲得了30多個抗病毒基因。如植物病毒的外殼蛋白(cp)[7]、部分序列的cDNA、蛋白酶等，最近又開發(fā)了針對多種病毒的抗病毒基因，如核糖體失活蛋白(RIPs)基因及雙鏈RNA特異性核酸酶基因[8]。其中使用最多的是病毒的外殼蛋白(cp)基因。該方法是通過遺傳轉(zhuǎn)化將病毒外殼蛋白編碼基因轉(zhuǎn)入受體細胞中表達。這些病毒外殼蛋白在植物細胞中的積累，能夠抑制侵染病毒的復制，從而減輕癥狀或推遲病毒發(fā)生的時間。如美國的轉(zhuǎn)基因抗病毒南瓜“FreedomII”、北大的轉(zhuǎn)基因抗黃瓜花葉病毒(CMV)的番茄“8805R”和甜椒“雙豐R”[2]以及轉(zhuǎn)基因抗蕪菁花葉病毒(TuMV)的大白菜[9]、轉(zhuǎn)基因抗西瓜花葉病毒(WMV)的西瓜[10]、轉(zhuǎn)基因雙抗煙草花葉病毒(TMV)和黃瓜花葉病毒(CMV)的辣椒[11]。1992年，中科院遺傳研究所的研究者將蕪菁花葉病毒外殼蛋白基因?qū)胗筒?獲得抗病毒轉(zhuǎn)基因油菜,攻毒實驗結(jié)果表明：轉(zhuǎn)基因油菜對蕪菁花葉病毒均表現(xiàn)出不同程度的抗性。這些結(jié)果都有力地說明了蔬菜可以通過轉(zhuǎn)化病毒外殼蛋白基因來延緩病毒病的進一步發(fā)生,用該方法改良品種具有常規(guī)育種無法比擬的優(yōu)點。目前，已獲得的抗病毒蔬菜有抗苜?；ㄈ~病毒（ALMV）番茄、抗S病毒（PVS）馬鈴薯、抗黃瓜花葉病毒（CMV）辣椒等。由此可知，轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利用，對蔬菜抗病育種的發(fā)展起到了巨大的推動作用。1.1與蔬菜作物的抗病毒基因工程相比，我國抗真菌、細菌基因工程才開始起步[12]?？梢苑纸庹婢毎诘膸锥≠|(zhì)酶、β一1，3一葡聚糖酶基因、植物抗毒素基因以及核糖體滅活蛋白基因的分離、克隆及表達的研究，將為今后蔬菜抗真菌和細菌工程以及抗病育種提供更多的選擇和更廣闊的天地。除蘭海燕等[13]和余小林等[14]分別報道將β一1，3一葡聚糖酶基因?qū)胗筒撕蛯⒖咕幕驅(qū)死苯菲贩N外，還很少見其他方面的報道。在抗細菌病方面，應用較多的是抗菌肽，利用花粉管通道法將柞蠶抗菌肽D基因?qū)敕?，獲得部分具有較強抗青枯病能力的植株[5]。1.2抗蟲蔬菜1.2.1轉(zhuǎn)Bt殺蟲晶體蛋白基因蔬菜該基因是抗蟲基因中應用最多的一種。其編碼的殺蟲晶體蛋白對鱗翅目昆蟲具有很強的毒殺能力。Bt毒蛋白基因是一種蘇云金芽孢桿菌殺蟲晶體蛋白(ICP)，通常以原毒素形式存在。當昆蟲(尤其是鱗翅目類昆蟲)取食ICP后，在昆蟲的消化道內(nèi)，原毒素被活化，轉(zhuǎn)型為毒性多肽分子，并與昆蟲腸道上皮細胞上面的特異性蛋白質(zhì)結(jié)合，之后ICP全部或部分嵌合于細胞膜中，使細胞膜產(chǎn)生一些孔道，從而導致細胞滲透平衡的破壞。伴隨著上述過程，昆蟲幼蟲將停止進食，最終導致死亡。目前,已商品化生產(chǎn)的有馬鈴薯。已進入田間試驗階段的有番茄、茄子、白菜、花椰菜。正進行研究的有：辣椒、芹菜、芥菜、萵苣、甘藍、蕪菁、胡蘿卜、豌豆、豇豆、石刁柏、黃瓜、甜瓜[5]。尤進欽等(1996)轉(zhuǎn)化青花菜、花椰菜和白菜，下一代植株殺蟲率仍高達95％以上[5]。以菜青蟲為供試對象對轉(zhuǎn)基因結(jié)球白菜進行連續(xù)離體喂養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)受試的轉(zhuǎn)基因植株對菜青蟲的生長發(fā)育有明顯的抑制作用。1.2.2轉(zhuǎn)蛋白酶抑制劑基因(PI)蔬菜蛋白酶抑制劑殺蟲譜廣，包括鱗翅目、鞘翅目和直翅目的昆蟲。目前至少有15種不同來源蛋白酶抑制劑的cDNA或基因轉(zhuǎn)入植物，大部分具有對昆蟲明顯的抗性。但可能與蛋白酶抑制劑在植物體內(nèi)的表達量和害蟲對它的適應性有關(guān)，還沒有一例進入商品化生產(chǎn)。正在研究中的有馬鈴薯、番茄、甘藍、花椰菜、小白菜、甘薯、甜椒、萵苣[5]。1.2.3轉(zhuǎn)植物凝集素基因蔬菜植物凝集素基因可用來防御蚜蟲、葉蟬等同翅目吸食性害蟲，其抗蟲原理是當植物凝集素被昆蟲取食后，凝集素在昆蟲的消化道中與腸道圍食膜上的糖蛋白結(jié)合，從而影響營養(yǎng)的吸收。在蔬菜上應用最多的是雪花蓮凝集素(GNA)基因，轉(zhuǎn)入番茄、馬鈴薯可獲得對蚜蟲、桃蚜的抗性。還有將其導入萵苣和小白菜進行的研究[5]。1.3抗除草劑蔬菜除草劑的使用可以大大減輕人工除草的勞動，但是各種除草劑同時又會不同程度地損傷蔬菜和農(nóng)作物。隨著除草劑的廣泛應用，人們越來越迫切地希望農(nóng)作物具有抵抗除草劑的能力。應用基因工程技術(shù)將除草劑抗性基因引入作物是生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)上首先獲得應用的一個領(lǐng)域。1985年Comei[15]等人首次利用基因工程技術(shù)獲得了抗除草劑的轉(zhuǎn)基因作物，此后十幾年，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，已成功地選育出許多抗不同類型除草劑的蔬菜品種。除草劑基因在植物中作用有兩種，一是消除除草劑的毒性，應用較多的是來源于潮濕鏈霉菌bar基因。它編碼的蛋白可將除草劑膦絲菌素(PPT)乙酰化使其失去毒力。目前bar基因已被轉(zhuǎn)入番茄和油菜等作物中。二是修飾除草劑作用的靶蛋白，使其不敏感或過量表達稀釋除草劑的作用。在國內(nèi)，有關(guān)蔬菜轉(zhuǎn)抗除草劑基因的報道比較少。鐘蓉等[16]于1997年報道，他們以下胚軸和子葉為轉(zhuǎn)化受體，用農(nóng)桿菌介導將溴苯腈除草劑(bar)基因?qū)肆烁仕{型油菜，獲得了抗溴苯腈植株，但子代抗性如何尚未見報道。劉博林等[6](1989)也獲得了抗均三氮苯類除草劑的大豆轉(zhuǎn)基因植株。1.4抗逆蔬菜1.4.1耐鹽蔬菜耐鹽基因有兩種，一種是能提高植物體內(nèi)滲透保護物質(zhì)的基因，如脯氨酸合成酶(proA)基因、菠菜堿脫氫酶(BADH)基因、磷酸甘露脫氫酶(mtlD)基因[6]以及膽堿脫氫酶(betA)基因。將betA基因?qū)敕芽色@得耐鹽性高于對照的植株，將草酸氧化酶基因轉(zhuǎn)入番茄可使其在鹽環(huán)境下產(chǎn)量增加[5]。另一種是平衡植物鉀鈉離子的如HALI基因，轉(zhuǎn)入番茄其耐鹽性明顯提高。另外將耐鹽植物的總DNA直接導入不耐鹽植物也可提高耐鹽性。如將紅樹的總DNA導入辣椒其耐鹽性明顯提高[5]。1.4.2耐冷蔬菜植物抗寒基因工程與其它抗性基因相比起步晚，發(fā)展慢，直到八十年代末，才陸續(xù)報道了抗寒基因工程方面的研究成果，主要有兩類，一類是鰈魚的抗凍蛋白(AFPs)和抗凍糖蛋白(AFGPs)，抗凍蛋白(AFP)是指具有降低冰點和減少冰晶生長速度的蛋白質(zhì)。在各種生物產(chǎn)生的不同抗凍蛋白質(zhì)中，被研究最多的是魚類的抗凍蛋白基因(AFPs)。另一類是昆蟲的溫衡蛋白，用于植物的抗凍基因目前主要是魚類的抗凍蛋白。除了以上兩類抗逆基因外，人們還克隆了一些與抗旱有關(guān)的基因，如繭蜜糖合成酶基因。1989年，Cutler[17]用極地魚黃鰈抗凍蛋白處理植物組織，明顯地改善了馬鈴薯的抗寒性。隨后，美國DNA植物技術(shù)公司把抗凍基因?qū)敕阎?，已培育出耐寒番茄，且番茄在收獲后的貯藏期間表現(xiàn)出良好的抗凍性，有助于提高果蔬的口感和品質(zhì)。1.4.3抗重金屬蔬菜陳淑惠等(1998)報道了利用鎘結(jié)合蛋白基因轉(zhuǎn)化青花菜的相關(guān)研究，經(jīng)鎘處理，轉(zhuǎn)基因植株葉片變黃和皺縮比對照明顯延緩，對鎘表現(xiàn)出一定抗性[18]。1.5雄性不育蔬菜在蔬菜品種的優(yōu)勢育種中，利用雄性不育系生產(chǎn)一代雜種，可省去人工去雄，降低制種的成本，提高種子的質(zhì)量。傳統(tǒng)的雄性不育系是利用品種雜交或種間雜交或栽培種與野生種雜交并經(jīng)多代選育才能獲得。利用基因工程技術(shù)獲得穩(wěn)定的雄性不育系是近年發(fā)展的新技術(shù)。1996年，中科院微生物研究所的工作者[19]，獲得雄性不育的轉(zhuǎn)基因甘藍型油菜，這種轉(zhuǎn)化植株的花瓣卷曲、花絲短小、花藥干癟，沒有花粉，表現(xiàn)為完全的雄性不育。除此之外，中山大學生物研究中心也曾報道[20]：已成功地獲得轉(zhuǎn)基因雄性不育番茄，這種番茄在開花時，不能產(chǎn)生正常的花粉粒，且一部分植株的花瓣和雄蕊在花瓣未展開時即凋萎，花器中只剩下花萼和柱頭，給柱頭授粉以后，子房正常膨大。1.6品質(zhì)改良蔬菜目前，蔬菜品質(zhì)的改良已成為蔬菜選育的主要目標，一些有價值的外源基因的導人無疑是一條有效的途徑。朱新產(chǎn)等[21]將豌豆花DNA注入小麥體中，轉(zhuǎn)基因植株的蛋白質(zhì)、氨基酸含量及蛋白質(zhì)組分和千粒重均有一定改變。許多果實的成熟脫落及衰老等生理過程是由乙烯合成直接控制的，通過對乙烯合成過程中的Acc合成酶的克隆并將該基因轉(zhuǎn)入植物中來調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的乙烯合成，從而控制果實的成熟時間，達到延遲成熟，延長保鮮期，提高耐貯性，滿足不同時期市場的需求。番茄延熟是基因工程研究較多而且比較成功的例子，我國的耐貯藏番茄“華番1號”已進入商品化生產(chǎn)。1996年陸春貴等[22]將番茄Acc合成酶cDNA轉(zhuǎn)入番茄中，使轉(zhuǎn)基因番茄果實成熟受到嚴重抑制，果實在室溫下可貯藏1個多月，其它性狀與正常番茄相近。另外通過轉(zhuǎn)基因提高含糖量的有：將大腸桿菌糖原合成酶基因(glg1)轉(zhuǎn)入馬鈴薯可降低淀粉含量30％～50％，增加可溶性糖含量80％。將番茄紅素合成酶基因經(jīng)修飾后轉(zhuǎn)入番茄，可使茄紅素得到超量表達[5]。1.7轉(zhuǎn)生物或工業(yè)用蛋白基因蔬菜20世紀90年代初，查爾斯丁安特貞提出了一個設想，即通過植物基因工程來生產(chǎn)食用疫苗。植物基因工程的發(fā)展使這一設想變?yōu)楝F(xiàn)實，現(xiàn)在的科學家們已經(jīng)能夠把外源基因?qū)胫参矬w，并使其基因產(chǎn)物在植物的食用部位表達積累，人們通過吃轉(zhuǎn)基因水果或某種食品就可以獲得抗原蛋白，從而產(chǎn)生抗體達到預防疾病的目的[23]。蔬菜作為生物反應器生產(chǎn)哺乳動物的疫苗、工業(yè)用酶或蛋白比動物或微生物具有不可比擬的開發(fā)價值和開發(fā)前景。將轉(zhuǎn)有大腸桿菌的腸毒素基因的馬鈴薯喂食小鼠，已使小鼠獲得了此毒素的抗體，此抗體即可對抗大腸桿菌的腸毒素所致的疾病，該疫苗已于1997年作為第一個口服疫苗進入臨床。正在研制的還有在番茄體內(nèi)表達抗艾滋病病毒、抗狂犬病病毒等的疫苗。目前已將乙型肝炎病毒的表面抗原基因成功地導人馬鈴薯和番茄植株，將該轉(zhuǎn)基因馬鈴薯飼喂小白鼠，可獲得對乙型肝炎的免疫能力。2.蔬菜轉(zhuǎn)基因研究展望2.1轉(zhuǎn)基因蔬菜研究中存在的主要問題及對策盡管我國轉(zhuǎn)基因蔬菜的研究和應用發(fā)展很快，在某些方面已經(jīng)取得了一定的進展，但仍然存在不少的問題。2.1.1消費者對轉(zhuǎn)基因蔬菜安全性存在擔憂轉(zhuǎn)基因蔬菜的安全性已經(jīng)成為公眾的關(guān)注焦點，并引起了消費者普遍的擔憂。其安全性表現(xiàn)在以下兩個方面：一是其作為食品的安全性，二是對生態(tài)環(huán)境的安全性。雖然人們談論的安全性問題還沒有得到充分的驗證，但必須對轉(zhuǎn)基因蔬菜的安全性引起足夠的重視。首先，應該優(yōu)先發(fā)展一些對天然食品本身存在的基因進行研究，以減輕消費者對轉(zhuǎn)基因蔬菜安全性的擔憂。其次，在轉(zhuǎn)基因蔬菜的研究、試驗、生產(chǎn)、加工、經(jīng)營和進口、出口活動等方面，各級單位要嚴格遵守國務院2001年發(fā)布的《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理條例》。再次，仍要加強管理和監(jiān)督，加大宣傳力度，使轉(zhuǎn)基因蔬菜有更加廣闊的發(fā)展前景。2.1.2轉(zhuǎn)入的目標基因活性低或不表達通過導入外源基因使蔬菜獲得新的性狀并能穩(wěn)定遺傳是蔬菜基因工程的最終目的。但目前雖然通過采用PCR擴增、DNA雜交、RNA雜交等檢測手段，證明外源基因已經(jīng)導入植株體內(nèi)，卻發(fā)現(xiàn)存在大量的轉(zhuǎn)基因植株不能正常表達目的基因的現(xiàn)象。這種基因失活的現(xiàn)象叫做基因沉默。建議國家投入更多的經(jīng)費防止基因沉默發(fā)生的研究。2.1.3食用疫苗存在的問題植物種類是需要改進的方面之一，煙草雖然便于操作，但它不能食用；馬鈴薯的轉(zhuǎn)基因技術(shù)比較成熟，但它不宜生吃；番茄是可生食的蔬菜，栽培廣、生長快，不利因素是易腐爛；種子植物的蛋白含量較高，花生、大豆、小麥等作物是今后可以考慮的操作對象。食用疫苗的安全性、有效劑量及植物食用部位的抗原含量穩(wěn)定性、服用時間等問題有待深入研究。2.2展望轉(zhuǎn)基因蔬菜今后的發(fā)展方向2.2.1口服疫苗轉(zhuǎn)基因蔬菜口服疫苗具有以下優(yōu)點：1）轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)的疫苗可用土地種植，且栽培繁殖簡便可行，而且不需要長途運送及冷藏；2）不需注射，對害怕打針吃藥者，蔬菜疫苗更是他們的福音；3）生產(chǎn)這種疫苗價格低而且成分多，而注射疫苗價格昂貴；4）用植物生產(chǎn)疫苗，幾乎沒有動物病原的污染，避免了可能的感染；而注射疫苗如果消毒不徹底，容易引起血液病毒的傳播，例如甲、乙型肝炎病毒。植物系統(tǒng)生產(chǎn)的抗原疫苗可保持天然免疫原的形式，這使得大規(guī)模生產(chǎn)抗原疫苗成為可能，口服疫苗能激發(fā)有效的免疫反應，成本低廉，便于運輸，故有很好的開發(fā)價值和開發(fā)前景。2.2我國共有鹽堿地近億公頃，黑龍江、吉林、新疆等內(nèi)陸重要糧食生產(chǎn)區(qū)的碳酸鈉鹽堿地面積較大，并呈擴大趨勢。鹽堿地的存在對植物的生存造成了很大的威脅，因此治理鹽堿地已成為我國生態(tài)環(huán)境的一個突出問題。因此，在鹽堿地上種植轉(zhuǎn)基因蔬菜，不僅可以獲得比較大的經(jīng)濟效益，而且還可以治理生態(tài)環(huán)境，是一舉兩得的好事。2.2抗病毒病蔬菜是轉(zhuǎn)基因抗病研究最多的一類，研究也較為深入，而我國抗真菌、細菌基因工程才開始起步，抗真菌方面的報道也極少，加之蔬菜真菌適應性強，病菌可潛存在種子內(nèi)外，借風、雨、水遠距離傳播，病菌殘存在土壤、有機肥、病殘株體越冬越夏，隔年再侵染。病菌存在廣泛，無處不有，空氣、土壤、水中、植物組織、種子內(nèi)外均存在并能存活，幾乎所有蔬菜均可侵染，因此加強抗真菌、細菌這方面的研究有非常高的應用價值。2.俗話說：“寧可三日無肉，不可一日無菜。”蔬菜對于人類生活的重要性是不言而喻的。加之隨著人們生活水平的日益提高，對蔬菜的品質(zhì)要求也越來越高。人們希望蔬菜里有較高含量的人體必須的一些物質(zhì)，如：糖類、蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸、鋅、鈣等，希望通過食用含有這些物質(zhì)的蔬菜就可以替代藥物所能達到的效果，這樣既有營養(yǎng)又經(jīng)濟安全。如，富含雞和魚所含的多不飽和脂肪酸水芹，這種轉(zhuǎn)基因水芹所含的多不飽和脂肪酸，能夠調(diào)節(jié)血壓和免疫反應并參與細胞信號活動，能促進大腦發(fā)育、降低成人心臟病及風濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率。轉(zhuǎn)基因蔬菜從出現(xiàn)至今時間雖然不長，但是相信隨著轉(zhuǎn)基因蔬菜商業(yè)化中問題的不斷解決，轉(zhuǎn)基因蔬菜必將為公眾所接受，而且公眾將從中受益無窮，我們也相信轉(zhuǎn)基因蔬菜會有更加廣闊的發(fā)展前景。參考文獻:[1]趙開軍.蔬菜轉(zhuǎn)基因育種.中國蔬菜，1999，(2)：4-5.[2]周北雁,李毅,陳章良.北京大學的抗病毒轉(zhuǎn)基因作物.生物技術(shù)通報，1999，(3)：42-45.[3]孟令波,車永強,李淑敏.轉(zhuǎn)基因技術(shù)在蔬菜育種中的應用.黑龍江農(nóng)業(yè)科學，2001，(5)：27-29.[4]葉志彪,李漢霞,劉勛甲.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)育成耐貯藏番茄——華番l號.中國蔬菜，1999，(1)：6-10.[5]熊先軍,楊麗梅,劉明月等.蔬菜轉(zhuǎn)基因研究進展.北方園藝，2004，(1)：4-6.[6]楊瑞環(huán),劉殿林,哈玉潔.蔬菜轉(zhuǎn)基因研究的現(xiàn)狀與展望.天津市黃瓜研究所，2001，(7)：12-15.[7]彭炳惠,王秀峰.轉(zhuǎn)基因蔬菜的現(xiàn)狀及安全性分析.長江蔬菜，2005，(6)：36-37.[8]張競秋,張麗,哈斯阿古拉.轉(zhuǎn)基因作物及其生物安全性.北方園藝，2004，(4)：80-81.[9]朱常香,宋云枝,張松.抗蕪菁花葉病毒轉(zhuǎn)基因大白菜的培育.植物病理學報，2001，31(3)：