0ICS71.400CCSG17

HS/T

74—2023工業(yè)脂肪酸及其鹽和酯的測定tiii ttDeterminatonofindusralfatytiii tt-

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-中華人民共和國海關(guān)總署 發(fā)

布HS/T74—2023前 言本文件按照

GB/T1.標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》、HS/T1—2022《海關(guān)標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國海關(guān)總署關(guān)稅征管司提出。本文件由中華人民共和國海關(guān)總署歸口。本文件起草單位:中華人民共和國南京海關(guān)、中華人民共和國上海海關(guān)、中華人民共和國廣州海關(guān)。本文件主要起草人:宋昌盛、張繼東、譚智毅、張圓星、唐亞丹、高媛、張峰、孫遜。HS/T74—2023工業(yè)脂肪酸及其鹽和酯的測定1

范圍本文件規(guī)定了工業(yè)脂肪酸、工業(yè)脂肪酸鹽和工業(yè)脂肪酸酯中脂肪酸組成的氣相色譜測定方法。本文件適用于工業(yè)脂肪酸、工業(yè)脂肪酸鹽中直鏈脂肪酸、支鏈脂肪酸的測定,也適用于工業(yè)脂肪酸甘油酯中直鏈脂肪酸、支鏈脂肪酸的測定。注:其他脂肪酸及鹽(如蓖麻油酸)、其他脂肪酸酯(如失水山梨醇脂肪酸酯)中脂肪酸組成的測定參照使用,但本文件的使用者有責(zé)任確定本文件對于其他類型脂肪酸及鹽、脂肪酸酯的適用性。本文件規(guī)定了兩種定量方法(內(nèi)標(biāo)法和面積歸一化法),在仲裁分析時(shí)采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。2

規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6283

化工產(chǎn)品中水分含量的測定 卡爾·費(fèi)休法(通用方法)GB/T6682

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T15687

動植物油脂 試樣的制備GB/T26626

動植物油脂 水分含量測定 卡爾費(fèi)休法(無吡啶)3

術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4

原理脂肪酸酯在堿性條件下皂化和甲酯化,脂肪酸或脂肪酸鹽不經(jīng)皂化直接進(jìn)行甲酯化,甲酯化方法可選擇三氟化硼法、硫酸-甲醇法或三甲基氫氧化硫(TMSH)法。生成的脂肪酸甲酯經(jīng)氣相色譜分析,采用內(nèi)標(biāo)法或面積歸一化法定量測定脂肪酸甲酯的含量。內(nèi)標(biāo)法可獲得試樣中脂肪酸甲酯含量,并可換算為對應(yīng)的脂肪酸含量。面積歸一化法僅能獲得試樣中某個脂肪酸占總脂肪酸的百分比。5

試劑和材料除非另有說明,本文件所用試劑均為分析純。125. 水:GB/T6682,二級。125. 氫氧化鈉。345. 正己烷:色譜純。345. 氯化鈉。55. 甲基叔丁基醚:純度不低于99.0%。51HS/T74—20236 8ρ75. 硫酸:密度(20)約1.4g/mL,含量95.6 8ρ75. 甲醇

:色譜純。85. 三氟化硼甲醇溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%~15%,該試劑可在冰箱內(nèi)保存2年。89/:

2 ( ( (1 ( 0 (1 9/:

2 ( ( (1 ( 0 (1 /(

5 7 ( (15.0

氫氧化鈉甲醇溶液

2%):取2g氫氧化鈉

5.2)溶解在100mL甲醇

5.7)中,混勻。5.1

飽和氯化鈉溶液:稱取360g氯化鈉

5.4)溶解于1.

L水

5.1)中,攪拌溶解,澄清備用。5.2

硫酸甲醇溶液

0.

molL):取2.

mL硫酸

5.6),用甲醇

5.7)定容至100mL。15.3

單個脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品:可根據(jù)待測樣品選擇適宜的標(biāo)準(zhǔn)品種類,常見的37種脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)1品名稱及CAS號見附錄

A。 (1(5.4

單個脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液:取出適量單個脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品

5.13)轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中 (1(正己烷

5.3)溶解并定容,分別得到不同脂肪酸甲酯的單標(biāo)溶液,貯存于-10

℃以下冰箱,有效期3個月。 C C 115.5

十一碳酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品(36H68O6, C C 11 ( 5 11( ( (5.6

十一碳酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液

5.00mg/mL): ( 5 11( ( (標(biāo)準(zhǔn)品

5.15)至燒杯中,加入甲醇

5.7)溶解,移入100mL容量瓶后用甲醇

5.7)定容,在冰箱中冷藏可保存1個月。注:根據(jù)實(shí)際樣品選擇內(nèi)標(biāo)。如果樣品中含有十一碳酸,可選擇十三碳酸甘油三酯、十九碳酸甘油三酯、或二十三碳酸甘油三酯作為內(nèi)標(biāo)。11125.7

載氣:氦氣或氮?dú)?純度不小于99.9%(體積分?jǐn)?shù))。11125.8

燃?xì)?氫氣,純度不小于99.9%(體積分?jǐn)?shù))。5.9

助燃?xì)?空氣。5.0

沸石。6

儀器設(shè)備1 56. 磨口燒瓶:0mL或100mL,1 52 (3 56.

回流冷凝器:有效長度200mm~300mm,具有與磨口燒瓶

2 (3 56. 具塞試管:

mL或10mL。4 1 5 15 1 16.4 1 5 15 1 16. 容量瓶:0mL、00mL。6716.恒溫水浴:控溫范圍40℃~100℃,控溫±16716. 電子天平:感量0.

8 F9 E6. 氣相色譜儀8 F9 E6. 氣相色譜-質(zhì)譜儀:配有電子轟擊(I)電離源。7

分析步驟17. 樣品的準(zhǔn)備1按照

GB/T15687制備樣品。2217. 脂肪酸甲酯的制備2217.. 內(nèi)標(biāo)法2

1 1稱取均勻試樣0.g(精確至0.

mg)至磨口燒瓶中,使用移液管或移液器準(zhǔn)確加入3mL十一1 1HS/T74—2023( ((((((3酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液

5.16)。向磨口燒瓶中加入4mL~6mL氫氧化鈉甲醇溶液( ((((((3石

5.20),接上回流冷凝器。在80℃±1℃水浴上回流直至油滴消失,每30s~60s緩慢搖動磨口燒瓶,以防止氫氧化鈉形成固態(tài)附著在瓶壁上。回流過程通常需要5min~10min,有些情況可能會更長。用移液管或移液器從回流冷凝器頂部加入7mL三氟化硼甲醇溶液

5.8)于沸騰的溶液里。在80℃±1℃水浴上煮沸3min,從回流冷凝器頂部加入3mL正己烷

5.3)于沸騰的溶液里。取下回流冷凝器,拿出磨口燒瓶,立即加入20mL飽和氯化鈉溶液

5.11)。塞住磨口燒瓶,劇烈振搖至少15s。繼續(xù)加入飽和氯化鈉溶液

5.11)至磨口燒瓶頸部,靜置分層。吸取上層正己烷溶液按7.

步驟進(jìn)行氣相色譜分析,內(nèi)標(biāo)法定量。222217.. 面積歸一化法222217...三氟化硼法22111 1 27.... 稱取均勻試樣0.g(精確至0.

mg)至磨口燒瓶中。22111 1 23肪酸或脂肪酸鹽從7.2.2.1.

開始進(jìn)行。32212 ( (( 47.... 向磨口燒瓶中加入4mL~6mL氫氧化鈉甲醇溶液

5.2212 ( (( 4流冷凝器。在80℃±1℃水浴上回流直至油滴消失,每30s~60s緩慢搖動磨口燒瓶,以防止氫氧化鈉形成固態(tài)附著在瓶壁上?；亓鬟^程通常需要5min~10min,有些情況可能會更長。用移液管或移液器從回流冷凝器頂部加入7mL三氟化硼甲醇溶液

5.8)于沸騰的溶液里。然后按照7.2.2.1.

步驟執(zhí)行。注:如果存在兩個以上雙鍵的脂肪酸,在回流前,迅速向磨口燒瓶中導(dǎo)入幾分鐘干燥氮?dú)鈱⒖諝馀诺簟?213 ( (7.... 向磨口燒瓶中加入7mL三氟化硼甲醇溶液

5.8),放入幾粒沸石

5.20),接上回流2213 ( (4器。然后按照7.2.2.1.

步驟執(zhí)行。42214 (((7.... 在80℃±1℃水浴上煮沸3min,從回流冷凝器頂部加入3mL正己烷

5.3)于沸騰的2214 (((液里。取下回流冷凝器,拿出磨口燒瓶,立即加入20mL飽和氯化鈉溶液

5.11)。塞住磨口燒瓶,劇烈振搖至少15s。繼續(xù)加入飽和氯化鈉溶液

5.11)至磨口燒瓶頸部,靜置分層。吸取上層正己烷溶液按32227.

步驟進(jìn)行氣相色譜分析,面積歸一化法定量。32227... 硫酸-甲醇法2221 1 17.... 稱取均勻試樣0.g(精確至0.

mg)至磨口燒瓶中,脂肪酸酯從7.2.2.2.

開始進(jìn)2221 1 13肪酸及脂肪酸鹽從7.2.2.2.

開始進(jìn)行。32222 ( (( 47.... 向磨口燒瓶中加入4mL~6mL氫氧化鈉甲醇溶液

5.2222 ( (( 4流冷凝器。在80℃±1℃水浴上回流直至油滴消失,每30s~60s緩慢搖動磨口燒瓶,以防止氫氧化鈉形成固態(tài)附著在瓶壁上?；亓鬟^程通常需要5min~10min,有些情況可能會更長。用移液管或移液器從回流冷凝器頂部加入10mL硫酸甲醇溶液

5.12)于沸騰的溶液里。然后按照7.2.2.2.

步驟執(zhí)行。2223 ( (7.... 向磨口燒瓶中加入10mL硫酸甲醇溶液

5.12),放入幾粒沸石

5.20),接上回流冷2223 ( (4然后按照7.2.2.2.

步驟執(zhí)行。42224 (((7.... 在80℃±1℃水浴上煮沸15min,從回流冷凝器頂部加入3mL正己烷

5.2224 (((液里。取下回流冷凝器,拿出磨口燒瓶,立即加入20mL飽和氯化鈉溶液

5.11)。塞住磨口燒瓶,劇烈振搖至少15s。繼續(xù)加入飽和氯化鈉溶液

5.11)至磨口燒瓶頸部,靜置分層。吸取上層正己烷溶液按3223 (7.

步驟進(jìn)行氣相色譜分析,3223 (7... 三甲基氫氧化硫

TMSH)法1稱取均勻試樣0.1g(精確至0.

mg)至具塞試管中,用移液管或移液器移取500μL甲基叔丁基13項(xiàng)目分析條件柱箱初始溫度120℃,保持1min;120℃~175℃,升溫速率10℃/min,保持10min;175℃~210℃,升溫速率5℃/min,保持5min;210℃~230℃,升溫速率5℃/min,保持10min進(jìn)樣口模式:分流;分流比:25∶1~100∶1;氣化室溫度:250℃;載氣:氦氣(或氮?dú)?色譜柱聚二氰丙基硅氧烷強(qiáng)極性固定相,柱長100m,內(nèi)徑0.25mm,膜厚0.2μm檢測器氫火焰離子化檢測器(FID);溫度:280℃;氫氣流量:40mL/min;空氣流量:450mL/min進(jìn)樣體積1.0μLHS/T74—2023(( 3醚

5.5)加入到試樣中以溶解試樣,如有必要可輕微加熱使試樣溶解。用移液管或移液器加入(( 3三甲基氫氧化硫甲醇溶液

5.9),蓋上玻璃塞猛烈振搖30s后靜置至澄清。將該澄清溶液按7.

步驟進(jìn)行氣相色譜分析,面積歸一化法定量。注:三甲基氫氧化硫(TMSH)法可能會導(dǎo)致某些不飽和脂肪酸異構(gòu)化,從而使測定結(jié)果與三氟化硼法或硫酸-甲醇法不一致。但該方法甲酯化過程簡便快速,能作為未知樣品的初篩方法。37.氣相色譜分析3317..氣相色譜操作條件31推薦的色譜柱及典型操作條件見表1,典型色譜圖見附錄B。使用的儀器不同,最佳分析條件也可能不同,能達(dá)到同等分離性能的其他毛細(xì)管或填充色譜柱及操作條件也可使用。表1

推薦的色譜柱及典型操作條件327表1

推薦的色譜柱及典型操作條件32(在表1色譜操作條件下,取單個脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液

5.14)分別注入氣相色譜儀,以保留時(shí)間對色(譜峰進(jìn)行定性。也可通過氣相色譜-質(zhì)譜分析,根據(jù)各峰的質(zhì)譜圖對脂肪酸甲酯進(jìn)行定性。337.. 試樣溶液的測定332在表1色譜操作條件下,將按7.

制備的樣品溶液注入氣相色譜儀,記錄各組分的峰面積。28

結(jié)果計(jì)算與表述18. 內(nèi)標(biāo)法1118.. 試樣中脂肪酸甲酯的含量11 1X試樣中單個脂肪酸甲酯含量(

i)按公式()計(jì)算, 1X4A C11

×C C11×VC11×1.067A C11

×C C11×VC11×1.067Xi =

Aim

×100

…………(1)M FAMEi

…………(2)(00-w)

…………(3)W FAi

,dry=

W FAi∑(i

×F FAMEi

-FAi

)×100

…………(4)Yi =

Ai ×F FAMEi

-FAi0式中:Xi———試樣中脂肪酸甲酯i含量,%;Ai ———試樣中脂肪酸甲酯i的峰面積;AC11 ———試樣中加入的內(nèi)標(biāo)物十一碳酸甲酯的峰面積;0CC11 ———十一碳酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液的濃度,單位為毫克每毫升(mg/mL);0VC11 ———試樣中加入十一碳酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液的體積,單位為毫升(mL);1.067———十一碳酸甘油三酯轉(zhuǎn)化為十一碳酸甲酯的轉(zhuǎn)化系數(shù);m ———試樣的質(zhì)量,單位為毫克(mg)。12計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。128.. 試樣中脂肪酸的含量i 2W如果試樣為脂肪酸,則試樣中單個脂肪酸含量(

FA

)按公式()計(jì)算i 2WiiWFA

=Xi×

MFAii式中:iWFA

———試樣中脂肪酸i含量,%;iiXi 1.

得到的試樣中脂肪酸甲酯i含量,%;iMFA

———脂肪酸i的分子量;iMFAME

———脂肪酸甲酯i的分子量。i13計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。138.. 干燥試樣中脂肪酸的含量Wi需要獲得干燥試樣中脂肪酸含量(

FA

,dry)時(shí),先按照

GB/T6283或

GB/T26626Wi 3w(

),然后按公式() 3w1式中:iWFA

,dry

———干燥試樣中脂肪酸i含量,%;ii 2WFA ———第8.1.

條得到的試樣中脂肪酸i含量i 2w ———試樣的水分含量,%;計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。28. 面積歸一化法2218.. 面積歸一化法假定試樣的所有組分都顯示在色譜圖上,因此各峰面積的總和即代表100%的21組成。22 4 5Y8..試樣中某個脂肪酸占總脂肪酸的百分比(i)按公式22 4 5YAM FAMEM FAMEi

…………(5)

iiiFFAME

-FA

=

MFAiii

5HS/T74—2023Yi ———試樣中某個脂肪酸i占總脂肪酸的百分比,%;iiAi ———試樣測定液中脂肪酸甲酯i的峰面積;iiFFAME-FA

———脂肪酸甲酯i轉(zhuǎn)化成相應(yīng)脂肪酸i的系數(shù);iMFA ———脂肪酸i的分子量;iiMFAME———脂肪酸甲酯i的分子量。i計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。38. 結(jié)果報(bào)告3取重復(fù)測定兩次結(jié)果的算術(shù)平均值,結(jié)果報(bào)告至0.1%。9

精密度19. 重復(fù)性1兩種定量方法的重復(fù)性應(yīng)符合下述要求。———對于質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于5%的組分,在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果,相對偏差應(yīng)不大于3%,絕對差值不大于1%,以相對偏差大于3%或絕對差值大于1%的情況不超過5%為前提?！獙τ谫|(zhì)量分?jǐn)?shù)小于等于5%的組分,在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果,絕對差值應(yīng)不大于0.2%,以絕對差值大于0.2%的情況不超過5%為前提。29. 再現(xiàn)性2兩種定量方法的再現(xiàn)性應(yīng)符合下述要求?！獙τ谫|(zhì)量分?jǐn)?shù)大于5%的組分,在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果,相對偏差應(yīng)不大于10%,絕對差值不大于3%,以相對偏差大于10%或絕對差值大于3%的情況不超過5%為前提。———對于質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于等于5%的組分,在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果,絕對差值應(yīng)不大于0.5%,以絕對差值大于0.5%的情況不超過5%為前提。6序號脂肪酸甲酯名稱脂肪酸簡稱CAS號1丁酸甲酯C4:0623-42-72己酸甲酯C6:0106-70-73辛酸甲酯C8:0111-11-54癸酸甲酯C10:0110-42-95十一碳酸甲酯C11:01731-86-86十二碳酸甲酯C12:0111-82-07十三碳酸甲酯C13:01731-88-08十四碳酸甲酯C14:0124-10-79順-9-十四碳一烯酸甲酯C14:156219-06-810十五碳酸甲酯C15:07132-64-111順-10-十五碳一烯酸甲酯C15:190176-52-612十六碳酸甲酯C16:0112-39-013順-9-十六碳一烯酸甲酯C16:11120-25-814十七碳酸甲酯C17:01731-92-615順-10-十七碳一烯酸甲酯C17:175190-82-816十八碳酸甲酯C18:0112-61-817反-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9t1937-62-818順-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9c112-62-919反,反-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6t2566-97-420順,順-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6c112-63-021二十碳酸甲酯C20:01120-28-122順,順,順-6,9,12-十八碳三烯酸甲酯C18:3n616326-32-223順,順