實驗三、環(huán)境因素對微生物的影響

一、實驗目的1.了解溫度對微生物生長的影響；2.了解抗生素（青霉素、氨芐青霉素等）的抗菌范圍，學習抗菌譜試驗的基本方法。3.了解消毒劑（碘酒或酒精）對微生物分布的影響。4.了解紫外線殺菌對微生物的作用特點二、實驗原理1.

溫度:影響微生物生長與存活的最重要因素。自然界的微生物可根據(jù)對溫度的適應性分為低溫型、中溫型和高溫型。但不管哪一種溫度型的微生物，都有生長溫度范圍。分為最高、最適和最低生長溫度。在最適宜溫度里生長良好：超過最高溫度細胞死亡；低于最低溫度細胞被抑制或死亡。2.

抗生素對微生物生長的影響：抗生素是某些微生物在生長代謝過程中產(chǎn)生的能抑制或殺死其它微生物的次生代謝產(chǎn)物。每種抗生素都有它固定的抗菌范圍和抗菌譜。例如青霉素只對革蘭氏陽性菌具有抗菌作用；多粘菌素只對革蘭氏陰性菌有作用，這類抗生素稱為窄譜抗生素；另一些抗生素對多種細菌具有作用，例如四環(huán)素、土霉素對許多革蘭氏陽性菌和陰性菌都有作用稱為廣譜抗生素。二、實驗原理比如氨芐青霉素，對革蘭氏陽性球菌、變形桿菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、大腸桿菌及流感桿菌等都有很好的抗菌效果。二、實驗原理3.化學消毒劑對微生物分布的影響人體皮膚分布著一定種類與數(shù)量的微生物。使用化學消毒劑對皮膚進行表面消毒是醫(yī)院里進行無菌操作常用的方法之一。二、實驗原理四、實驗步驟1.溫度對微生物生長的影響（每組）（1）菌種：大腸桿菌(白葡)、枯草芽孢桿菌。（2）培養(yǎng)基：取肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基）

5支。（3）接種：分別接種大腸桿菌(白葡)和枯草芽孢桿菌各2支試管，余下1支不接種作陰性對照。（4）加熱：取接種的大腸桿菌(白葡)和枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基各1支，于100℃作用15min后取出，冷水沖涼。5支試管放入37℃溫箱培養(yǎng)。（5）觀察：培養(yǎng)24h后觀察現(xiàn)象，并記錄。2.抗生素對微生物生長的影響（1）菌種：大腸桿菌（G－）、白色葡萄球菌或金黃色葡萄球菌（G＋）。（2）接菌用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無菌的棉簽在無菌水(液體培養(yǎng)基)中潤濕；用濕潤的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。（2種不同的菌各做1個平板。）四、實驗步驟（3）放置藥敏片：用無菌鑷子取4種不同的抗生素藥敏片各1個，貼在平板上（每個平板放4個），輕輕壓一下，倒置。

注意：在貼濾紙條時不要在培養(yǎng)基上拖動濾紙片，避免抗生素溶液在培養(yǎng)基中擴散時分布不均勻。（4）培養(yǎng)：平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察、記錄實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟3.化學消毒劑對微生物分布的影響（1）分區(qū):將1個營養(yǎng)瓊脂平板分為4個區(qū)域；

（2人1個平板，每人2個區(qū)）（2）接種：2名同學直接用手指在平板的2個區(qū)域劃之字形，待用碘酒/酒精棉球消毒后，稍候片刻，再在另外2個區(qū)域劃之字形；

（3）培養(yǎng)：平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察、記錄實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟甲乙4.紫外線的消毒作用（穿透作用）（1）菌種：大腸桿菌、白色葡萄球菌（2）接菌：用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無菌的棉簽在無菌水(液體培養(yǎng)基)中潤濕；用濕潤的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。

【可做1種菌，也可做2種（中間劃線）】。四、實驗步驟4.紫外線的消毒作用（穿透作用）（4）照射：用平皿蓋半遮蓋平板，置于紫外燈照射15min。（5）培養(yǎng)：蓋上平皿蓋，于37℃培養(yǎng)24h后觀察實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟思考題