2024屆北京市首師附高二生物第二學(xué)期期末質(zhì)量跟蹤監(jiān)視試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)胚胎發(fā)育的說法中，不正確的是A．胚胎從透明帶內(nèi)伸展出來的過程稱為孵化B．卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加C．胚胎發(fā)育到囊胚期時(shí)出現(xiàn)囊胚腔D．原腸胚時(shí)期胚胎進(jìn)一步分化出內(nèi)、外胚層2．生物學(xué)實(shí)驗(yàn)需要使用某些試劑處理，其中正確的是()實(shí)驗(yàn)內(nèi)容試劑處理目的①觀察花生子葉細(xì)胞的脂肪顆粒體積分?jǐn)?shù)50%酒精溶液脂肪顆粒相互分散，便于觀察②觀察人口腔上皮細(xì)胞中的DNA和RNA分布質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%鹽酸改變細(xì)胞膜的通透性，便于染色③觀察人口腔上皮細(xì)胞中的線粒體生理鹽水維持細(xì)胞活性④探究酵母菌細(xì)胞呼吸方式質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%NaOH溶液堿性環(huán)境，便于酵母菌細(xì)胞呼吸⑤觀察洋蔥根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸、體積分?jǐn)?shù)95%酒精洗去多余醋酸洋紅溶液，便于觀察A．①③⑤ B．②④⑤ C．②③ D．③④3．下列關(guān)于一些常見原核生物的說法正確的是A．細(xì)菌都是營寄生或腐生生活的異養(yǎng)生物B．采用射線處理的方法可誘發(fā)肺炎雙球菌的基因突變和染色體變異C．飲用水中的大腸桿菌可以與外界進(jìn)行物質(zhì)交換D．藍(lán)藻的細(xì)胞分裂過程需要中心體的參與4．在下列選項(xiàng)中，不涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是A．利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株 B．利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株C．利用細(xì)胞工程培育“番茄-馬鈴薯”雜種植株 D．用秋水仙素處理植物幼苗，得到多倍體植株5．細(xì)胞中的很多生理過程在細(xì)胞器中完成。下列關(guān)于細(xì)胞器結(jié)構(gòu)與功能的敘述中，正確的是A．葉綠體和線粒體均通過內(nèi)膜折疊成嵴擴(kuò)大生物膜面積B．中心體可見于某些植物細(xì)胞，與細(xì)胞的有絲分裂有關(guān)C．胰島素的加工和運(yùn)輸過程需要核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等細(xì)胞器參與D．溶酶體中含有大量的呼吸酶，所以可以消化多種衰老的細(xì)胞器6．下列有關(guān)玫瑰精油、橘皮精油兩種植物芳香油提取方法的敘述，正確的是

（）A．在橘皮精油提取過程中石灰水的作用是漂去橘皮顏色B．兩種提取過程中都加入了Na2SO4，并且所起作用都相同C．玫瑰精油提取時(shí)分液漏斗的作用是分離油層和水層D．所用的兩種原料玫瑰花瓣和橘皮均需干燥去水處理7．某甲蟲的有角和無角受等位基因T-t控制，而牛的有角和無角受等位基因F-f控制，詳細(xì)見下表所示。下列相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是物種基因型表現(xiàn)型有角無角某甲蟲雄性TT、Tttt雌性——TT、Tt、tt牛雄性FF、Ffff雌性FFFf、ffA．基因型均為Tt的雄甲蟲和雌甲蟲交配，子代中有角與無角的比值為3:5B．如子代中有角均為雄性、無角均為雌性，則兩只親本甲蟲的基因型為TT×TTC．兩只有角牛交配，子代中出現(xiàn)的無角牛應(yīng)為雌性，有角?？赡転樾坌曰虼菩訢．無角雄牛與有角雌牛交配，子代中無角個(gè)體均為雌性，有角個(gè)體均為雄性8．（10分）關(guān)于如圖所示生物或細(xì)胞的敘述，正確的是()A．a(chǎn)、b、c、d的遺傳信息均儲存在DNA中B．a(chǎn)、b、c、d均能進(jìn)行有氧呼吸C．b、d均可在葉綠體中合成有機(jī)物D．b、c、d均有纖維素和果膠構(gòu)成的細(xì)胞壁二、非選擇題9．（10分）前年冬季，我國北方再次爆發(fā)流感。專家指出，接種流感病毒疫苗仍是預(yù)防的有效措施。流感病毒為RNA病毒，M基因編碼流感病毒表面抗原（M蛋白）。請回答下列問題：（1）由病毒的RNA通過逆轉(zhuǎn)錄獲得的病毒DNA，若要通過PCR技術(shù)擴(kuò)增M基因，關(guān)鍵是設(shè)計(jì)M基因?qū)?yīng)的________。（2）構(gòu)建M基因表達(dá)載體所用的工具酶是________。（3）為保證M基因的表達(dá)，重組載體上應(yīng)含有特定的________（選填“復(fù)制原點(diǎn)”“啟動(dòng)子”或“標(biāo)記基因”），以便于被受體細(xì)胞的RNA聚合酶所識別，催化轉(zhuǎn)錄過程。（4）若要將M基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，以大量生產(chǎn)疫苗，通常先用鈣離子處理大腸桿菌。其目的是________。（5）新型疫苗——“DNA疫苗”是將含M基因的重組表達(dá)載體直接導(dǎo)入人體內(nèi)，在人體細(xì)胞內(nèi)通過M基因的表達(dá)產(chǎn)生M蛋白，刺激機(jī)體通過免疫過程，產(chǎn)生________，提高機(jī)體的免疫能力。10．（14分）下圖表示在25℃時(shí)，a.b兩種植物隨著光照強(qiáng)度的變化CO2吸收量或CO2釋放量的變化曲線圖?；卮鹣铝袉栴}。（1）比較a.b植物，其中細(xì)胞呼吸較強(qiáng)的是_____植物，當(dāng)光照強(qiáng)度在達(dá)到Z點(diǎn)之前，限制a植物光合作用的因素主要是_____。（2）當(dāng)平均光照強(qiáng)度在X和Y之間(不包括X、Y)，假設(shè)白天和黑夜的時(shí)間各為12h，a植物一晝夜中有機(jī)物積累量的變化是________(減少或增加)。b植物一晝夜中有機(jī)物積累量的變化是________(減少或增加)。（3）已知a植物光合作用和細(xì)胞呼吸的最適溫度分別是25℃和30℃，若將溫度提高到30℃(其它條件不變)，理論上圖中P點(diǎn)的位置變化是___________________，M點(diǎn)的位置變化是___________________。11．（14分）請分析回答與微生物有關(guān)的問題：（1）微生物接種方法很多，最常用的是平板劃線法和_________。平板劃線時(shí)，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的操作時(shí)，總是從上一次的末端開始，這一樣做的目的是_________________。（2）要從土壤中分離純化產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌時(shí)，常常需要進(jìn)行選擇培養(yǎng)，目的是__________，然后再接種并培養(yǎng)，接種時(shí)挑取了菌液在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中1塊平板的各劃線區(qū)均未見菌落生長，最可能的原因是_________________。（3）為了統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，在細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1ml，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191，則每克士壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量___________個(gè)。對菌落數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)日穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣做的原因是_______________________________。（4）為長期保存純化的優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用__________________的方法。12．許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ′基因（內(nèi)含EcoRⅠ的酶切位點(diǎn)），其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X—gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。基因工程中常利用該原理從導(dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過程如下圖所示。請據(jù)圖回答：（1）獲取目的基因時(shí)，可以從____________中直接提取。（2）限制酶EcoRⅠ的識別序列和酶切位點(diǎn)是-G↓AATTC-，SmaⅠ的識別序列和酶切位點(diǎn)是-CCC↓GGG-。圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相成的末端，連接的末端序列是______。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，除了目的基因外，還必須有_________和_________、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。（4）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用____________處理，使其成為____________細(xì)胞。（5）菌落①②③中顏色為白色的是____________（填序號），原因是_______________。（6）菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的分子檢測辦法是____________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解題分析】

早期胚胎發(fā)育主要包括：受精卵→4細(xì)胞→8細(xì)胞→桑椹胚→囊胚→原腸胚等?！绢}目詳解】A、囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，胚胎從透明帶內(nèi)伸展出來的過程稱為孵化，A正確；B、卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目增多，有機(jī)物總量會減少，B錯(cuò)誤；C、胚胎發(fā)育到囊胚期時(shí)出現(xiàn)囊胚腔，囊胚期還具有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層等結(jié)構(gòu)，C正確；D、原腸胚時(shí)期胚胎進(jìn)一步分化出內(nèi)、外胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔，D正確。故選B。2、C【解題分析】觀察脂肪用50%的酒精是洗去浮色，①錯(cuò)誤，A錯(cuò)誤。觀察口腔上皮細(xì)胞中的DNA和RNA用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸，有改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色體劑進(jìn)入細(xì)胞，讓DNA和蛋白質(zhì)分開，有利于DNA染色，②正確。觀察線粒體是用健那綠需要細(xì)胞有活性，所以人口腔上皮細(xì)胞需要放在生理鹽水中，③正確。探究酵母菌細(xì)胞呼吸方式，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的NaOH溶液是為了吸收空氣中的二氧化碳，④錯(cuò)誤，B、D錯(cuò)誤。觀察有絲分裂用鹽酸和酒精是為了使細(xì)胞分離開，⑤錯(cuò)誤，C正確?！究键c(diǎn)定位】本題考查生物學(xué)實(shí)驗(yàn)相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的識記理解掌握程度。3、C【解題分析】

原核生物沒有核膜包被的細(xì)胞核，除核糖體以外，沒有眾多細(xì)胞器，也不具生物膜系統(tǒng)，沒有有絲分裂?！绢}目詳解】A硝化細(xì)菌可以進(jìn)行化能合成作用，屬于自養(yǎng)型生物，A錯(cuò)誤；B肺炎雙球菌是原核生物，細(xì)胞中沒有染色體，不可能發(fā)生染色體變異，B錯(cuò)誤；C飲用水中的大腸桿菌是單細(xì)胞原核生物，可以與水進(jìn)行物質(zhì)交換，C正確；D藍(lán)藻是原核生物，細(xì)胞中沒有中心體，D錯(cuò)誤；故選：C。4、D【解題分析】

植物組織培養(yǎng)過程為：離體的組織器官首先脫分化，形成愈傷組織，愈傷組織進(jìn)行再分化形成胚狀體，胚狀體再進(jìn)行根芽的分化形成完整植株。該技術(shù)利用了植物細(xì)胞的全能性，一般可以在植物基因工程、單倍體育種、植物體細(xì)胞雜交等過程中運(yùn)用?！绢}目詳解】A、花藥離體培養(yǎng)是高度分化的細(xì)胞形成完整植株的過程，利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，A不符合題意；B、基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株的過程中，需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培養(yǎng)為完整植株，B不符合題意；C、細(xì)胞工程培育“番茄--馬鈴薯”雜種植株的過程中，需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)為完整植株，C不符合題意；D、秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗得到多倍體植株是利用了秋水仙素抑制紡錘體形成的原理，沒有利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，D符合題意。故選D。5、B【解題分析】試題分析：葉綠體是通過類囊體增加膜面積，線粒體是通過內(nèi)膜折疊成嵴增大膜面積，故A錯(cuò)誤。中心體可以存在低等植物中，與細(xì)胞的有絲分裂有關(guān)，故B正確。胰島素的合成是在核糖體上，加工和運(yùn)輸需要通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，全程需要線粒體供能，故C錯(cuò)誤。溶酶體內(nèi)含有大量的水解酶，所以可以消化多種衰老的細(xì)胞器，故D錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的理解掌握和把握知識點(diǎn)間內(nèi)在聯(lián)系綜合運(yùn)用能力。6、C【解題分析】在橘皮精油提取過程中石灰水的作用是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率，A項(xiàng)錯(cuò)誤；提取橘皮精油時(shí)，加入Na2SO4的作用是使橘皮油易與水分離，提取玫瑰精油時(shí)，加入無水Na2SO4吸收水分，B項(xiàng)錯(cuò)誤；玫瑰精油提取時(shí)通過分液漏斗分離油層和水層，C項(xiàng)正確；玫瑰精油易揮發(fā)，提取時(shí)應(yīng)選擇鮮玫瑰花為原料，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！绢}目點(diǎn)撥】植物有效成分的提取的三種常用方法比較提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法實(shí)驗(yàn)原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲得芳香油方法步驟①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點(diǎn)簡單易行，便于分離生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限性水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難，出油率相對較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會影響芳香油的質(zhì)量7、B【解題分析】基因型均為Tt的雄甲蟲和雌甲蟲交配，后代TT：Tt：tt=1:2:1，由于雄性全部表現(xiàn)為無角，雌性有角：無角=3:1，所以子代中有角與無角的比值為3:5，A正確；如甲蟲子代中有角均為雄性、無角均為雌性，則兩只親本甲蟲的基因型為TT×TT或者TT×Tt，B錯(cuò)誤；兩只有角牛交配，雌牛為FF，雄牛為FF或Ff，子代中出現(xiàn)的無角牛應(yīng)為雄性，有角?？赡転樾坌曰虼菩?，C正確；無角雄牛（ff）與有角雌牛（FF）交配，子代中無角個(gè)體均為雌性，有角個(gè)體均為雄性，D正確。【題目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是仔細(xì)辨析表格中甲蟲、牛的雌性和雄性對應(yīng)的基因型，根據(jù)親子代之間的表現(xiàn)型、基因型分析答題。8、A【解題分析】

原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同。分析題圖：a為噬菌體，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，屬于病毒；b為藍(lán)藻，沒有成形的細(xì)胞核，屬于原核生物；c為酵母菌，含有成形的細(xì)胞核，屬于真核生物；d為葉肉細(xì)胞，含有成形的細(xì)胞核，屬于真核細(xì)胞?！绢}目詳解】A、a、b、c、d的遺傳物質(zhì)都是DNA，因此它們均在DNA中儲存遺傳信息，A正確；B、a為病毒，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能進(jìn)行需氧呼吸，B錯(cuò)誤；C、b為藍(lán)藻，屬于原核生物，不含葉綠體，C錯(cuò)誤；D、b為藍(lán)藻，屬于原核生物，其細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，D錯(cuò)誤。故選A。二、非選擇題9、引物限制酶和DNA連接酶啟動(dòng)子使大腸桿菌處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)（感受態(tài)）抗體和記憶細(xì)胞【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）PCR最關(guān)鍵的是需要設(shè)計(jì)M基因?qū)?yīng)的引物。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體所用的工具酶是限制酶和DNA連接酶。（3）重組載體被受體細(xì)胞的RNA聚合酶所識別，催化轉(zhuǎn)錄過程需要重組載體上有啟動(dòng)子。（4）將目的基因?qū)氪竽c桿菌時(shí)，一般要先用鈣離子處理大腸桿菌，以使大腸桿菌處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)（感受態(tài)）。（5）M蛋白作為抗原可以刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞，提高機(jī)體的免疫能力。【題目點(diǎn)撥】本題考查基因工程的基本過程，考生需要識記基因工程的基本過程進(jìn)行解答。10、a光照強(qiáng)度減少增加P點(diǎn)右移M點(diǎn)向左下方移【解題分析】

本題主要考查影響光合作用的環(huán)境因素：1、溫度對光合作用的影響：在最適溫度下酶的活性最強(qiáng)，光合作用強(qiáng)度最大，當(dāng)溫度低于最適溫度，光合作用強(qiáng)度隨溫度的增加而加強(qiáng)，當(dāng)溫度高于最適溫度，光合作用強(qiáng)度隨溫度的增加而減弱。2、二氧化碳濃度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強(qiáng)度隨二氧化碳濃度的增加而增強(qiáng)。當(dāng)二氧化碳濃度增加到一定的值，光合作用強(qiáng)度不再增強(qiáng)。3、光照強(qiáng)度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強(qiáng)度隨光照強(qiáng)度的增加而增強(qiáng)。當(dāng)光照強(qiáng)度增加到一定的值，光合作用強(qiáng)度不再增強(qiáng)?！绢}目詳解】（1）圖中光照強(qiáng)度為0時(shí)，植物只進(jìn)行呼吸作用，圖中看出a植物的呼吸作用是2，而b植物的呼吸作用是1，所以a植物的呼吸作用強(qiáng)度高，光照強(qiáng)度在達(dá)到Z點(diǎn)之前，a植物的光合作用強(qiáng)度隨著光照強(qiáng)度的增加而增加，限制光合作用的主要因素是光照強(qiáng)度。（2）平均光照強(qiáng)度在X和Y之間時(shí)，a植物凈光合作用強(qiáng)度小于2，小于夜間該植物呼吸作用消耗，a植物一晝夜中有機(jī)物積累量的變化是減少。平均光照強(qiáng)度在X和Y之間時(shí)，b植物的凈光合作用強(qiáng)度大于1，而b植物的呼吸作用強(qiáng)度為1，所以b植物一晝夜中有機(jī)物積累量增加。（3）a曲線圖是在25℃條件下測定的，此時(shí)是光合作用的最適溫度，將溫度提高到30℃，光合速率將下降，呼吸速率上升，導(dǎo)致曲線上P點(diǎn)右移，M點(diǎn)向左下方移?！绢}目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是讀懂圖示信息，圖中光照強(qiáng)度為0時(shí)，植物只進(jìn)行呼吸作用，圖中看出a植物的呼吸作用強(qiáng)度高。光照強(qiáng)度在X和Y之間時(shí)，b植物凈光合作用大于1，大于夜間的呼吸作用消耗；a植物凈光合作用小于2，小于夜間該植物呼吸作用消耗，當(dāng)光照強(qiáng)度達(dá)到Z點(diǎn)后，光合作用強(qiáng)度不再增強(qiáng)，說明光照不再是限制因素。11、稀釋涂布平板法灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落增大產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌的濃度接種環(huán)溫度過高，產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌被殺死1.75×108防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目甘油管藏【解題分析】

單菌落分離法包含劃線分離法和稀釋涂布平板法，常用于分離獲得單菌落。劃線分離法是用接種環(huán)以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來。稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)?！绢}目詳解】（1）平板劃線法和稀釋涂布平板法是兩種微生物接種最常用的方法。平板劃線時(shí)，將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒，進(jìn)行灼燒滅菌。在第二次及以后的操作時(shí)，總是從上一次的末端開始，菌體密度越來越小，這樣可以將聚集的菌體逐步稀釋，可以獲得單菌落。（2）要從土壤中分離純化產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌時(shí)，常常需要進(jìn)行選擇培養(yǎng)，把其它雜菌淘汰掉，增大脂肪酶細(xì)菌的濃度。3塊相同平板上劃線，只有1塊平板的各劃線區(qū)均未見菌落生長，說明原菌種及培養(yǎng)基都沒問題，最可能的原因是接種環(huán)溫度過高，產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌被殺死。（3）平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)只有三個(gè)（156、178、191）是符合要求的，則每克士壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108個(gè)。菌落形成需要時(shí)間，因此對菌落數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)日穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣做可防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目。（4）甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的。長期保存純化的優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用甘油管藏的方法?！绢}目點(diǎn)撥】識記、理解微生物的分離和培養(yǎng)方法是解答本題的關(guān)鍵。12、基因文庫-TTAA啟動(dòng)子終止子Ca2+感受態(tài)③lacZ′標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不