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1鵝星狀病毒感染診斷技術規(guī)范臨床癥狀、病理變化；實驗室診斷包括樣品的采集與保存、病毒分離鑒定、反轉錄-聚合酶鏈式反應GB/T27401實驗室質(zhì)量控制規(guī)范動物NY/T541—2016獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術規(guī)范4.1環(huán)境2熟悉RT-PCR、qRT-PCR與間接EL5.1儀器設備5.2試劑與材料），5.3樣品采集與運送5.3.2組織樣品：采集疑似鵝星狀病毒感染死亡鵝的肝臟、脾臟和腎臟等組織樣品。采集病料時，用5.4樣品處理與保存5.4.1樣品應在生物安全柜中進行處理，取10g～20g樣品放入滅菌的研缽中磨碎。研磨充分的組織35.5檢測要求47.2.1.1.3臺式低溫高速離心機（最大轉速為15000r/min）。7.2.1.2.51.0%瓊脂糖凝膠，見A.2。），7.2.1.2.11陰性對照標準品，為健康5染料溶液，混勻后倒入放置在水平臺面上的凝膠盤中，膠板厚5mm左右。依據(jù)樣品數(shù)選用適宜的梳子。6mol/L。0.4μL，探針P（10μmol/L）0.8μL，模板RNA2μL，加ddH2O至20μL。反應液混勻后置于7），鵝星狀病毒間接ELISA檢測方法陰性對照OD均值=（ODA1+ODA2）/2；陽性對8.4.2.3當樣品0.17＜OD450＜0.219鵝星狀病毒感染綜合判定8A.1磷酸鹽緩沖液（PBS，0.01mol/LpH7.NaClNa2HPO4.12H2OA.3.1配制0.5mol/L乙二胺四乙酸鈉（EDTA-Na2）溶滅菌雙蒸水氫氧化鈉調(diào)pH至A.3.2配制50×TAE電泳緩沖液0.5mol/L乙二胺四乙酸鈉（EDTA-Na2）A.5包被液（0.05mol/L9Na2CO3NaHCO3A.7樣品稀釋液（封閉液）水養(yǎng)物保藏中心（CCTCC其保藏編號為CCTCCNO:V201808。該病毒根據(jù)SDPY株ORF2基因序列設計一對特異性引物，序ORF2-R：5’-TGCGGCCGCAAGCTTGTCGACGTCGACTCATGTCCGCCCTT-3’，擴增片段長度為759bp，引物在0.1mmol/LIPTG濃度下誘導4h，進行蛋白表達。經(jīng)SDS電泳后，

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