H7N9亞型禽流感病毒抗體血凝抑制試驗(yàn)檢測方法_第1頁
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文檔簡介

1GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)標(biāo)準(zhǔn)通過HA-HI試驗(yàn)，用已知的H7N9亞型禽流感病毒來檢查被檢血清中的相應(yīng)的H7N9亞型禽流感病毒抗2d)冰箱（2℃~8℃,-20℃,-80℃);5.2.1試劑級(jí)別5.2.3其它試劑凝集。具體方法為：向0.5mL血清中加入25μL雞紅細(xì)胞泥（配制方法附錄A），輕輕震蕩混勻，室溫（20℃~25℃)靜置30min，1000g離心5min，吸取上清用于檢測或保存。8微量血凝（HA）試驗(yàn)測定抗原效價(jià)和回測3123456789123456789室溫（20℃~25℃),反應(yīng)40mine)置室溫（20℃~25℃)反應(yīng)40min后觀察結(jié)果。每孔補(bǔ)加25μLPBS，再加1%雞紅細(xì)胞懸液，25μL/孔，室溫（20℃~25℃)反應(yīng)40min；c)判定血凝結(jié)果與預(yù)期結(jié)果是否相符合。2HAU、1HAU孔紅細(xì)胞應(yīng)出現(xiàn)完全凝集，0.5HAU孔4123456789室溫（20℃~25℃)反應(yīng)30min室溫（20℃~25℃)反應(yīng)40min）；e)置室溫（20℃~25℃)反應(yīng)30min；g)室溫（20℃~25℃)反應(yīng)40min。a)將V型反應(yīng)板置于45°傾斜的白色判讀板上，30s后開始判讀，b)檢查各個(gè)對(duì)照。抗原對(duì)照孔出現(xiàn)紅細(xì)胞完全凝集，且陰性血清HI效價(jià)不大于22，陽性血清HI效c)以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI效價(jià)。HI效價(jià)大于或等于25為陽性，HI5A.10.01mol/LPBS(pH7.2～7.4)經(jīng)121℃,15min高壓滅菌，保存于室溫或4℃冰箱中備用。去離子水定容至1000mL。用孔徑為0.22μm的濾膜進(jìn)

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