實(shí)驗(yàn)七、酵母菌的形態(tài)觀察

及死活細(xì)胞的鑒定實(shí)驗(yàn)的目的要求觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式；學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法；掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別。酵母菌的形態(tài)、大小、結(jié)構(gòu)酵母菌是單細(xì)胞真菌，并非系統(tǒng)演化分類的單元。酵母菌細(xì)胞的形態(tài)通常為圓形、卵圓形或橢圓形。也有特殊形態(tài)，如檸檬形、三角形、藕節(jié)狀、臘腸形，假菌絲等。比細(xì)菌的單細(xì)胞個(gè)體要大得多，一般為1-5微米×5-20微米。酵母菌無鞭毛，不能游動。酵母菌具有典型的真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)，有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、液泡、線粒體等，有的還具有微體。死活細(xì)胞鑒別原理美藍(lán)（氧化型）藍(lán)色美藍(lán)（還原型）無色酵母活細(xì)胞新陳代謝還原能力美藍(lán)對細(xì)胞是無毒的。酵母菌的繁殖方式無性繁殖有性繁殖無性孢子（節(jié)孢子、擲孢子、厚垣孢子、芽生孢子）芽殖子囊孢子裂殖酵母菌的繁殖方式有人把只進(jìn)行無性繁殖的酵母菌稱作"假酵母"，而把具有有性繁殖的酵母菌稱作"真酵母"。

酵母菌的圖片母細(xì)胞芽細(xì)胞芽痕實(shí)驗(yàn)材料菌種：釀酒酵母試劑：0.05%和0.2%的呂氏堿性美藍(lán)染色液革蘭氏染色用碘液。儀器和用具:載玻片蓋玻片濾紙顯微鏡鏡頭紙方法美藍(lán)浸片的觀察水-碘液浸片的觀察(細(xì)胞內(nèi)的貯藏物質(zhì)肝糖顆粒被染成深紅色

)注意：細(xì)胞個(gè)體大，涂片的方法有可能損傷細(xì)胞。美藍(lán)浸片的觀察在載玻片中央加一滴呂氏堿性美藍(lán)染色液，用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔，混合均勻；用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上；將制片放置約3分鐘，先低倍鏡后高倍鏡觀察酵母形態(tài)和出芽情況，并根據(jù)顏色區(qū)別死活細(xì)胞。染色30分鐘后再次觀察，注意死活細(xì)胞數(shù)量的變化；用其它濃度的呂氏堿性美藍(lán)染色液重復(fù)上述操作。染液過多會溢出，過少產(chǎn)生大量氣泡蓋玻片不宜平著放下在一個(gè)視野里計(jì)數(shù)死細(xì)胞和活細(xì)胞共計(jì)數(shù)5～6個(gè)視野酵母菌死亡率一般用百分?jǐn)?shù)來表示：死亡率=死細(xì)胞總數(shù)÷死活細(xì)胞總數(shù)×100%水-碘液浸片的觀察在載玻片中央滴一滴革蘭氏染色用碘液，在其上加3滴水，用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔，混合均勻；用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后慢慢將蓋玻