第頁竭誠為您提供優(yōu)質(zhì)文檔/雙擊可除性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度

篇一：性病實(shí)驗(yàn)室操作手冊

第一章

淋病的實(shí)驗(yàn)

淋病(gonorrhea)是指由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖道的化膿性感染，如尿道炎、宮頸炎和直腸炎等。如不及時治療，淋球菌可侵入泌尿生殖器的其他部位，引起附睪、前列腺、輸卵管及盆腔等器官的炎癥，甚至可經(jīng)血液傳播到全身其他部位，形成淋菌性關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎等合并癥。但另一方面，也有5%-20%的男性和60%的女性病人呈現(xiàn)無癥狀經(jīng)過。淋球菌好侵犯人類泌尿生殖道的柱狀上皮細(xì)胞，憑借特異的結(jié)構(gòu)和粘膜表面與之相匹配的部位粘附。繼而侵入細(xì)胞內(nèi)增殖，使粘膜上皮破壞，形成炎癥，出現(xiàn)一系列癥狀。

一、淋病診斷步驟

人類尿道上皮尤其是柱狀上皮細(xì)胞對淋球菌相當(dāng)敏感。在感染淋球菌后，經(jīng)過一段時間的潛伏期(平均3天~5天)。由于細(xì)菌和毒素的作用，粘膜壞死、脫落、神經(jīng)末梢暴露、炎癥浸潤、組織液滲出，病人會出現(xiàn)尿急、尿痛和尿道流膿等急性尿道炎癥狀。

淋球菌感染男性病人，常會出現(xiàn)尿痛和尿道流膿等臨床癥狀。這時取尿道分泌物作涂片，經(jīng)革蘭染色后，如見到有符合淋球菌形態(tài)特征的革蘭陰性細(xì)胞內(nèi)雙球菌，則初步診斷陽性，可對病人進(jìn)行治療；如涂片查菌陰性，應(yīng)從尿道取標(biāo)本進(jìn)行淋球菌培養(yǎng)。淋球菌感染的女病人，常僅有膿性宮頸分泌物或無癥狀。對女病人不推薦用涂片法檢查，而主張直接從宮頸取材進(jìn)行培養(yǎng)。標(biāo)本經(jīng)培養(yǎng)后，菌落形態(tài)典型、氧化酶試驗(yàn)陽性，菌體為革蘭陰性雙球菌，則初步診斷為陽性培養(yǎng)物，如有某些性狀不符合，則可進(jìn)一步用糖發(fā)酵試驗(yàn)及直接免疫熒光法等作鑒定加以確診。

二、標(biāo)本的采集和運(yùn)送

在取材作涂片時，應(yīng)先用滅菌等滲鹽水洗凈尿道口，然后用手指由后向前擠出膿液，用棉拭或白金耳蘸取膿液后輕輕涂布于載玻片上。待自然干燥后作染色。

如由男性病人前尿道取材作培養(yǎng)時，應(yīng)用白金耳或藻酸鈣拭子深入尿道2cm~4cm，取出的分泌物應(yīng)略帶粘膜。從女病人的宮頸取材時，應(yīng)將棉拭插入宮頸口1.5cm，稍轉(zhuǎn)動并停留10s~30s，讓棉拭充分吸附分泌物。從肛門取材時，應(yīng)將棉拭插入肛門2.5cm以上，從緊靠肛環(huán)邊的隱窩中取材。檢查淋菌性咽炎時從扁桃體或扁桃體窩或咽后壁取材。

淋球菌對外環(huán)境因素如干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)成功，應(yīng)盡量縮短標(biāo)本離體時間。在醫(yī)院門診部，從病人取材后，應(yīng)立即接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。如取材本處離實(shí)驗(yàn)室較遠(yuǎn)時，可將標(biāo)本置于無營養(yǎng)性的stuart或Amies運(yùn)送培養(yǎng)基或選擇性生長培養(yǎng)墓如Trmlsgrow中運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)本在無營養(yǎng)運(yùn)送培養(yǎng)中(在室溫25℃條件下)，12h對分離率無影響，在24h內(nèi)分離大于90%。如需時再應(yīng)使用生長運(yùn)送培養(yǎng)基，但即便如此，也不應(yīng)超過2天。

淋病的涂片檢查

【原理】

急性淋菌性尿道炎病人常有大量黃色膿性分泌物。在有些膿細(xì)胞內(nèi)可有許多淋球菌。淋球菌革蘭染色呈陰性反應(yīng)，具有特殊的菌體形態(tài)。因此，取病人尿道分泌物制成涂片后做革蘭染色，檢查有無典型細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌，可作初步診斷的依據(jù)。

【方法】

1．先用滅菌等滲鹽水的拭子揩洗尿道口，然后用手指由后向前擠出膿液，蘸取膿液后輕輕涂布于載玻片上。待自然干燥后加熱固定，染色，鏡檢。常用革蘭染色，也可用美藍(lán)染色。

2．涂片后，待自然干燥后火焰固定，

革蘭氏染色：結(jié)晶紫染色1min。

碘媒染液染色1min。

乙醇丙酮脫色1min左右。

石炭酸復(fù)紅復(fù)染1min。

晾干后油鏡鏡檢。

【結(jié)果】

在急性病人的尿道膿性分泌物革蘭染色涂片中，?？梢姷酱罅考t色多形核白細(xì)胞。在有些細(xì)胞中吞噬有淋球菌。淋球菌為革蘭陰性，呈卵圓形或圓形，常成對排列，接觸面扁平或稍凹。菌體長約0.7μm，寬約0.5μm。但兩菌大小可有差異。多數(shù)多形核細(xì)胞中并不含淋菌，但不少膿細(xì)胞中常含有一至數(shù)對，甚至20對30對淋球菌，淋球菌常存在于細(xì)胞漿內(nèi)。

在病期較長的淋病病人的涂片中淋球菌比較少，有時呈單個、四聯(lián)和八疊狀，位于細(xì)胞外。對有些菌有時難以下結(jié)論，需進(jìn)行培養(yǎng)和鑒定。

【注意事項】

1．涂片時不要用力涂擦，而應(yīng)將棉拭在玻片上輕輕滾動，因急性病人診斷標(biāo)準(zhǔn)為見到“細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌”。涂擦過勁，細(xì)胞破裂或變形，菌從細(xì)胞內(nèi)逸出，會造成診斷上的混淆。

2．涂片厚薄要合適。涂片過厚，加之染色過程中脫色時間不足，革蘭陰性菌也會呈現(xiàn)紫色。因此，脫色時間要視涂片厚薄而定。在大量染片時，最好用一已知的革蘭陽性菌(如葡萄球菌)和陰性菌(如大腸桿菌)作對照。

3．固定涂片，只要將涂片迅速通過火焰2~3次，避免加熱過度使細(xì)胞變形扭曲。當(dāng)把加熱的涂片放到手背上時應(yīng)不感到太燙。

4．不推薦用涂片檢查來診斷淋菌性直腸和咽部的感染，也不推薦用作判愈。

【臨床意義】

涂片檢查方法簡便、有效、價格低廉且有一定的敏感性和特異性。但其特異性隨著取材部位的不同而有所不同。例如，從男性尿道取材特異性高，而從女性宮頸取材特異性低。因女性宮頸分泌物中雜菌很多，有的在形態(tài)上很像淋球菌。因此，世界衛(wèi)生組織不推薦用涂片法來檢查女性病人。

淋球菌的分離培養(yǎng)

【原理】

如果標(biāo)本中有淋球菌，則在合適的培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)后可長成菌落。各種細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長成的菌落形態(tài)各不相同。根據(jù)菌落的大小、表面高起或扁平、光澤、色素和邊緣的情況等，作為細(xì)菌鑒定的標(biāo)準(zhǔn)。

【方法】

1．取材

培養(yǎng)要獲得成功，取材的部位和方法要準(zhǔn)確。由男性病人前尿道取材時，應(yīng)該用細(xì)小棉拭子或藻酸鈣拭子或白金耳伸入尿道口2cm~4cm，取出的分泌物應(yīng)略帶粘膜。從女病人的宮頸取材時，應(yīng)先用溫水濕潤擴(kuò)陰器(不要用液體石蠟等潤滑油)。應(yīng)將棉拭插入宮頸口1.5cm處，稍轉(zhuǎn)動并停留10s~30s，讓棉拭充分吸附分泌物。從直腸取材時，應(yīng)將棉拭插入肛門2.5cm以上，如果棉拭碰到糞便，應(yīng)換一個棉拭重取。檢查淋菌性咽炎時，應(yīng)從扁桃體及扁桃體窩取材。為了提高陽性率，可同時取二份標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)。

2．培養(yǎng)基

由于淋球菌的營養(yǎng)要求較復(fù)雜，所用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有動物蛋白及細(xì)菌生長所需的各種因子。目前國內(nèi)常用的是血液瓊脂或巧克力瓊脂。為抑制雜菌，在培養(yǎng)基中可加入少量抗菌物質(zhì)如多粘菌素b(25μg/ml)和萬古霉素(3.3μg/ml)等。所用血液如羊血、兔血和人血均可，濃度為8%~10%。但避免血液中加入抗凝劑等藥物。培養(yǎng)基的ph值以7.4為好。目前國外常用的培養(yǎng)基有Thayer-martin(T-m)培養(yǎng)基、newYorkcity(nYc)培養(yǎng)基和martin-Lewis(mL)培養(yǎng)基等。T-m培養(yǎng)基是在gc基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，加入血紅蛋白(1%)、抗生素(萬古霉素3μg/ml、粘菌素

7.5μg/ml和制霉菌素12.5μg/ml)和淋球菌增菌劑，使絕大多數(shù)雜菌被抑制而淋球菌菌落長得較大，在乎皿中幾乎呈純培養(yǎng)，從而大大提高了由子宮頸、尿道，尤其是咽和直腸部位分離出淋菌的陽性率。

3．培養(yǎng)條件

淋球菌對外環(huán)境變化頗為敏感，對寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后應(yīng)立即接種，標(biāo)本離體時間越短越好。取材處離實(shí)驗(yàn)室距離較遠(yuǎn)時，應(yīng)將標(biāo)本接種于smart或Amies運(yùn)送培養(yǎng)基或1%葡萄糖肉浸液中，并注意在運(yùn)送過程中保溫。接種的血平皿應(yīng)先放在37℃溫箱中預(yù)溫。培養(yǎng)的最適溫度為35℃~36℃，超過38.5℃或低于30℃便生長不良。因此，孵育的溫度要恒定。淋球菌為需氧菌，但最初從人體分離時，為促進(jìn)生長，需用5%二氧化碳環(huán)境培養(yǎng)。為保持一定的濕度，可在培養(yǎng)缸中放些浸水棉球。

【結(jié)果】

淋球菌在血平皿上經(jīng)24h~48h的培養(yǎng)后，可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落。邊緣呈花瓣狀，直徑為0.5mm~1.0mm。用白金耳觸之有粘性。如繼續(xù)培養(yǎng)，菌落面積增大，表面變得粗糙，邊緣出現(xiàn)皺縮。若從菌落上取材作涂片，可見到菌的大小及染色的深度有差異，排列也不一致，約有25%的菌為典型的雙球菌，其他75%為單球菌、四聯(lián)形或八疊形。

淋球菌在液體培養(yǎng)基中生長于液體表面，或稍有輕度混濁和顆粒沉淀。

【注意事項】

1．培養(yǎng)要獲得成功，取材是關(guān)鍵之一。取材的深度一定要夠，因?yàn)榱芮蚓冒l(fā)于柱狀上皮細(xì)胞而不是復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞。男性尿道前端包括舟狀窩都為復(fù)層鱗狀上皮覆蓋，所以要深人到尿道內(nèi)2cm~4cm處，并蘸取少量粘膜，陽性率才高。女性病人取材時，要求將棉拭插入宮頸管，轉(zhuǎn)動并停留10s~30s也是這個道理。有些人只在陰道口取少量分泌物作分離培養(yǎng)，陽性率當(dāng)然會降低，因?yàn)橛猩盍Φ木鷱膶m頸隨分泌物由陰道流出需一定時間，陰道內(nèi)ph值低，又因各種雜菌的作用，到陰道口時淋菌的生活力較低，再加(:性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度)上培養(yǎng)過程中各種因素的影響，培養(yǎng)成功的機(jī)會就會減少。

2．對癥狀不典型的男病人取材，最好是在晨起排尿前或排尿后2~3h之后。另外，

篇二：性病實(shí)驗(yàn)室sop

東莞市高埗醫(yī)院作業(yè)指導(dǎo)書第1頁共1頁

第1版第0次修改主題：性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制制度頒布日期：20XX年11月

性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制制度

1目的

規(guī)范性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制制度，保證實(shí)驗(yàn)室安全、順利進(jìn)行。

2適用范圍

適用于性病實(shí)驗(yàn)室試劑、儀器、操作過程的質(zhì)量控制。3職責(zé)

檢驗(yàn)科性病實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與記錄。

4性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制制度

4.1對實(shí)驗(yàn)室儀器：水浴箱，冰箱，高壓鍋，顯微鏡進(jìn)行功能監(jiān)測。

4.2做好對培養(yǎng)基的配制，外觀檢查，滅菌試驗(yàn)，培養(yǎng)基的功能檢測及保存工作。4.3做好染色液，血清學(xué)診斷試劑的質(zhì)量控制。

4.4做好標(biāo)本的管理，檢測的記錄，結(jié)果的存檔，報告的完整性的質(zhì)量工作。4.5每批檢測陰陽性對照與標(biāo)本一起檢測。

4.6若有超控現(xiàn)象一定要做失控分析，處理意見。4.7并做好質(zhì)控原始記錄。

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第1版第0次修改主題：LDZ5-2離心機(jī)頒布日期：20XX年11月

LDZ5-2離心機(jī)

1目的

規(guī)范LDZ5-2離心機(jī)的正確操作。

2適用范圍

適用于檢驗(yàn)科人員對LDZ5-2離心機(jī)的使用。

3職責(zé)

檢驗(yàn)科性病實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員負(fù)責(zé)LDZ5-2離心機(jī)的維護(hù)與保養(yǎng)。

4工作原理

根據(jù)離心力的作用原理，密度大的成份向下沉，以至液體成份與固體成份達(dá)到分離的目的。

5使用方法

5.1三眼安全插座，使用前應(yīng)接地線。工作時應(yīng)放置在平整而堅實(shí)的臺面上。5.2電源開關(guān)，指示燈亮，電源即接通。

5.3打開蓋板，選擇合適的離心護(hù)管將試管小心放置在護(hù)管內(nèi)。5.4合上蓋板。

5.5先調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速開關(guān)至所需轉(zhuǎn)速，后調(diào)定時器至所需時間。5.6開啟啟動開關(guān)離心機(jī)開始工作。

5.7工作一這定時間后，離心機(jī)自動停止工作，盤停止旋轉(zhuǎn)之后，方可打開蓋板，取出試管。5.8本機(jī)使用完畢后，須關(guān)閉電源開關(guān)，熄滅指示燈。將本機(jī)放于干燥，通風(fēng)處，并保持其清潔。

6注意事項

6.1對稱的離心護(hù)管內(nèi)要放同樣重量有試管，以免重量偏太大而產(chǎn)生嚴(yán)重晃動。6.2一定要等到轉(zhuǎn)盤完全停止轉(zhuǎn)動，才能打開蓋板。

7相關(guān)性文件

《LDZ5-2離心機(jī)使用說明書》

東莞市高埗醫(yī)院作業(yè)指導(dǎo)書第1頁共1頁

第1版第0次修改主題：pYx—Dhs-4000恒溫培養(yǎng)箱頒布日期：20XX年11月

pYx—Dhs-4000隔水式恒溫培養(yǎng)箱

1目的

規(guī)范pYx—Dhs-4000隔水式恒溫培養(yǎng)箱的操作。

2適用范圍

適用于檢驗(yàn)科人員對pYx—Dhs-4000隔水式恒溫培養(yǎng)箱的使用。

3職責(zé)

檢驗(yàn)科性病實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員負(fù)責(zé)pYx—Dhs-4000隔水式恒溫培養(yǎng)箱的維護(hù)與保養(yǎng)。

4操作方法

4.1在恒溫培養(yǎng)箱后面右側(cè)孔加水至左側(cè)浮起止水標(biāo)志。

4.2把電源開關(guān)撥至“開”處，此時電源指示燈亮，調(diào)節(jié)溫度，直到溫度在35℃，批示燈滅，控制進(jìn)入恒溫狀態(tài)?？梢允褂?。

5注意事項

5.1每次注水要用蒸餾水。

5.2每日保持箱內(nèi)的干凈，做好箱面的清潔工作。5.3培養(yǎng)箱外殼必須有效接地，以保證使用安全。5.4水位降低應(yīng)及時加水。

5.5箱內(nèi)物品切勿過擠，必須留出空間。

5.6開門操作完成后要及時關(guān)上門，保證箱內(nèi)溫度流失。

6相關(guān)性文件

《pYx—Dhs-4000隔水式恒溫培養(yǎng)箱使用說明書》

東莞市高埗醫(yī)院作業(yè)指導(dǎo)書第1頁共1頁

第1版第0次修改主題：TL-2000c型自動旋轉(zhuǎn)振蕩儀頒布日期：20XX年11月

TL-2000c型自動旋轉(zhuǎn)振蕩儀

1目的

規(guī)范TL-2000c型自動旋轉(zhuǎn)振蕩儀的操作。

2適用范圍

適用于檢驗(yàn)科人員對TL-2000c型自動旋轉(zhuǎn)振蕩儀的使用。

3職責(zé)

檢驗(yàn)科性病實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員負(fù)責(zé)TL-2000c型自動旋轉(zhuǎn)振蕩儀的維護(hù)與保養(yǎng)。

4工作原理

利用穩(wěn)定的旋轉(zhuǎn)速度，使試劑與標(biāo)本得到充分的混合作用。

5操作步驟

5.1打開后面電源開關(guān)；5.2選擇“V1”或“V2”，V1：慢速，V2：快速；5.3放好需旋轉(zhuǎn)混合的標(biāo)本混合液在旋轉(zhuǎn)盤上；5.4調(diào)節(jié)定時器到所需時間；

5.5調(diào)節(jié)所需的旋轉(zhuǎn)速度；

5.6旋轉(zhuǎn)時間到終點(diǎn)，儀器會自動停止；5.7及時觀察結(jié)果。

6注意事項