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文檔簡介
酶傳感器傳感器是能將一種被測量的信號(參量)轉(zhuǎn)換成為一種可輸出信號的分析測試裝置。生物傳感器(biosensors)就是用生物成分(酶、蛋白質(zhì)、抗體、細胞)作為感受器的傳感器,可用于測定混合溶液中某種物質(zhì)的濃度。通常由感受器和換能器和電子線路三部分組成。
酶傳感器類型
電極密接型:直接在基礎電極的敏感面上安裝固定化酶膜
液流系統(tǒng)型:固定化酶填充在反應柱內(nèi),底物流經(jīng)反應柱發(fā)生酶促反應,產(chǎn)生生化信號,再到基礎電極敏感面。
葡萄糖氧化酶電極測量法
原理:通過測量血液中的葡萄糖與試紙中的葡萄糖氧化酶反應產(chǎn)生的電流量測量血糖。目前市面上的主流機型大多為葡萄糖氧化酶測量法。優(yōu)點:相較生化儀和化學法測量更快(30秒以內(nèi)),用血量更少(5微升以缺點:由于空氣中的氧含量比氫含量大得多,所以相較脫氫酶法而言試紙更容易受空氣影響,所以要求在封閉干燥的環(huán)境下儲存更嚴格,一般試紙從容器中取出后要在5分鐘之內(nèi)使用完畢,否則因試紙受潮而測量不準的可能性更大,桶裝試紙一般要求開蓋將試紙取出后立即蓋緊罐蓋,試紙開封后要求3個月內(nèi)用完。
酶電極特點:快速、方便、靈敏、精確范圍:糖類、抗生素、氨基酸、甾體化合物、有機酸、脂粉、醇類、胺類以及尿素、尿酸、硝酸、磷酸等要求:酶必須有較強的專一性,并且要有一定的純度。
酶傳感器還可以用于水質(zhì)監(jiān)測。例如,酚是一類對人體有害的化合物,經(jīng)常通過煉油和煉焦等工廠的廢水排放到河流和湖泊中。根據(jù)測定水中酚含量的需要,科學家利用固定化多酚氧化酶研制成多酚氧化酶傳感器,這種酶傳感器可慚快速測定出水中質(zhì)量分數(shù)僅有2×1O-7的酚。
6.3固定化酶在酶分析中的應用
近年來,固定化酶也已開始滲入到酶分析領域,并在迅速地擴展,從而有可能使酶分析達到簡便化、連續(xù)化和自動化。一酶(膜)電極
酶電極主要由選擇性電極感應器和復蓋在上面的酶膜組成。通過酶膜層的作用使底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物,然后再通過感應器進行檢測。這種轉(zhuǎn)化可用一級反應動力學關系描述。
優(yōu)點:酶電極檢測十分簡便,而且靈敏度高,因此很可能得到普及和進一步發(fā)展。近年來不僅有了各種酶電極,還出現(xiàn)了各種微生物電極、多功能電極等。二酶管感應分析器
這是將酶固定于細管內(nèi)壁,樣品通過細管時與管壁接觸進行酶反應,然后在細管出口處偶聯(lián)感應分折僅,檢測流出的產(chǎn)物濃度,再通過動力學關系求得待測物濃度的分析裝置。
6.4酶分析的自動化問題
所謂酶分析自動化就是指從清洗、加樣、啟動反應、測定、數(shù)據(jù)記錄、計算處理直至提供結(jié)果等步驟,全部由儀器自動操作。有些儀器只能做到半自動,其結(jié)果計算需由人工處理。要使酶分析自動化就必須使酶反應擬一級化,即除了被測因素外,其它都應保證過量、最適,這樣酶反應速度與被測因素成比例。實現(xiàn)測定的自動化有以下幾種方法:
1.初速度法2.固定濃度法(變時法)3.固定時間法一初速度法
這種方法就是通過分析儀器自動添加反應試劑和樣品,自動控制反應和檢測反應,井自動繪制酶反應過程曲線的一種半自動方法。但從反應過程曲線求出反應初速度,并換算成被測物的濃度還要靠人工進行。二固定濃度法
又稱變時法。當?shù)孜餄舛裙潭〞r,反應速度相對底物濃度或相對酶濃度作圖有一線性關系,通過分析儀器自動測定反應物或反應產(chǎn)物變化(物理化學性質(zhì)變化)達到其一固定值所需要的時間就可求得被測物的濃度。三固定時間法
對
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