中國東北部漢族人群SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇遺傳變異及基因表達與冠心病關系的研究第一部分SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇單核苷酸多態(tài)性與冠心病發(fā)病風險及血脂水平的關系目的：探索SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇上的rs9346816、rs2221750、rs3127596、rs9364559、rs1367211、rs6415085、rs9347438及rs9355296位點與中國東北部漢族人群冠心病發(fā)病風險及血脂水平的關系。方法：本研究采用病例對照研究方法。病例組和對照組分別為551例和544例。研究人群均為中國東北部漢族人群，且個體間無血緣關系。病例組人群篩選自2009年~2012年在吉林大學第一醫(yī)院二部心血管內(nèi)科確診并進行住院治療的冠心病患者。選擇同期在吉林大學第一醫(yī)院體檢中心健康體檢的正常人群為對照組。采用SequenomMassArray系統(tǒng)對位于SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇上的rs9346816、rs2221750、rs3127596、rs9364559、rs1367211、rs6415085、rs9347438及rs9355296位點進行基因分型，同時收集研究對象的流行病學資料。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件對一般資料、等位基因及基因型與冠心病關系、SNPs和冠心病危險因素的關聯(lián)分析及不同基因型人群間血脂水平的關系；采用SHEsis軟件分析單倍型與冠心病的關系；采用Haploview軟件進行連鎖不平衡分析。采用多元線性回歸分析校正混雜因素對結果的影響。結果：1.病例組中吸煙人數(shù)高于對照組，并且病例組中患有高血壓病、糖尿病患者人數(shù)均多于對照組，病例組患者血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、脂蛋白(a)水平高于對照組，并且以上差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2.校正混雜因素后，SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇上rs9364559位點基因型與等位基因在病例組和對照組人群中的分布仍存在顯著性差異（X2=7.126,P=0.028；X2=4.436,P=0.039）。3.單倍體型分析結果顯示7個位點組成的單倍型中GAAAGTG和GGAAGTG與冠心病發(fā)病風險相關（P<0.05），攜帶GAAAGTG單倍型人群冠心病的發(fā)病風險可能降低，但攜帶GGAAGTG單倍型人群冠心病的發(fā)病風險可能增高。由6個SNP位點構成的單倍型中有14種單倍型與冠心病的發(fā)病風險相關（P<0.05），其中8種單倍型可能增加冠心病的發(fā)病風險，6種單倍型可能降低冠心病的發(fā)病風險。由5個SNP位點構成的單倍型中有39種單倍型與冠心病的發(fā)病風險相關（P<0.05），其中21種單倍型可能增加冠心病的發(fā)病風險，18種單倍型可能降低冠心病的發(fā)病風險。由4個SNP位點構成的單倍型中有49種單倍型與冠心病的發(fā)病風險相關（P<0.05），其中22種單倍型可能增加冠心病的發(fā)病風險，27種單倍型可能降低冠心病的發(fā)病風險。由3個SNP位點構成的單倍型中有39種單倍型與冠心病的發(fā)病風險相關（P<0.05），其中19種單倍型可能增加冠心病的發(fā)病風險，20種單倍型可能降低冠心病的發(fā)病風險。由2個SNP位點構成的單倍型中有9種單倍型與冠心病的發(fā)病風險相關（P<0.05），其中3種單倍型可能增加冠心病的發(fā)病風險，6種單倍型可能降低冠心病的發(fā)病風險。4.位于SLC22A3基因上的rs9346816位點不同基因型間LDL-C、TC水平存在顯著差異（P<0.05），LPA基因上的rs6415085位點不同基因型之間Lp(a)、LDL-C水平存在顯著差異（P<0.05）。結論：1．吸煙、高血壓病、糖尿病、血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、脂蛋白(a)水平可能與冠心病發(fā)病風險相關。2.SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇與中國東北部漢族人群冠心病發(fā)病風險及血脂水平相關。3.在中國東北部漢族人群中位于LPA基因上的rs9364559位點可能參與冠心病的發(fā)生與發(fā)展。4.多個SNPs位點同時存在可能對冠心病發(fā)病風險有不同的影響。第二部分中國東北部漢族人群SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇mRNA表達水平與冠心病發(fā)病風險的關系目的：分析SLC22A3,LPAL2和LPA基因mRNA表達水平與冠心病發(fā)病風險的關系；闡述SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇遺傳變異對mRNA表達水平的影響。方法：選擇2012年在吉林大學第一醫(yī)院二部心血管內(nèi)科確診并進行住院治療的92例冠心病患者為病例組，選擇同期在吉林大學第一醫(yī)院二部心血管內(nèi)科進行診治的非冠心病患者32例為對照組。采用實時熒光定量PCR方法對SLC22A3,LPAL2和LPA基因mRNA的表達水平進行測定。分析病例組與對照組之間及攜帶不同基因型病例組人群間目的基因mRNA表達水平的差異。以上統(tǒng)計學分析均采用SPSS16.0軟件。結果：1.病例組中吸煙、高血壓病人數(shù)均高于對照組，病例組患者低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、脂蛋白(a)水平高于對照組，并且以上差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2.與對照組人群相比，冠心病患者外周血中LPA和SLC22A3基因mRNA的表達水平顯著增高（P<0.05）；兩組間外周血中LPAL2mRNA表達水平無顯著差異（P>0.05）。rs9346816、rs2221750、rs3127596、rs9364559、rs1367211、rs6415085和rs9347438位點不同基因型患者外周血SLC22A3、LPAL2和LPAmRNA表達水平均無顯著差異（P>0.05）。結論：1.外周血LPA和SLC22A3基因mRNA表達水平升高可能與中國東北部漢族人群冠心病的發(fā)病風險相關。2.染色體6q26-27區(qū)域SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇上rs9346816、rs2221750、rs3127596、rs9364559、rs1367211、rs6415085和rs9347438位點的多態(tài)性與冠心病患者外周血中SLC22A3、LPAL2、LPA基因mRNA的表達水平無關，因此，上述SNPs位點可能不是通過影響基因轉錄水平參與冠心病的發(fā)生。第三部分SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇蛋白表達與冠心病發(fā)病風險的關系目的：研究SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇蛋白表達與冠心病發(fā)病風險的關系；闡明SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇遺傳變異對其相鄰基因蛋白表達水平的影響。方法：選擇2012年在吉林大學第一醫(yī)院二部心血管內(nèi)科確診并進行住院治療的55例冠心病患者為病例組，選擇同期在吉林大學第一醫(yī)院二部心血管內(nèi)科進行健康體檢的正常人15例為對照組。采用westernblot方法對外周血SLC22A3基因蛋白表達水平進行測定。用QuantityOne軟件對蛋白表達進行半定量分析。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析。結果：1.冠心病患者外周血中SLC22A3蛋白表達水平明顯高于對照組，具有顯著差異（P<0.05）。2.位于SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇上rs9346816、rs2221750、rs3127596、rs9364559、rs1367211、rs6415085和rs9347438位點不同基因型間SL