小麥春化相關(guān)小RNA表達(dá)譜分析及光照促進(jìn)春化的機(jī)理研究春化作用是指植物必須經(jīng)歷一段時(shí)間的持續(xù)低溫才能由營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)入生殖階段生長的現(xiàn)象,冬小麥具有明顯的春化特性。為了研究冬小麥春化的分子機(jī)制,一方面,利用小RNA高通量測序,檢測春化前、春化2周、4周和6周時(shí),葉片中miRNA的表達(dá)模式,鑒定小麥中已知的miRNA和新的miRNA,并篩選和春化相關(guān)的小麥miRNA。結(jié)果如下:(1)根據(jù)四個(gè)時(shí)期的小麥葉片小RNA表達(dá)譜,共鑒定出已知miRNA2393個(gè),新的非冗余miRNA850個(gè)。(2)相對于春化前,在已知miRNA中,上調(diào)表達(dá)的miRNA在春化2周時(shí)為11個(gè),4周時(shí)為15個(gè),6周時(shí)為13個(gè),在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均上調(diào)的為17個(gè)。下調(diào)表達(dá)的miRNA在春化2周時(shí)為5個(gè),4周時(shí)為8個(gè),6周時(shí)為12個(gè),在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均下調(diào)的為13個(gè)。(3)相對于春化前,在850個(gè)新miRNA中,上調(diào)表達(dá)的miRNA在春化2周時(shí)為31個(gè),4周時(shí)為53個(gè),6周時(shí)為39個(gè),在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均上調(diào)的為21個(gè)。下調(diào)表達(dá)的miRNA數(shù)量在春化2周時(shí)為56個(gè),4周時(shí)為58個(gè),6周時(shí)為57個(gè),在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均下調(diào)的為42個(gè)。以上結(jié)果為miRNA在小麥中的機(jī)理研究奠定了基礎(chǔ)。另一方面,為研究春化階段的光照對春化的影響,分別進(jìn)行了暗春化(D)和長光照春化(LD)處理,然后檢測了兩種處理對小麥抽穗時(shí)間、株高和葉片數(shù)的影響,并檢測了春化、光周期、生物鐘、甲基化相關(guān)基因在兩種春化條件處理下的表達(dá)模式。結(jié)果如下:(1)長光照春化條件下小麥抽穗時(shí)間比暗春化條件下提前16天,在表型葉片上長光照也比暗春化條件下多1-3片,株高方面長光照春化小麥比暗春化條件下小麥高3-5cm。(2)長光照春化條件下春化基因VRN1的表達(dá)要高于暗春化條件下的,VRN2在春化期間幾乎不表達(dá),而ODDSOC2的表達(dá)在暗春化條件下高于長光照春化條件下的。(3)光周期相關(guān)基因在長光照春化時(shí)期比在暗春化時(shí)期的表達(dá)顯著提高。(4)生物鐘相關(guān)基因和甲基化相關(guān)基因在長