關(guān)于血細(xì)胞分析儀原理目的要求1、掌握：血液分析儀各項(xiàng)參數(shù)的縮寫(xiě)、參考值、直方圖概念。2、熟悉：血液分析儀電臨床應(yīng)用、檢測(cè)參數(shù)、方法學(xué)平價(jià)、血細(xì)胞直方圖正常形態(tài)特點(diǎn)及常見(jiàn)異常形態(tài)、臨床應(yīng)用。3、了解：血液分析儀的進(jìn)展。第2頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天重點(diǎn):1、血液分析儀測(cè)定的原理、方法

2、血液分析儀各參數(shù)臨床意義難點(diǎn):血液分析儀檢驗(yàn)的質(zhì)控第3頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天§1血液分析儀的發(fā)展史第4頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天

自動(dòng)血液分析儀（automatedhematologyanalyzer,AHA)，早年稱(chēng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（bloodcellcounter)，是目前國(guó)內(nèi)外臨床檢驗(yàn)最常用的篩檢儀器之一。1、傳統(tǒng)采用手工方法2、20世紀(jì)50年代，美國(guó)的Coulter設(shè)計(jì)了第一臺(tái)電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。還產(chǎn)生了血紅蛋白儀。第5頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天3、20世紀(jì)70年代檢測(cè)血小板的儀器Baker-8104、20世紀(jì)80年代，可打印WBC、RBC、PLT體積分布直方圖。5、20世紀(jì)90年代，白細(xì)胞分類(lèi)的開(kāi)發(fā)（二分類(lèi)、三分類(lèi)）；將網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)用于血細(xì)胞分析儀；生產(chǎn)了血液學(xué)全自動(dòng)系統(tǒng)。6、現(xiàn)在，白細(xì)胞五分類(lèi)，儀器組合化第6頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天血細(xì)胞分析儀近年來(lái)的發(fā)展變化1.血常規(guī)檢驗(yàn)多參數(shù)化2.多功能合成擴(kuò)展3.檢測(cè)速度的提高4.方法的改進(jìn)和進(jìn)展5.應(yīng)用的方便性第7頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天

血液分析儀功能：①全血細(xì)胞計(jì)數(shù)功能。②白細(xì)胞分類(lèi)功能。③擴(kuò)展功能。血液分析儀優(yōu)勢(shì)檢測(cè)項(xiàng)目多速度快精度高易操作第8頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天§2檢測(cè)原理第9頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天檢測(cè)原理電學(xué)光學(xué)電阻抗法

射頻電導(dǎo)法激光散射法分光光度法第10頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、電阻抗法

血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理即庫(kù)爾特原理（Coulterprinciple):根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮的血細(xì)胞在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)為基礎(chǔ)，進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定。第11頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第12頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第13頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天小孔管是電阻抗法細(xì)胞計(jì)數(shù)的一個(gè)重要組成部分。檢測(cè)期間，當(dāng)電流接通后，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生穩(wěn)定的電流。如果供給的阻抗也是穩(wěn)定的，則小孔的電壓是不變的。第14頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天當(dāng)有一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，由于電阻增加，于瞬間引起電壓變化——通過(guò)脈沖。細(xì)胞體積越大，脈沖振幅越高；細(xì)胞數(shù)量越多，脈沖數(shù)量也越多。第15頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天脈沖信號(hào)經(jīng)過(guò)下列步驟，得出細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果：放大由于血細(xì)胞通過(guò)微孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖信號(hào)微弱，必須通過(guò)放大器將訊號(hào)放大。2.

閾值調(diào)節(jié)在一定范圍內(nèi)調(diào)節(jié)參考電平的大小，使計(jì)數(shù)結(jié)果盡可能符合實(shí)際。第16頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.甄別利用甄別器根據(jù)閾值調(diào)節(jié)器提供的參考電平，將低于參考電平的假訊號(hào)（細(xì)胞碎片，雜質(zhì)微粒）去掉。4.整形通過(guò)整形器作用，將脈沖訊號(hào)波形修整成一致標(biāo)準(zhǔn)的平頂波，才能觸發(fā)電路第17頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天5計(jì)數(shù)血細(xì)胞的脈沖信號(hào)，經(jīng)過(guò)放大、甄別、整形后，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)，得出計(jì)數(shù)結(jié)果。

電阻抗法可準(zhǔn)確測(cè)量出細(xì)胞（或類(lèi)似顆粒）的大小，是三分群血液分析儀的主要應(yīng)用原理，并與光學(xué)檢測(cè)原理組合應(yīng)用于五分類(lèi)血液分析儀中。第18頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天三分群血液分析儀基本組成①信號(hào)發(fā)生器 各種微粒通過(guò)檢測(cè)小孔產(chǎn)生電阻抗脈沖信號(hào)的檢測(cè)源。②放大器 將血細(xì)胞微弱脈沖信號(hào)放大以觸發(fā)電路系統(tǒng)。③閾值調(diào)節(jié)器 調(diào)節(jié)能區(qū)分不同群細(xì)胞合適的信號(hào)電平。第19頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天④甄別器 去除非參考電平的各種假信號(hào)以提高計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。⑤整形器 將不一致的脈沖波形信號(hào)調(diào)整為標(biāo)準(zhǔn)的波形后觸發(fā)計(jì)數(shù)電路系統(tǒng)。⑥計(jì)數(shù)系統(tǒng)將整形后的血細(xì)胞脈沖信號(hào)顯示為不同類(lèi)群的細(xì)胞數(shù)。第20頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、激光散射法

激光散射法應(yīng)用了流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)檢測(cè)原理。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)原理：細(xì)胞通過(guò)激光束被照射時(shí)，產(chǎn)生與細(xì)胞特征相應(yīng)的各種角度的散射光。對(duì)經(jīng)信號(hào)檢測(cè)器接收的散射光信息進(jìn)行綜合分析，即可準(zhǔn)確區(qū)分正常類(lèi)型的細(xì)胞。第21頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第22頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天半導(dǎo)體激光的流式細(xì)胞術(shù)

側(cè)向熒光（RNA/DNA含量）

激光（波長(zhǎng)633nm）

側(cè)向散射（細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，如核的大?。┣跋蛏⑸涔猓?xì)胞大?。┑?3頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天低角度散射光（前向散射光）：反映細(xì)胞的數(shù)量和表面體積大小。高角度散射光（側(cè)向散射光）：反映細(xì)胞的內(nèi)部顆粒、細(xì)胞核等復(fù)雜性。第24頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天激光散射法在區(qū)別體積相同而類(lèi)型不同的細(xì)胞特征時(shí)，比電阻抗法分群更加準(zhǔn)確。故激光散射法已成為現(xiàn)代五分類(lèi)血液分析儀的主要檢測(cè)原理之一。第25頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天流式細(xì)胞儀的技術(shù)特點(diǎn)

流式細(xì)胞儀在設(shè)計(jì)上采用了許多獨(dú)特的技術(shù)，比如液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)、信號(hào)測(cè)量和細(xì)胞分選方面都有自己的技術(shù)特點(diǎn)。著重講述液流系統(tǒng)——鞘流原理。第26頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第27頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天雷諾系數(shù)ReRe＝dρν/ηd:管子的直徑

ρ：液體的密度ν：液體的流速

η：液體的粘滯系數(shù)Re<2300，液流處于穩(wěn)流狀態(tài)Re>2300，液流處于湍流狀態(tài)第28頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天通常把標(biāo)本流的流速控制在10m/s以?xún)?nèi)，就能保持標(biāo)本流處于穩(wěn)流狀態(tài)。外面包被有高速流動(dòng)的鞘液，實(shí)現(xiàn)標(biāo)本與鞘液穩(wěn)定的同軸流動(dòng)狀態(tài)。同時(shí)利用液流聚焦原理，使標(biāo)本流直徑變小，通常只有10～20μm，避免細(xì)胞多個(gè)重疊進(jìn)入檢測(cè)區(qū)。第29頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天激光散射法系統(tǒng)基本組成1、光源 氣體（氦－氖）激光或固體（半導(dǎo)體）激光（單色光）；鎢光源（多色光）。2、鞘流 維持顆粒于液流中央，順序、單個(gè)、恒速向前流動(dòng)，即流體動(dòng)力學(xué)聚焦。第30頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天3、細(xì)胞懸液 被檢測(cè)細(xì)胞（顆粒）的懸液，由氣壓導(dǎo)入流動(dòng)池。4、光檢測(cè)器 接受來(lái)自各種角度的散射光或吸收光信號(hào)，并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)特征的電信號(hào)第31頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、射頻電導(dǎo)法

射頻（radiofrequency,RF)

指射頻電流，是每秒變化大于10000次的高頻交流電磁波。高頻電流能通過(guò)細(xì)胞壁。用高頻電磁探針滲入細(xì)胞膜脂質(zhì)可測(cè)定細(xì)胞的導(dǎo)電性，提供細(xì)胞內(nèi)部化學(xué)成分、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)、顆粒成分等特征信息。第32頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第33頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、分光光度法Lambert-Beer定律：A=lg(I0/I)A:吸光度，或稱(chēng)光密度；I0：?jiǎn)紊肷涔鈴?qiáng)度；I：透過(guò)光強(qiáng)度分光光度法儀器的組成：?jiǎn)紊庠础z測(cè)池和比色容器、光檢測(cè)器。第34頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天分光光度法是所有類(lèi)型的血細(xì)胞分析儀檢測(cè)Hb的原理：被稀釋的血液加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合形成Hb衍生物，在特定波長(zhǎng)（530～550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例。第35頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第36頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天血紅蛋白血紅蛋白衍生物吸光度Hb濃度溶血?jiǎng)│耍?40nm第37頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天血紅蛋白測(cè)定的溶血?jiǎng)┤苎獎(jiǎng)┖杌锏娜苎獎(jiǎng)┎缓杌锏娜苎獎(jiǎng)┑?8頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天§3血液分析儀檢測(cè)參數(shù)原理第39頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天

不同類(lèi)型血液分析儀檢測(cè)參數(shù)的原理不盡相同。高檔儀器應(yīng)用2種或2種以上檢測(cè)原理，組合電學(xué)、光學(xué)、細(xì)胞化學(xué)等技術(shù)，在獨(dú)特檢測(cè)通道測(cè)定紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞系列的數(shù)量、亞類(lèi)及相關(guān)參數(shù)。第40頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、白細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理第41頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天儀器將體積為35～450fL的血細(xì)胞，分為256個(gè)通道（channel）。每個(gè)通道：1.64fl。根據(jù)細(xì)胞大小，分別置于不同的通道中，顯示血細(xì)胞體積分布直方圖(Histogram)。（一）電阻抗法

第42頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.分群經(jīng)溶血素處理脫水后，血細(xì)胞體積大小發(fā)生了變化！??！第一群（35～90fl）小細(xì)胞區(qū)：淋巴細(xì)胞（體積最?。?。第二群（90～160fl）單個(gè)核細(xì)胞區(qū)，（中間細(xì)胞）：?jiǎn)魏思?xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始、幼稚細(xì)胞、異常細(xì)胞等。第三群（160fl以上）大細(xì)胞區(qū)：嗜中性粒細(xì)胞（體積最大）。第43頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第44頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.白細(xì)胞分布直方圖三分群血液分析儀正常白細(xì)胞分類(lèi)模式圖（直方圖）3590160300400450(fl)%第45頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）光散射法白細(xì)胞分類(lèi)體積、電導(dǎo)和光散射法（volume,conductivity,lightscatter,VCS)

VCS電阻抗技術(shù)細(xì)胞大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu)細(xì)胞內(nèi)的顆粒性、核分葉性和細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)第46頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天

體積電導(dǎo)光散射第47頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、電阻抗與射頻法（能透入細(xì)胞內(nèi)，測(cè)量核的大小及顆粒的多少）。RF:射頻電流細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息DC:直流電細(xì)胞大小的信息第48頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)專(zhuān)用的E溶血?jiǎng)?，電阻抗法?）嗜堿性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)專(zhuān)用的B溶血?jiǎng)?，電阻抗法?）淋巴、單核和粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)電阻抗和射頻聯(lián)合檢測(cè)第49頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（4）幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)電阻抗法成熟幼稚成熟幼稚膜上脂質(zhì)少膜上脂質(zhì)多加入溶血?jiǎng)┙Y(jié)合AA多結(jié)合AA少加入硫化AA幼稚保持完整細(xì)胞破壞第50頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天3、多角度偏振光散射法（MAPSS)（1）白細(xì)胞計(jì)數(shù)用含DNA染料碘化丙啶試劑可破壞有核紅細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)，只留下細(xì)胞核，裸核易于染色。染料對(duì)有活性的白細(xì)胞只有極小滲透性或無(wú)滲透性，故不出現(xiàn)細(xì)胞核染色。從而鑒別有核紅細(xì)胞和活性白細(xì)胞，計(jì)算活性白細(xì)胞比率。第51頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）白細(xì)胞分群

MAPSS0°,前向散射光：細(xì)胞大小、數(shù)量7°，側(cè)向散射光：細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)及核染色質(zhì)的復(fù)雜性90°，垂直角度散射光：細(xì)胞內(nèi)部顆粒及分葉狀況90°D，垂直角度去偏振散射 光，鑒別E與N第52頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第53頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天MAPSS法可鑒別白細(xì)胞亞群、異常細(xì)胞類(lèi)型，白細(xì)胞分類(lèi)不受有核紅細(xì)胞、血小板凝聚、未溶解紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片等干擾物質(zhì)影響。運(yùn)用這類(lèi)原理的血細(xì)胞分析儀：SF-3000、CD-3500、MEK-8118K、Diana-5和EXCELLTM-22等。第54頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天4、激光與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用（1）過(guò)氧化物酶（Peroxidase,Perox)染色通道過(guò)氧化物酶活性強(qiáng)度：E>N>M,L和B則無(wú)。（2）嗜堿性粒細(xì)胞/核分葉性（baso/lobul-arity)通道:除B外其他細(xì)胞僅剩裸核，不同細(xì)胞的裸核結(jié)構(gòu)不同，分葉越多散點(diǎn)越靠近橫軸右側(cè)，根據(jù)多分葉核和單個(gè)核的比例，可計(jì)算出左移指數(shù)。（3）未染色大細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)第55頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天5.雙鞘流動(dòng)力連續(xù)系統(tǒng)(DHSS)

用鎢光源流式細(xì)胞光吸收、化學(xué)染色和電阻抗法①WBC計(jì)數(shù)通道：電阻抗法

②嗜堿性粒細(xì)胞通道：專(zhuān)用染液

③WBC分類(lèi)通道：雙鞘流系統(tǒng)中，用流式細(xì)胞光吸收、電阻抗和細(xì)胞化學(xué)染色液聯(lián)合檢測(cè)除B以外的WBC。第56頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天DHSS技術(shù)：在流式通道中有2個(gè)鞘流裝置，細(xì)胞經(jīng)第1束鞘流后通過(guò)阻抗微孔測(cè)定細(xì)胞的真實(shí)體積，然后經(jīng)第2束鞘流后到達(dá)光窗，測(cè)定細(xì)胞的光吸收，分析細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。第57頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第58頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、成熟紅細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理第59頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞比積：原理通WBC計(jì)數(shù)紅細(xì)胞體積分布直方圖（一）電阻抗法

第60頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、血紅蛋白含量測(cè)定分光光度法3、各項(xiàng)紅細(xì)胞平均指數(shù)檢測(cè)根據(jù)RBC、HCT和HGB換算出來(lái)。第61頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天4、紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）不同大小的脈沖信號(hào)分別貯存在儀器內(nèi)裝計(jì)算機(jī)的不同通道，計(jì)算出相應(yīng)的體積及細(xì)胞數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理得到RDW。第62頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）流式細(xì)胞術(shù)光散射法1、光散射法紅細(xì)胞、血紅蛋白檢測(cè)原理

低角度(2°～3°)：測(cè)量紅細(xì)胞體積。高角度(5°～15°)：測(cè)定紅細(xì)胞血紅蛋白濃度。第63頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、紅細(xì)胞散點(diǎn)圖

是紅細(xì)胞體積與血紅蛋白濃度二維散點(diǎn)圖，反映光散射與細(xì)胞體積和血紅蛋白濃度之間的相互關(guān)系，能準(zhǔn)確區(qū)分小紅細(xì)胞等異常。線性體積/血紅蛋白濃度（V/HC)散點(diǎn)圖分為9個(gè)區(qū)。第64頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第65頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、血小板系列參數(shù)檢測(cè)原理第66頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）電阻抗法血小板計(jì)數(shù)（platelet,PLT）：隨紅細(xì)胞在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)。直方圖在2～28fl（不同儀器不一）。%

102030(fl)第67頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）激光散射法根據(jù)Mie同質(zhì)性球體光散射理論，球形化PLT通過(guò)激光照射區(qū)時(shí)，在高角度得到PLT折射指數(shù)（refactiveindex,RI)，與PLT密度有關(guān)（PLT:1.35~1.40,RBC:含有高濃度Hb，RI為1.35~1.44）；低角度得到血小板大小。此法可區(qū)分PLT和紅細(xì)胞。第68頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）流式細(xì)胞激光核酸熒光染色和電阻抗法紅細(xì)胞/血小板計(jì)數(shù)通道電阻抗法結(jié)果異常時(shí)，轉(zhuǎn)換至光學(xué)法核酸熒光染色網(wǎng)織紅細(xì)胞/血小板檢測(cè)通道。通過(guò)核酸熒光染色鑒別網(wǎng)織Plt、成熟Plt和成熟RBC.（四）固體激光散射法、電阻抗法和單克隆抗體熒光染色散射法第69頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、網(wǎng)織紅細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理第70頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）非熒光染料染色法用新亞甲藍(lán)對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA染色，采用VCS技術(shù)測(cè)定Ret。此外，應(yīng)用柔變輪廓分析技術(shù)，以非線性方式區(qū)分紅細(xì)胞群和成熟紅細(xì)胞群。

（二）熒光染料染色法（1）用聚次甲基染RNA和惡嗪染DNA法（2）用氧氮雜芑750染RNA法（3）用非對(duì)稱(chēng)菁熒光染料染RNA法。（4）用噻唑橙染網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA法。第71頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天

五、有核紅細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理第72頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.VCS法2.流式激光/熒光染色法（1）聚次甲基熒光染色法（2）碘化丙啶染色法3.白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類(lèi)通道衍生法4.阻抗法和噻唑橙熒光染色流式細(xì)胞術(shù)第73頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天六、血細(xì)胞分析儀工作流程

（電阻抗法）第74頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天第75頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天§4血細(xì)胞分析儀的類(lèi)型第76頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天根據(jù)對(duì)白細(xì)胞分析程度分為二分群、三分群、五分類(lèi)。根據(jù)自動(dòng)化程度又分為二大類(lèi)：半自動(dòng)儀器須手工稀釋標(biāo)本；全自動(dòng)儀器可直接用抗凝血進(jìn)樣。第77頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、半自動(dòng)二分群血細(xì)胞分析儀第78頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天①檢測(cè)速度為60個(gè)/h,儀器為雙通道，容易操作。②用血量少，準(zhǔn)確性、重復(fù)性好。③測(cè)量結(jié)果超過(guò)正常界限和直方圖不正常，可出現(xiàn)警示符號(hào)提示。1.儀器性能第79頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天④有質(zhì)控資料及標(biāo)本檢測(cè)資料貯存、手工鑒別、設(shè)備警告等軟件程序。⑤對(duì)儀器狀況可自動(dòng)監(jiān)測(cè)。第80頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.檢測(cè)項(xiàng)目

可檢測(cè)8～15項(xiàng)參數(shù)及3個(gè)直方圖，主要有WBC,RBC,Hb，PLT,MCV,MCH,MCHC等，并打印出白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板直方圖。第81頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天圖1．半自動(dòng)分析儀

這是一個(gè)容易操作的系統(tǒng)。接通電源后，儀器處于正常的操作待機(jī)狀態(tài)時(shí)，只要把20μl血液樣品在機(jī)外稀釋?zhuān)靹蚝蠓旁跇悠芳苌希聪掠?jì)數(shù)鍵它就可以對(duì)15種血液指標(biāo)和3個(gè)細(xì)胞直方圖進(jìn)行一次分析。測(cè)定完成后結(jié)果會(huì)立即在LCD上顯示并將結(jié)果打印出來(lái)。第82頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的測(cè)試程序1）機(jī)外手工加溶血?jiǎng)┓绞较葘?biāo)本（末梢血或抗凝經(jīng)脈血）用稀釋液進(jìn)行預(yù)稀釋?zhuān)ㄏ♂尡稊?shù)因儀器型號(hào)而異),然后按儀器說(shuō)明書(shū)要求將適量的溶血?jiǎng)┘尤胍严♂尩臉?biāo)本中混勻后上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，打印或記錄測(cè)試結(jié)果。這類(lèi)儀器如F-820、MEK-5108K。第83頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2）機(jī)內(nèi)自動(dòng)加溶血?jiǎng)┓绞较葘?biāo)本（末梢血或抗凝經(jīng)脈血）用稀釋液進(jìn)行預(yù)稀釋?zhuān)ㄏ♂尡稊?shù)因儀器型號(hào)而異),然后將已稀釋的標(biāo)本混勻后（溶血?jiǎng)┯蓛x器自動(dòng)定量注入）上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，打印或記錄測(cè)試結(jié)果。這類(lèi)儀器如AC-920(預(yù)稀釋通道）、BC-2000。第84頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、全自動(dòng)三分群血細(xì)胞分析儀第85頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天①檢測(cè)速度為60～80個(gè)/h,配上自動(dòng)裝置可連續(xù)吸取樣本，避免實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染。②兩種溶血素，即白細(xì)胞溶血素和紅細(xì)胞溶血素SLS-Hb法（無(wú)毒）③儀器線性范圍寬、重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高、變異范圍小。1.儀器性能第86頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天④有的設(shè)有浮球式絕對(duì)定量裝置，攜帶污染率幾乎為零。⑤自動(dòng)化程度高，對(duì)試劑污染、氣泡干擾、異物阻塞有監(jiān)控系統(tǒng)。有自動(dòng)報(bào)警系統(tǒng)。⑥有質(zhì)控資料及標(biāo)本檢測(cè)資料貯存等軟件程序。第87頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.檢測(cè)項(xiàng)目除二分群的15項(xiàng)參數(shù)外，還增加了中等大小白細(xì)胞比率（W-MCR)、中等大小白細(xì)胞計(jì)數(shù)（W-MCC)及大血小板比率（P-LCR)，達(dá)18項(xiàng)參數(shù)。3.代表儀器：CD-1700、CoulterONYX血細(xì)胞分析儀等。第88頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、全自動(dòng)五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀第89頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天①速度快，每小時(shí)110～150個(gè)標(biāo)本。②具有檢測(cè)有核紅細(xì)胞的功能。③專(zhuān)用幼稚細(xì)胞檢測(cè)通道和試劑。④多種分類(lèi)技術(shù)的使用使白細(xì)胞分類(lèi)更加精確，達(dá)到最低分類(lèi)鏡檢率。1.儀器性能第90頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天⑤強(qiáng)大的網(wǎng)絡(luò)功能及完善的數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，可開(kāi)展遠(yuǎn)程診斷，遠(yuǎn)程維護(hù)和質(zhì)控提供軟件支持。⑥高效、自動(dòng)的標(biāo)本資料管理及強(qiáng)大的工作平臺(tái)。⑦無(wú)錯(cuò)進(jìn)樣管理，包括穿刺進(jìn)樣，條碼識(shí)別和雙重樣本完整性探測(cè)器。第91頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天⑧儀器可與網(wǎng)織紅檢測(cè)儀、自動(dòng)進(jìn)樣儀、自動(dòng)涂片機(jī)相聯(lián)，形成自動(dòng)化模塊。2.檢測(cè)項(xiàng)目可檢測(cè)25項(xiàng)參數(shù)或更多。有些儀器可根據(jù)需要選擇不同檢測(cè)模式。3.代表儀器

SF-3000血細(xì)胞分析儀、MEK-811K+QA-810VK、EXCELTM22血細(xì)胞分析儀等。第92頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、全自動(dòng)五分類(lèi)連接網(wǎng)織紅細(xì)胞分析儀第93頁(yè),共104頁(yè)，2024年2月25日，星期天①準(zhǔn)確性高，通過(guò)對(duì)細(xì)胞RNA檢測(cè)比目測(cè)法更準(zhǔn)確、敏感。②精確度達(dá)97％以上。并可將網(wǎng)織紅細(xì)胞分類(lèi)為L(zhǎng)FR、MFR及HFR，對(duì)貧血、骨髓移植、白血病、放化療有重要意義。1.儀器性能第94頁(yè),