宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治2.垂直傳播(verticaltransmission):HBV、RV、HIV、CMV宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與12.垂直傳播(verticaltransmission):

HBV、RV、HIV、CMV2.垂直傳播(verticaltransmission):2感染途徑：呼吸道、消化道、經(jīng)皮膚（蟲媒）感染、血液傳播、泌尿生殖道感染、胎盤或產(chǎn)道感染感染途徑：呼吸道、3宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治4二、病毒感染的類型㈠隱性感染(inapparentinfection)subclinicalinfection㈡顯性感染(apparentinfection)1.急性感染(acuteinfection)2.持續(xù)性感染(persistentinfection)①慢性感染(chronicinfection)②潛伏感染(latentinfection)HSV→機(jī)體→急性口炎→三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞→口角→皰疹二、病毒感染的類型㈠隱性感染(inapparentinf5慢性感染：病程長病毒可檢出如HBV潛伏感染：可反復(fù)激活，急性發(fā)作病毒只有在急性發(fā)作時(shí)才被檢出如HSV慢發(fā)病毒感染：潛伏期長，發(fā)病后為亞急性進(jìn)行性直至死亡尋常病毒非尋常病毒prion麻疹病毒:SSPE;HIV:AIDS持續(xù)性感染慢性感染：病程長病毒可檢出如HBV潛伏感染：可反復(fù)激6三、病毒感染的致病機(jī)制㈠病毒感染對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用1.溶細(xì)胞性感染

殺細(xì)胞效應(yīng)(cytocidaleffect)--無包膜病毒無包膜病毒；阻斷細(xì)胞大分子合成；病毒蛋白的毒性作用；影響細(xì)胞溶酶體；細(xì)胞器的改變。用顯微鏡可以觀察到病毒感染的細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、變性、壞死、從瓶壁脫落等現(xiàn)象，稱為細(xì)胞致病變作用（cytopathiceffect，CPE）。三、病毒感染的致病機(jī)制無包膜病毒；阻斷細(xì)胞大分子合成；病毒蛋7宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治82.穩(wěn)定狀態(tài)感染(steadystateinfection):有包膜病毒(1)細(xì)胞表面出現(xiàn)病毒基因編碼的新抗原(2)如果胞膜表面的病毒蛋白有融合膜生物活性，則易造成細(xì)胞融合:形成多核巨細(xì)胞,如麻疹病毒2.穩(wěn)定狀態(tài)感染(steadystateinfectio93.細(xì)胞凋亡(cellularapoptosis):1972年Kerr;

腺病毒、HIV等→細(xì)胞→鼓泡、細(xì)胞核濃縮→凋亡小體(apopticbody)→電泳：階梯式DNA條帶。（2002年獲諾貝爾獎(jiǎng)）3.細(xì)胞凋亡(cellularapoptosis):104.基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化:整合（integration）→細(xì)胞增生(hyper-plasia)或轉(zhuǎn)化(transformation)1911年,Rous;Roussarcomavirus,

RSV.1966年獲諾貝爾獎(jiǎng)

(Rous1879~1970）4.基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化:(Rous1879~1970）11與人類惡性腫瘤密切相關(guān)的病毒有：⑴人乳頭瘤病毒（HPV）----宮頸癌⑵HBV、HCV--------原發(fā)性肝癌⑶EB病毒(EBV)----鼻咽癌、惡性淋巴瘤⑷人T細(xì)胞白血病病毒Ⅰ型（HTLV-Ⅰ）----白血病與人類惡性腫瘤密切相關(guān)的病毒有：125.包涵體(inclusionbody)形成：有些病毒感染細(xì)胞后，在細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性、大小數(shù)量不同的圓形或卵圓形斑塊結(jié)構(gòu)。5.包涵體(inclusionbody)形成：13㈡病毒感染的免疫病理作用:體液、細(xì)胞免疫1.抗體介導(dǎo)的免疫病理作用⑴靶細(xì)胞+抗體+補(bǔ)體→靶細(xì)胞溶解⑵Ag+Ab→Ag-Ab→沉積→Ⅲ型超敏反應(yīng)2.細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病理作用:CTL→殺傷靶細(xì)胞TDTH→細(xì)胞損傷3.抑制免疫系統(tǒng)的功能:⑴麻疹病毒、RV、CMV

→淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化⑵HIV→CD4+（TH）細(xì)胞的功能持續(xù)性感染、惡性腫瘤㈡病毒感染的免疫病理作用:體液、細(xì)胞免疫持續(xù)性感染、惡性腫瘤14第二節(jié)抗病毒免疫一、非特異性免疫(non-specificimmunity)1.遺傳因素(hereditablefactor):第二節(jié)抗病毒免疫一、非特異性免疫(non-specific152.屏障作用(actionofprotectivescreen):皮膚屏障2.屏障作用(actionofprotectivesc16粘膜屏障粘膜屏障17胎盤屏障母體子宮的基蛻膜，另一部分是胎兒的絨毛膜。胎盤屏障母體子宮的基蛻膜，另一部分是胎兒的絨毛膜。18血腦屏障血腦屏障19宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治203.吞噬細(xì)胞(phagocyte)和NK細(xì)胞：⑴巨噬細(xì)胞：⑵NK細(xì)胞(naturalkillercell):TNF-,TNF-

作用特點(diǎn)：

1）殺傷過程不受MHC限制，也不依賴抗體

2）對(duì)靶細(xì)胞無特異性

3）殺傷作用出現(xiàn)早；4h4）部分細(xì)胞因子可激活⑶中性粒細(xì)胞：對(duì)病毒感染無防御作用3.吞噬細(xì)胞(phagocyte)和NK細(xì)胞：⑴巨噬細(xì)胞：⑵214.干擾素(interferon,IFN):病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動(dòng)物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性的糖蛋白。4.干擾素(interferon,IFN):22宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治23⑴種類：抗原性⑵抗病毒機(jī)制：通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白起作用。⑴種類：抗原性⑵抗病毒機(jī)制：通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白起作24⑶抗病毒作用的特點(diǎn)：

a廣譜抗病毒

b

抑制病毒而不是殺病毒

c抗病毒作用具有種屬特異性

d間接抗病毒⑷IFN誘生劑(inducer):病毒、細(xì)菌內(nèi)毒素、原蟲、polyI:C⑶抗病毒作用的特點(diǎn)：⑷IFN誘生劑(inducer):病毒、25二、特異性免疫(specificimmunity)（一）體液免疫1.中和抗體(neutrolizingantibody):IgG、IgM、IgA（SIgA）2.非中和抗體(non-neutrolizingantibody):3.抗體介導(dǎo)對(duì)靶細(xì)胞的作用:⑴靶細(xì)胞+抗體+補(bǔ)體→細(xì)胞溶解⑵靶細(xì)胞+抗體（IgG-Fc）--NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞→靶細(xì)胞裂解：ADCC（二）細(xì)胞免疫(cellularimmunity)T、K、NK、M

病毒→機(jī)體→致敏T細(xì)胞CTL:穿孔素、細(xì)胞毒素TH：IFN、TNF、IL二、特異性免疫(specificimmunity)病毒→機(jī)26CTL殺傷病毒感染的靶細(xì)胞CTL殺傷病毒感染的靶細(xì)胞271.產(chǎn)生牢固免疫力:⑴全身性病毒感染⑵只有單一血清型的病毒感染2.產(chǎn)生短暫免疫力:⑴局部性病毒感染⑵病毒血清型多⑶病毒抗原易發(fā)生變異三、抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間1.產(chǎn)生牢固免疫力:三、抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間28第20章病毒感染的診斷與防治

LaboratoryDiagnosisandprevention第20章病毒感染的診斷與防治

Laboratory29一、標(biāo)本的采集與送檢：用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本：采取病程初期或急性期標(biāo)本、防止病毒滅活血清學(xué)診斷的標(biāo)本：雙份血清(pairedserum)第一節(jié)病毒感染的檢查方法LaboratoryDiagnosis一、標(biāo)本的采集與送檢：第一節(jié)病毒感染的檢查方法30二、常規(guī)分離與鑒定動(dòng)物接種animalinoculation雞胚接種egginoculation組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法二、常規(guī)分離與鑒定動(dòng)物接種animalinoculatio31病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)1、CPE2、紅細(xì)胞吸附正常細(xì)胞病變細(xì)胞病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)1、CPE2、紅細(xì)胞吸附正常細(xì)胞病變細(xì)32病毒數(shù)量和感染性測(cè)定1、蝕斑試驗(yàn)2、LD50

或TCID50感染雞胚動(dòng)物或細(xì)胞后，引起50%發(fā)生死亡或病變的最小量病毒感染單層細(xì)胞后，產(chǎn)生的局限性病灶，稱蝕斑，蝕斑是由一個(gè)感染性病毒體復(fù)制形成的，稱蝕斑形成單位，病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位(plaqueformingunit,PFU)來表示病毒數(shù)量和感染性測(cè)定1、蝕斑試驗(yàn)2、LD50或TCID533

病毒的血清學(xué)診斷中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)免疫擴(kuò)散等三、病毒感染的血清學(xué)診斷(serodiagnosis)

病毒的血清學(xué)診斷中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)免疫擴(kuò)散等三34四、病毒的快速診斷(rapiddiagnosis)光鏡-----包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學(xué)技術(shù)雜交SouthernblotPCRNorthernblot四、病毒的快速診斷(rapiddiagnosis)光鏡--35第二節(jié)病毒感染的防治免疫預(yù)防(immunoprophylaxis)人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunity)滅活疫苗：乙腦疫苗狂犬疫苗流感滅活疫苗減毒活疫苗：脊髓灰質(zhì)炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗風(fēng)疹疫苗HAV疫苗亞單位疫苗：InactivedvaccineLiveattenuatedvaccine牛痘疫苗流感HBV第二節(jié)病毒感染的防治免疫預(yù)防(immunop