關(guān)于實(shí)驗(yàn)五血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)與肥達(dá)實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浺谎獫{凝固酶實(shí)驗(yàn)二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第2頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天熟悉血漿凝固酶試驗(yàn)的意義。目的：一血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)材料：菌種：金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌其他：新鮮兔血漿(或人血漿)、

NS等第3頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天纖維蛋白原+血漿凝固酶不溶性纖維蛋白玻片法原理：一血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)細(xì)菌形成凝塊黏附于細(xì)菌第4頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天

充分混合，觀察結(jié)果。結(jié)果：陽(yáng)性——無(wú)法混勻，細(xì)菌在血漿中聚集成團(tuán)塊；陰性——呈均勻混濁；

血漿+NS+細(xì)菌1血漿+NS+細(xì)菌2

方法：一血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌意義：

鑒定致病性與非致病性葡萄球菌。第5頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天目的：二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)1、掌握肥達(dá)試驗(yàn)的原理，操作方法及結(jié)果判斷。2、熟悉其臨床意義。第6頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)材料：1．標(biāo)本感染待測(cè)血清（稀釋度1：20）。2．試劑傷寒沙門菌菌體抗原（O）及鞭毛抗原（H）、甲型副傷寒沙門菌鞭毛抗原及乙型副傷寒沙門菌鞭毛抗原。3．其他微孔反應(yīng)板、50μl移液器、吸頭、水浴箱等。第7頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天原理：一、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第8頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天（1）在微孔反應(yīng)板編號(hào)4排6列。（2）每孔加入生理鹽水50μl。（3）吸取待檢血清50μl加入每排第1孔，連續(xù)倍比稀釋到第5孔。從第5孔吸出50μl棄去。第6孔為對(duì)照管。這樣每排從第1孔至第5孔的血清稀釋度為1：40,1：80,1：160，1：320,1：640。（4）每排每孔加入對(duì)應(yīng)的傷寒菌液50μl。（5）混勻，置于52℃水浴箱中1h后觀察。方法：二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第9頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天50實(shí)驗(yàn)方法5050505050505050501:401:801:1601:3201:64050棄掉1234550650NS(μl

)待測(cè)血清對(duì)照管50505050①②③④滅活的傷寒菌液50μl

50μl

50μl

50μl

50μl

50μl

抗體稀釋度徹底混勻52℃,1h二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第10頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天結(jié)果：

先觀察對(duì)照管，應(yīng)無(wú)凝集現(xiàn)象?！?+++”—細(xì)菌全部凝集，液體清澈，孔底形成大片凝集物?！?++”—細(xì)菌大部分凝集，液體澄清，孔底明顯凝集物?！?+”—細(xì)菌部分凝集，液體半澄清，孔底有明顯凝集物“+”—少量細(xì)菌凝集，液體較混濁，孔底少量凝集物。“-”—液體混濁，細(xì)菌無(wú)凝集。與對(duì)照孔相同。二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第11頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天

效價(jià)（滴度）的判定：

產(chǎn)生明顯凝集反應(yīng)（++）的最高血清稀釋度為血清中所測(cè)抗體的效價(jià)。效價(jià)愈高，表示血清中所含該抗體愈多。如血清的最低稀釋度仍無(wú)凝集，或血清效價(jià)低于1：80，則為陰性，應(yīng)報(bào)“<1：80”；如果血清的最高稀釋度1：1280仍呈“++”或更強(qiáng)凝集，則血清效價(jià)應(yīng)報(bào)“>1：1280”。二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第12頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果+很小的凝集顆粒混濁-無(wú)凝集現(xiàn)象與對(duì)照相同++小、部分凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清第13頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天H與O抗體的性質(zhì)及其消長(zhǎng)意義預(yù)防接種；非特異性回憶反應(yīng)感染早期、其他沙門菌引起的交叉反應(yīng)患腸熱癥可能性大高低高出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間長(zhǎng)IgGH抗體低高高出現(xiàn)較早，維持時(shí)間短IgMO抗體體內(nèi)出現(xiàn)情況體內(nèi)出現(xiàn)情況抗體類型第14頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測(cè)血清的滴度效價(jià)第15頁(yè),共17頁(yè)，2024年2月25日，星期天思考題1.李某發(fā)熱、全身不適，體溫持續(xù)升高，最高達(dá)40℃，采血進(jìn)行肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果是O抗體凝集效價(jià)是1:80，