培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)常用的消毒方法常用的滅菌方法培養(yǎng)基無菌技術(shù)煮沸消毒巴氏消毒化學(xué)藥劑消毒紫外線消毒濕熱滅菌干熱滅菌灼燒滅菌按物理性質(zhì)劃分按功能劃分微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)按組成成分劃分基本成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽特殊需求：維生素（如乳酸桿菌）、堿基等溫故知新：培養(yǎng)基的配制和無菌技術(shù)問題1：微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、形體微小，眼睛看不到，若想看某種純凈的微生物,當(dāng)我們掌握了培養(yǎng)基配制和無菌技術(shù)后，我們接下來該如何操作？第1章

發(fā)酵工程第2節(jié)

微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（第2課時(shí)）純培養(yǎng)物培養(yǎng)物純培養(yǎng)在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體獲得純培養(yǎng)物的過程由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)純培養(yǎng)的

步

驟1.概念【自主探究】請(qǐng)結(jié)合教材P10-11面，思考下列問題：1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？2.消毒和滅菌的區(qū)別是什么？3.為了防止雜菌污染，具體措施有哪些？（四個(gè)方面）4.如何針對(duì)不同的作用對(duì)象選擇合適的消毒/滅菌方法？——酵母菌的純培養(yǎng)平板劃線法、稀釋涂布平板法1)原理微生物群分散或稀釋單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落繁殖2)獲得單菌落的方法：

單個(gè)微生物在培養(yǎng)基表面或內(nèi)部形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。2.實(shí)驗(yàn)稱取去皮的馬鈴薯200g切成小塊加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛用紗布過濾濾液中加入20g葡萄糖，15~20g瓊脂用蒸餾水定容至1000mL得到濾液3.純培養(yǎng)的步驟：1.配制培養(yǎng)基：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加棉塞包上牛皮紙，并用皮筋勒緊壓力100kPa、溫度為121℃的條件下，滅菌15~30min取5~8套培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿疊成一束用幾層牛皮紙包緊放入干熱滅菌箱內(nèi)，160~170℃滅菌2h2.滅菌：3.純培養(yǎng)的步驟：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。（二）純培養(yǎng)的步驟：3.倒平板：倒平板注意事項(xiàng)：溫度：50℃左右冷凝后平板倒置操作：在酒精燈火焰附近（二）純培養(yǎng)的步驟：3.倒平板：?jiǎn)栴}1：為什么需要使錐形瓶的瓶口過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基問題2：平板冷凝后，為什么要將平板倒置？防止培養(yǎng)基表面的水分過度揮發(fā);防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染問題3：怎么確定所倒平板未被雜菌污染？將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12～24?h，觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。平板劃線法單個(gè)細(xì)胞微生物群?jiǎn)蝹€(gè)菌落連續(xù)劃線稀釋分散生長(zhǎng)繁殖①灼燒接種環(huán)，直至接種環(huán)金屬絲燒紅⑥將皿蓋打開一條縫隙，將沾有菌種接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃3-5條平行線，蓋上皿蓋。⑤試管口通過火焰，并塞上棉塞②在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔出酵母菌培養(yǎng)液試管棉塞③試管口通過火焰④在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。4.接種和分離酵母菌：劃3個(gè)平板（重復(fù)實(shí)驗(yàn)）1個(gè)不劃線（空白對(duì)照）12345連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法平板劃線法注意事項(xiàng)（1）接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基

不同位置連續(xù)劃線多次（2）劃線首尾不能相接（3）每次劃線前灼燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌（4）劃線操作結(jié)束后，仍需灼燒接種環(huán)平板劃線法4.接種和分離酵母菌：平板劃線法4.接種和分離酵母菌：?jiǎn)栴}4：在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。問題5：在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。問題6：為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？1123接種前，殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)基2殺死殘留菌種，確保每次劃線菌種來自上次劃線的末端3劃線結(jié)束后，殺死殘留菌種，避免環(huán)境污染和感染操作者接種環(huán)三個(gè)不同時(shí)期灼燒的目的劃線前劃線時(shí)劃線后平板劃線法（二）純培養(yǎng)的步驟：4.接種和分離酵母菌：（二）純培養(yǎng)的步驟：5.培養(yǎng)酵母菌：

完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-28h。既可以防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染作對(duì)照，該培養(yǎng)皿無菌落說明培養(yǎng)基沒有污染酵母菌的純培養(yǎng)2.接種和分離酵母菌1.制備培養(yǎng)基3.培養(yǎng)酵母菌①配制培養(yǎng)基（馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、水）②滅菌③倒平板（在酒精燈火焰附近操作）培養(yǎng)基：濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌鍋）培養(yǎng)皿：干熱滅菌（干熱滅菌鍋）用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基上用平板劃線法接種平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)課堂小結(jié)

1.微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基，又要防止雜菌污染。判斷下列相關(guān)表述是否正確。（1）培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利。（）（2）消毒和滅菌的殺菌程度存在差異。（）（3）微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物。（）×√×

2.日常生活中保存食品的方法有哪些？這些方法是如何阻止或抑制微生物生長(zhǎng)的？干制——降低食品的水分含量；腌制——通過食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，