莨菪烷類抗膽堿藥物的分析一、典型藥物

由莨菪烷衍生氨基醇和不同有機(jī)酸縮合成酯類生物堿,常見顛茄生物堿類和古柯生物堿第一節(jié)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)第2頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）α-（羥甲基）苯乙酸8-甲基-8-氮雜雙環(huán)〔3，2，1〕-3-辛酯硫酸鹽9-甲基-3-氧雜-9-氮雜三環(huán)[3.3.1.02,4]壬烷-7-醇(-)-alpha-(羥甲基)苯乙酸酯第3頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

硫酸莨菪堿

氫溴酸山莨菪堿

第4頁,共35頁，2024年2月25日，星期天1.水解性結(jié)構(gòu)中具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。

阿托品，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。

莨菪醇(Ⅰ)莨菪酸(Ⅱ)二、主要理化性質(zhì)第5頁,共35頁，2024年2月25日，星期天2.堿性

阿托品和東莨菪堿的結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子,具有較強(qiáng)的堿性,易與酸成鹽。如阿托品的pKb1為4.35。東莨菪堿三元氧環(huán)的存在，N上孤電子產(chǎn)生顯著立體效應(yīng)（增強(qiáng)了空間位阻），使N原子不易給出電子，堿性較弱（與莨菪堿比）。第6頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

3.旋光性

氫溴酸東莨菪堿結(jié)構(gòu)中含有不對稱碳原子，呈左旋體，比旋度為-24ο至-27ο，而阿托品結(jié)構(gòu)中雖然也含有不對稱碳原子，但因外消旋化而為消旋體，無旋光性。利用此性質(zhì)可區(qū)別阿托品與東莨菪堿。

硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿第7頁,共35頁，2024年2月25日，星期天一、托烷生物堿類Vitaili（維特立）反應(yīng)

阿托品、東莨菪堿、山莨菪堿等托烷類生物堿均顯莨菪酸結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng)

第二節(jié)鑒別試驗(yàn)生物堿水解莨菪酸發(fā)煙硝酸

三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體KOH有色的醌型產(chǎn)物第8頁,共35頁，2024年2月25日，星期天莨菪酸用發(fā)煙硝酸加熱處理，發(fā)生硝基化反應(yīng)，生成三硝基衍生物；再加氫氧化鉀醇液和一小粒固體氫氧化鉀，顯深紫色，此反應(yīng)稱為Vitaili反應(yīng).為莨菪酸的特征反應(yīng)。第9頁,共35頁，2024年2月25日，星期天二、與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)

本類藥物水解后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。其反應(yīng)式為：第10頁,共35頁，2024年2月25日，星期天三、與生物堿顯色劑或沉淀劑反應(yīng)

本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。生物堿類酸性水溶液中，常可與重金屬鹽類（碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘-碘化鉀、二氯化汞等）和大分子的酸類（磷鉬酸、硅鎢酸等）沉淀劑反應(yīng)生成難溶鹽或、不溶性鹽、復(fù)鹽或配位化合物沉淀，而可作鑒別。第11頁,共35頁，2024年2月25日，星期天生物堿沉淀試劑反應(yīng)條件及結(jié)果碘化鉍鉀試液橙紅或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液在酸性或堿性溶劑中生成白色或淡黃色沉淀三硝基苯酚試液結(jié)晶性沉淀并有特定熔點(diǎn)硅鎢酸試液白色、淡黃色或黃棕色沉淀磷鎢酸試液酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀第12頁,共35頁，2024年2月25日，星期天【氫溴酸東莨菪堿鑒別】

取本品約10mg，加水1ml溶解后，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性后，加氯仿5ml,振搖，分取氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)屑佣然囊掖既芤海ㄈ《然?g，加60％乙醇使成100ml）1.5ml,即生成白色沉淀（與阿托品及后馬托品的區(qū)別）。

第13頁,共35頁，2024年2月25日，星期天四、光譜鑒別1.紫外光譜法：一般通過比較藥物的或吸收光譜的一致性來進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)。2.紅外光譜法：CHP收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進(jìn)行鑒別。第14頁,共35頁，2024年2月25日，星期天五、色譜法

一般用于已知生物堿的鑒別，主要有TLC、HPLC、GC、PC等第15頁,共35頁，2024年2月25日，星期天六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在通過加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色第16頁,共35頁，2024年2月25日，星期天一、氫溴酸東莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查洋金花粗粉乙醇/滲漉滲漉液減壓蒸餾浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取總生物堿Na2CO3,CHCl3/分離東莨菪堿HBr/成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）75%C2H5OH/精制成品根據(jù)其制備工藝，本品可通過酸度、其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進(jìn)行控制第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查第17頁,共35頁，2024年2月25日，星期天1.酸度東莨菪堿堿性很弱，對石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。如氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿鹽、通過其5%的水溶液pH為4.0~5.5，可控制酸性雜質(zhì)第18頁,共35頁，2024年2月25日，星期天2.易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色第19頁,共35頁，2024年2月25日，星期天示例13-6氫溴酸東莨菪堿易氧化物檢查易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色第20頁,共35頁，2024年2月25日，星期天3.其它生物堿本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。第21頁,共35頁，2024年2月25日，星期天本品水溶液檢查方法：第22頁,共35頁，2024年2月25日，星期天其他生物堿還常用TLC和HPLC法檢查ab第23頁,共35頁，2024年2月25日，星期天二、硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查CHP用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保留時(shí)間來控制雜質(zhì)限度第24頁,共35頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)含量測定莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測定方法要專屬、靈敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色譜法第25頁,共35頁，2024年2月25日，星期天UV

一、酸性染料比色法在一定的pH條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進(jìn)而可用分光光度法進(jìn)行測量（一）原理第26頁,共35頁，2024年2月25日，星期天酸性染料磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，且可以被有機(jī)溶劑定量萃取，通過測定有機(jī)相中有色離子對的特征波長處的吸光度，即可進(jìn)行含量測定第27頁,共35頁，2024年2月25日，星期天（二）影響因素1.水相最佳pH值的選擇：使得BH+和In-最多第28頁,共35頁，2024年2月25日，星期天水相最佳pH第29頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

2.酸性染料及其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量一般認(rèn)為對測定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。但濃度過高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測定結(jié)果。第30頁,共35頁，2024年2月25日，星期天磺酸酞類指示劑溴麝香草酚藍(lán)(BTB)bromthymolbluepH6.0~7.6（黃~藍(lán)）溴甲酚綠(BCG)bromcresolgreenpH3.6~5.2（黃~藍(lán)）第31頁,共35頁，2024年2月25日，星期天3.有機(jī)溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想一般應(yīng)選擇對有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子對萃取效率高、能與離子對形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。第32頁,共35頁，2024年2月25日，星期天4.水分的影響：第33頁,共35頁，2024年2月25日，星期天5.酸性染料里面的有色雜質(zhì)影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去第34頁,共35頁，2024年2月25