標準品和校準品的概念標準品和校準品的概念傳統(tǒng)的臨床檢驗，要使檢驗結(jié)果可靠或有依據(jù)，往往有一個標準品(Standard)。以臨床化學檢驗的比色測定為例，常作三個檢測：空白、標準、測定。用空白液調(diào)整吸光度為零，讀出測定比色液和標準比色液的吸光度，分別為As和Au；已知標準液濃度為Cs。在一定范圍內(nèi)，某分析物濃度和吸光度呈良好比例關系。為了克服純標準液和病人樣品間的基體差異，20年前開始引用具有與病人樣品基體相似的校準品替代標準品，用于日常工作。由于以往在使用標準品時不強調(diào)它的專用性，國內(nèi)在應用校準品時忽略了它的專用性。任何方法或儀器、試劑使用一個校準品，嚴重影響檢驗質(zhì)量。一。標準液的定值

一般而言，檢驗工作使用的標準品屬應用標準。配制或供應這類標準品的實驗室或廠商具有符合質(zhì)量標準的純品。稱取一定量的純品，然后將其溶解，在容量瓶內(nèi)用溶劑稀釋至容積刻度，混勻，標準液配制完成。由稱量法獲得的稱量值和容量法配制的容積，計算出該標準品濃度。檢定部門抽樣測定，結(jié)果在規(guī)定范圍內(nèi)屬合格。即使測定檢定結(jié)果在范圍的上、下限，也不能將實測值作為標準值。因為測定值的可靠性取決于檢定方法，一般的分析方法的可靠性不如分析化學公認的稱量法和容量法。所以標準品的定值由稱量和容積計算確定。檢定不合格即報廢，決不可將實測值替代修正。

二。校準品的定值1．校準值隨方法而異如前述，由于純標準液和新鮮病人標本間的基體差異，以標準液標化常用方法后，常用方法檢測病人標本的結(jié)果和參考方法結(jié)果的可比性很差。參見圖2-

。為了克服基體效應，推薦使用校準品。校準品的大多來源為人的樣品混合物，如混合血清。本身內(nèi)含被檢分析物，制備時可添加某些分析物增加含量。校準品中被檢分析物的含量無法由稱量法和容量法確定，只能倚賴于分析方法。校準品的校準值必須取決于分析方法或檢測系列。2．新鮮病人標本是最佳校準品

由于所有校準品都是處理過的樣品，和新鮮病人標本有著基體差異。若使用公認的參考方法去標化測定校準品，測定程序是嚴密的，測定值是可靠的。但使用該測定值去校準常規(guī)的檢測系列時，校準品中被檢分析物參與反應時的表現(xiàn)明顯不同于新鮮病人標本，不能將參考方法系列的準確度通過校準品傳遞給病人標本?？蓞⒁妶D2-

。須明確的，所有用于檢驗中的檢測方法、儀器、試劑等都是用來檢測病人新鮮標本的，不是用來檢測校準品這樣的處理過樣品。如果先用公認的參考方法檢測病人標本，再以具有參考值的病人標本去校準某檢測系列（包括方法、試劑、儀器），此時該檢測系列再檢測其他新鮮病人標本時，這些病人標本結(jié)果的溯源性可上溯至公認的參考方法。也即用新鮮病人標本是校準檢測系列的最佳校準品。用這種方式校準，能使同一個檢測系列在不同實驗室檢測新鮮病人標本時，檢驗結(jié)果在實驗室間具可比性。一些大公司正是按照這樣的認識為校準品定值。三、原則上，以具有參考值的新鮮病人標本去校準某檢測系列（包括方法、試劑、儀器）后，檢測系列再去檢測候選的校準品（處理過），得到的檢測值為初始校準值。以初始校準值反過來再校準組合的檢測系列后，該檢測系列又去檢測病人的新鮮標本。觀察病人標本的檢測值是否和參考方法的測定值具良好的可比性。實踐說明，只有不斷地調(diào)整校準值，直至用該校準值校準指定的檢測系列（加上具有校準值的校準品，即組合成檢測系統(tǒng)）后，檢測系統(tǒng)再檢測病人標本，得到的測定值和病人標本的參考方法測定值具有滿意的可比性（測定值和參考值間的偏倚≤2%）。此時，校準品的校準值可以確認。

本文來自檢驗地帶網(wǎng)1．校準值不是測定值，是糾正的調(diào)整值(CorrectedValue)

廠商的校準品定值方案極為嚴密。為了便于說明問題，以某公司的定值方案為例，定值的校準品是人血清。1）準備一批血清樣品，內(nèi)含被檢分析物含量不同，可反映所需的病人結(jié)果可報告范圍。將它們離心、過濾，分裝后深低溫保存。由參考實驗室用公認的參考方法和標準品或參考品，對這些血清檢測定值。這些血清是公司的一級“參考品”，參考方法對血清的定值猶如參考值，是確定校準品校準值的依據(jù)。2）制備一大批侯選校準品。由參考實驗室也為之定值。邀請多家具有指定的相同型號儀器的實驗室（包括公司的實驗室）參與工作。指定使用公司某型號的試劑盒（批號任意）及檢測程序。校準目標是：公司提供的儀器、試劑和方法系列（加上校準品即為檢測系統(tǒng)）對病人樣品的檢測結(jié)果和參考方法對病人樣品檢測結(jié)果具可比性。首先，用侯選校準品的定值對檢測系列校準后，檢測一級參考品的血清。由于侯選校準品和病人樣品間的基體差異，以它的參考實驗室定值對檢測系統(tǒng)校準后，檢測系統(tǒng)對病人樣品的檢測結(jié)果必然和這些血清已有的參考值有偏倚。要使組成的檢測系統(tǒng)實現(xiàn)校準目標，唯一方法是調(diào)整侯選校準品的校準值。經(jīng)反復檢測和調(diào)整、統(tǒng)計，最終實現(xiàn)校準目標時的校準值，為該校準品的定值。這個校準品是公司的一級校準品，是公司內(nèi)部具有可溯源性的第一代的校準品，不外售。3）以后公司在生產(chǎn)供應給客戶的校準品時，生產(chǎn)質(zhì)量規(guī)格相同于一級校準品，定值方案也相同于上述步驟；但此時分發(fā)給各實驗室的一級校準品已具有了真正校準該檢測系統(tǒng)的校準值。各實驗室的檢測系統(tǒng)被一級校準品校準后，檢測一級參考品血清和新校準品。首先確認各系統(tǒng)對一級參考品血清檢測結(jié)果和原有的血清參考值具良好的可比性，說明一級校準品有效。再以新校準品的定值去校準各系統(tǒng)后，各系統(tǒng)再檢測一級參考品血清和一級校準品，觀察檢測結(jié)果。若能實現(xiàn)校準目標，校準確認，則新校準品的定值為它的校準值。在實踐中血清結(jié)果往往仍然出現(xiàn)偏倚，必須對新校準品的定值略作調(diào)整，反復檢測，直至實現(xiàn)校準目標，調(diào)整的最佳值為該批校準品的校準值。此時這批校準品可供市售。4）為使公司供應的各批校準品間具可比性，以后對每批新校準品定值時，

本文來自檢驗地帶網(wǎng)須使用已上市的校準品、即將過期的校準品、以及即將上市的校準品當作控制品，隨同一級校準品和一級參考品血清一起被檢測。它們的檢測結(jié)果須和原校準值的偏倚小于某規(guī)定的范圍（如不大于2%），方可認可這批校準品的校準值（這即為校準認可的要求）。5）用這樣的程序制備的校準品，專用于指定的某公司型號的儀器、試劑、方法和檢測程序組成的檢測系統(tǒng)。因此校準品只能為這樣的系統(tǒng)服務，起校準作用，不能對其他系統(tǒng)作校準。2．具多個校準值的校準品

專門供應試劑盒的廠商，為了使他們的試劑盒用于各種類型、型號的儀器和方法，也同時為客戶提供校準品。說明書告訴客戶，使用他們的校準品，按公司指定校準您原系統(tǒng)的校準值去校準系統(tǒng)，可以使新組合的檢測系統(tǒng)（原儀器、方法、檢測程序，新試劑和新校準品）的病人標本檢測結(jié)果和原配套檢測系統(tǒng)的病人標本檢測結(jié)果具可比性。由于各公司的原檢測系統(tǒng)，從試劑、校準品、儀器都有各自特點，形成了各檢測系統(tǒng)間的差異。而這類試劑廠商專門針對客戶不同檢測系統(tǒng)，在替用他們的試劑時強調(diào)了替換后必須用他們的校準品，而且必須按校準品說明書上原系統(tǒng)名稱下指定的校準值校準新系統(tǒng)，可使新系統(tǒng)對病人樣品的檢測結(jié)果和原系統(tǒng)結(jié)果具可比性。同一個校準品適用于不同系統(tǒng)必須有不同的校準值，這樣的做法充分說明校準值的專用特性。決不能一個校準品、一個校準值、一種試劑盒用于各種不同的儀器；也不能一個校準品、一個校準值，用于不同的、已具有原試劑配套的儀器系列；無論哪一種方式均使病人樣品的檢測結(jié)果不可靠，也不具有溯源性。討論]轉(zhuǎn)貼：標準物質(zhì)與核查標準的概念與應用

近期論壇上，網(wǎng)友<不會游泳的魚>發(fā)起的《國家標準品和質(zhì)控品的區(qū)別》的討論，很有意思。許多朋友的帖子也是說的很明白。經(jīng)過思考，我也寫了一篇討論帖子，題目是《標準物質(zhì)與核查標準的概念與應用》。我為什么選用“標準物質(zhì)和核查標準”名稱，它與“標準品和質(zhì)控品”是不是一回事，等等，請朋友們看看我的帖子后，就會知道其中的緣由。

一、關于標準物質(zhì)—標準品

我用ELISA試劑盒為例題，介紹情況如下。

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試劑生產(chǎn)廠家，每個項目（如HBsAg、抗—HCV

EIA等）的申請報批就不說了。獲得生產(chǎn)許可證后就可以進入批生產(chǎn)。每生產(chǎn)一個批號的產(chǎn)品，就要申報、等待國家檢定所派員現(xiàn)場抽樣、同時貼上封條封存該批號的全部庫存產(chǎn)品、等待檢定結(jié)果報告。

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檢定所按時用已知血清型確定為陽性和陰性的組合血清盤（標準血清盤）進行檢定檢測，然后發(fā)出檢定結(jié)果報告。

說明：

（1）檢定所用的已知血清型確定為陽性和陰性的組合血清盤（標準血清盤），應當是國家級標準物質(zhì)—標準品。

（2）鑒定報告：包括陰性符合率、陽性符合率、…等等。

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生產(chǎn)商接到報告、并由檢定所派員現(xiàn)場啟封、按數(shù)量發(fā)給試劑盒合格證標簽、每盒貼上合格封口標簽和防偽標簽。驗貼完畢后，即可發(fā)貨給用戶單位。檢測結(jié)果。

當年，我寫了一篇稿子、題名為《丙型肝炎抗體篩檢異同性與EIA試劑質(zhì)量評價方法探析》，刊登在<預防醫(yī)學情報雜志>（1997年第13卷第2期，75頁）上，歡迎查閱。

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當時，我還發(fā)現(xiàn)另一個有趣的現(xiàn)象，即：用底物TMB的試劑，對預期陽性血清檢出率高、但是對預期陰性血清的假陽性率也高；反之，用OPD為底物的試劑，對預期陰性血清的假陽性率低（特異度高）、但是，對預期陽性血清的假陰性率也高（靈敏度低）。這個“有趣”的現(xiàn)象，當年我曾有關注，一是，底物TMB的質(zhì)量很重要，用進口正牌TMB配制為底物的試劑，對預期陰性血清的假陽性率明顯低于采用所謂國產(chǎn)TMB自行配制底物試劑。其間，我用過法國、荷蘭正牌TMB為底物的丁肝、丙肝試劑，其陰性與陽性血清的無色與顯色的目測視覺“一目了然、清清楚楚”，罕有“似陰非陰、似陽非陽”；很少見“可疑”樣本。一晃10年過去了，不知道現(xiàn)在國產(chǎn)TMB的EIA試劑對陰性與陽性樣本的顯色效果是否已有改進？

二、核查標準（質(zhì)控品）概念

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什么是核查標準（或質(zhì)控品）：以下引自《實驗室認可與管理基礎知識》書中講解如下。

（1）核查標準，是“為控制測量系統(tǒng)，必須排除因被測對象變異帶來的測量結(jié)果的偏差。為此，就需要專門制作一種穩(wěn)定的，變異很小的儀器、樣品或其它物品來代替被測對象，這就是核查標準。”

（2）GB/T19022-2000(ISO10012-2:1997)標準中有如下表述：“為了得到組內(nèi)變動性和組間變動性的量度，我們對一個穩(wěn)定的被測物品長期進行反復測量，這種被測物品就是核查標準?！?/p>

（3）美國相關專著中的論述是：“核查標準提供了一種表征測量過程狀態(tài)的手段，通過在相當長的周期內(nèi)和在變化的環(huán)境條件下，對核查標準進行重復測量而得到表征測量過程狀態(tài)的目的”。

《實驗室認可與管理基礎知識》，由中國實驗室國家認可委員會編，相關章節(jié)筆者已掃描、制成.pdf文檔可供參閱，請進入/，單擊、打開<統(tǒng)計控制>文件夾，點擊《實驗室認可與管理基礎知識》_九_內(nèi)部質(zhì)量控制.pdf1.9MB，即可閱讀或下載。

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對核查標準的要求與用途：

（1）“測量范圍、準確度等級等指標應接近于被測對象，而穩(wěn)定性應比實際被測對象好。制作控制圖的過程參數(shù)就是通過對同一核查標準進行長期反復測量得到的?！?/p>

（2）“根據(jù)長期測量的數(shù)據(jù)庫，計算分析出這一測量過程的標準差，同時也就掌握了測量過程的變動性。當變異處于允許的測量偏差（即3西格瑪）范圍內(nèi)時，我們認為過程受控，即屬于正常變異；否則測量過程失控，即存在異常變異”。

三、標準物質(zhì)包括核查標準（或質(zhì)控品）

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標準物質(zhì)定義

國家標準<標準物質(zhì)管理辦法>（1987年7月10日國家計量局發(fā)布）定義:標準物質(zhì)是指用于統(tǒng)一量值的標準物質(zhì)。包括化學成分分析標準物質(zhì)、物理特性與物理化學特性測量標準物質(zhì)和工程技術特性測量標準物質(zhì)。

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標準物質(zhì)定級：<標準物質(zhì)管理辦法>中分為2級，即：

（一）一級標準物質(zhì)

⒈用絕對測量法或兩種以上不同原理的準確可靠的方法定值。在只有一種定值方法的情況下，用多個實驗室以同種準確可靠的方法定值；

⒉準確度具有國內(nèi)最高水平，均勻性在準確度范圍之內(nèi)；

⒊穩(wěn)定性在一年以上或達到國際上同類標準物質(zhì)的先進水平；

⒋包裝形式符合標準物質(zhì)技術規(guī)范的要求。

（二）二級標準物質(zhì)

⒈用與一級標準物質(zhì)進行比較測量的方法或一級標準物質(zhì)的定值方法定值；

⒉準確度和均勻性未達到一級標準物質(zhì)的水平，但能滿足一般測量的需要；

⒊穩(wěn)定性在半年以上，或能滿足實際測量的需要；

⒋包裝形式符合標準物質(zhì)技術規(guī)范的要求。

3標準物質(zhì)的用途

從標準物質(zhì)用途可以理解核查標準（或質(zhì)控品）也應當納入標準物質(zhì)范圍。

⒈校準儀器：常用的光譜、色譜等儀器在使用前需要使用標準物質(zhì)對儀器進行檢定，檢查儀器的各項指標，如靈敏度、分辨率、穩(wěn)定性等是否達到要求。在使用時用標準物質(zhì)繪制標準曲線校準儀器，測試過程中修正分析結(jié)果。⒉評價方法：用標準物質(zhì)考察一些分析方法的可靠性。⒊過程控制：分析過程中同時分析核查標準（或質(zhì)控品），通過對核查標準進行重復測量而得到表征測量過程狀態(tài)的目的。也見本文的二、關于核查標準（或質(zhì)控品）、1

什么是核查標準（或質(zhì)控品）的表述。

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質(zhì)控品（核查標準）屬于哪一級？參考<3標準物質(zhì)用途3.過程控制>的描述，是否可以理解：常規(guī)臨床檢驗用的質(zhì)控品（核查標準），相當于二級標準物質(zhì)就可以了。如果是校準儀器、評價方法，則務須應用一級標準物質(zhì)。

四、質(zhì)控品的來源

有這么一句話，“如果沒有商品的質(zhì)控品，實驗室可以自制質(zhì)控品”，您覺得對嗎？這句話，要注意后一半。且看GB國家<標準物質(zhì)管理辦法>（1987年7月10日國家計量局發(fā)布）的規(guī)定。

制造標準物質(zhì)，有3條規(guī)定很明確：

⒈第四條

企業(yè)、事業(yè)單位制造標準物質(zhì)，必須具備與所制造的標準物質(zhì)相適應的設施、人員和分析測量儀器設備，并向國務院計量行政部門申請辦理《制造計量器具許可證》。

⒉第五條

企業(yè)、事業(yè)單位制造標準物質(zhì)新產(chǎn)品，應進行定級鑒定，并經(jīng)評審取得標準物質(zhì)定級證書。

⒊第十一條

制造標準物質(zhì)的企業(yè)、事業(yè)單位，必須對重復制造的每批標準物質(zhì)，進行定值檢驗和均勻性檢驗，出具標準物質(zhì)產(chǎn)品檢驗證書，保證其技術指標不低于原定級的要求。

有了以上3條規(guī)定，我想“實驗室可以自制質(zhì)控品”，就要慎重行事。

五、標準物質(zhì)（標準品）與核查標準（質(zhì)控品）應用區(qū)別

以EIA試劑為例：國家檢定所制備的<標準（組合）血清盤>應當是一級標準物質(zhì)、用于檢定商家的每批號試劑（產(chǎn)品）是否達到產(chǎn)品合格標準、并允許商售（供應）。衛(wèi)生部臨檢中心獲得<許可證>和取得<標準物質(zhì)定級證書>制備和供應的質(zhì)控血清（質(zhì)控品），即：核查標準，是用于“統(tǒng)計過程控制”考核和表征測量過程狀態(tài)的目的。參照上述看法，沒有必要多花錢買“標準品”用于統(tǒng)計控制。據(jù)我所知，檢定所的“型——特異性標準血清”的價格比同一型的“質(zhì)控血清”，要高出很多倍哦！況且，也無必要高價購買“型——特異性標準血清”去做統(tǒng)計控制。如果檢定所也生產(chǎn)供應“質(zhì)控品”（核查標準）、即使價格適當高于部中心、感興趣單位愿意購買使用，那是“各有選擇、無可非議”。

關于標準血清盤和質(zhì)控品，我想借此補充說一下不同品牌試劑盒“對于不同人群血樣中非特異性物質(zhì)的非特異性反應性”造成臨床樣本檢測和統(tǒng)計控制操作的干擾。

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例如抗—HCV標準血清盤是已知HCV抗原片段的抗體陽性、和確認不含HCV抗體為陰性的組合標準血清，是經(jīng)過“多次純化、純而又純”、不含任何雜質(zhì)、決無導致非特異性反應物的高度精制品，商家經(jīng)過幾個批次試劑審定與了解之后，可以從包備物含量與配比的調(diào)整、工藝上的改進，生產(chǎn)出適應標準血清盤內(nèi)陰、陽性標準血清的“考驗”、受檢試劑很少會出現(xiàn)非特性反應，然后會獲得符合“合格”產(chǎn)品和<合格證>、繼而允許供貨。注：由此提示—國家檢定所用的組合標準血清盤，僅僅用于鑒定商家的試劑（產(chǎn)品）是否合格！

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但是，一定要知道：在不同地區(qū)，不同民族、性別、年齡和不同健康狀況或有無夾雜其他疾病，以及與試驗項目對應病種不同感染率的各類人群血清樣本的血清流行病學調(diào)查中，必然會出現(xiàn)不同廠家的試劑檢出陽性與陰性的檢測報告“異同差別”，甚至這種“陰、陽有別”的差別相當明顯。WHO通報、以及全國的調(diào)查報告等參考資料足以說明這個現(xiàn)象的實際指導意義（參考資料，略）。這就是第2個層面——人群血清樣本對試劑質(zhì)量的“考察和比較”。這也是WHO為什么要求在HIV人群不同感染率地區(qū)的供血員篩查，要選用人群血清學調(diào)查的特異度和靈敏度（預先經(jīng)過蛋白印跡法確認）高達99.9%的試劑、而不是依據(jù)各個檢定機構(gòu)的鑒定報告“合格”標準選購試劑的理由（WHO的調(diào)查報告可在1991—95年的Bull.WHO上查悉）。

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即便是不同廠牌試劑，對同一批質(zhì)控品的“質(zhì)控”結(jié)果，也會有明顯差異。這是做質(zhì)控的朋友們都是十分熟悉的事，毋庸多言。

六、臨檢、血站如何選購和比較試劑呢？第1，少不了要買有批準文號、有合格證和檢定報告書的試劑；第2，最好用質(zhì)控血清對試劑預先作“篩查和比較”（樣本數(shù)據(jù)n=6以上即可）后，再決定選購哪個商家產(chǎn)品。我用網(wǎng)上的例題簡要說一下。

05-03-16網(wǎng)上yhch（bjyhch1110）提供了2組ELISA測定數(shù)據(jù)：這是用兩個牌號、對同一個定值質(zhì)控血清、初檢和復檢時的兩組數(shù)據(jù)，描述統(tǒng)計的幾個相關指標見附表—1和附圖—2，復制網(wǎng)上的兩幅控制圖，見附圖—3。

1附表—1中可見，甲試劑的C.V.為6.1%，但是，乙試劑高達35.8%，而且，乙試劑的從負數(shù)（-0.27）到7.33的分布范圍合理嗎？顯然是不合理的。此時要想到，用乙試劑做質(zhì)控、檢測樣本，都會帶來種種麻煩，樣本中的陰性樣本有可能被誤判為“假陽性”。

2由附表—1、結(jié)合附圖—1、2可見：甲試劑的數(shù)據(jù)是2.54—3.67；甲試的=2.53與C.O.I.=1.00間距是1.54（這個“間距”很重要）?？墒?，乙試劑的下限間距，竟然是（－0.27）－1.00=－1.27。這是ELISA試劑內(nèi)在質(zhì)量上很忌諱的現(xiàn)象！查閱過外商ELISA試劑質(zhì)量評價文獻的讀者都知道，實際檢測陽性血清的-3s下值、檢測陰性血清的+3s上值，兩者與C.O.I.值1.00的間距，有一定要求，間距大比小好。至少，前者不可以向下、后者不可以向上竄過C.O.I.=1.00這個“基線”。向下竄過者，容易出現(xiàn)“假陽性”；向上竄過者，容易出現(xiàn)“假陰性”。感興趣的朋友，有時間可以看看我的2篇未發(fā)表文章，1是：乙型肝炎HBsAgEIA批試劑HBV血清盤考核綜合評價；2是：，或者查看：Evaluationsofenzyme-linkedimmunosorbentassays:amethodofdeltaanalysis.J.Viol.Method.1998,22:51—59。

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/，打開<論壇交流>文件夾，點擊：ZBH-HBsA、HBeAg、抗—HCVELISA試劑檢測等文稿6篇。其中有上文中提到的幾篇過去的文稿。標準物質(zhì)的定義

標準物質(zhì)是具有準確量值的測量標準,它在化學測量、生物測量、工程測量與物理測量領域得到了廣泛的應用.標準物質(zhì)具有以下特點:

(1)標準物質(zhì)的量值只與物質(zhì)的性質(zhì)有關,與物質(zhì)的數(shù)量和形狀無關;