第第頁分光光度計測量誤差有哪些及工作原理分光光度計測量誤差有哪些分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇性吸取進行物質(zhì)的定性或定量分析的儀器，在各行各業(yè)得到了廣泛應用，緊要用于物質(zhì)純度檢查、定量分析、物質(zhì)結(jié)構(gòu)辨別等?？蓽y量結(jié)果總會顯現(xiàn)可接受或不可接受的誤差，誤差來源于測量過程的各個方面，緊要來源于儀器本身性能和測量條件的選擇兩個方面。

一、儀器本身性能帶來的誤差

1.1復色光對比耳定律的偏離

比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器的分光光度計，也只能獲得近乎單色的光，無法獲得純單色光，它仍舊含有狹窄光通帶，具有復色光的性質(zhì)。而復色光會導致比耳定律的正或負偏離。固定狹縫的紫外分光光度計光譜帶寬一般為1nm或2nm，可調(diào)狹縫的可以做到0.Inm；可見分光光度計帶寬6nm、snm，甚至十幾納米。光譜帶寬應當是越小越好，但是隨著光譜辨別率的提高，儀器的靈敏度降低，所以選擇儀器時要綜合考慮各種條件的影響。當溶液濃度較小且單色光較純時，可貌似認為符合比耳定律。

1.2雜散光的影響

雜散光是指進人檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的其他波長組分，它是光譜測量中誤差的緊要來源。產(chǎn)生原因有:分光光度計的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計工作波段邊緣波優(yōu)點，由于單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴重的測量誤差，實際工作中，在定量分析時，一般在吸取峰或其相近處測量樣品吸光度，假如在分析波優(yōu)點含有雜散光，這時樣品的透光率較小，而雜散光大部分透過，使測量吸光度低于真實吸光度。

1.3儀器噪聲對測t的影響

儀器噪聲也是儀器的一個緊要指標，它表征儀器做稀溶液的本領。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100%T和0%T線，可察看到分光光度計的確定噪聲水平，假如儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。

1.4波長和吸光度精準度

樣品的每一個值都是在確定的波長下測得的，假如波長誤差很大，測出的值確定不準。吸光度精準度也是用戶對儀器的直接要求，更應引起充分的重視。國家計量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計透射比精準度為A級士0.6%，B級土1.0%。

二、測量條件的選擇

2.1參比溶液和溶荊的選擇

分光光度計的測量實際上是以通過參比池的光強度作為人射光強度來測定試樣的吸光度，先調(diào)整儀器使透過參比池溶液的吸光度為零，然后讓同一束光通過樣品，使得吸光度比較真實地反映待測物質(zhì)的濃度，所以參比溶液的選擇特別緊要。假如僅有待測物質(zhì)與顯色劑的反應產(chǎn)物有吸取，可用純?nèi)軇┗蛘麴s水作參比溶液。假如顯色劑有顏色，并在測定波長下有吸取，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加人顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應一致。假如樣品中其它組分本身的顏色對測定有干擾，而所用顯色劑沒顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

正確選擇合適的溶劑，對提高分析的精準度起緊要作用。為減小溶劑中雜質(zhì)的影響，應選擇高純度的溶劑；溶劑應不與待測物質(zhì)發(fā)生化學反應；待測物在溶劑中要有確定的溶解度；在測定的波長范圍內(nèi)，溶劑本身沒有吸取，注意常用溶劑的最短可用波長；當用揮發(fā)性大的溶劑時，測量過程中吸取池應加蓋。

2.2測試波長的選擇

當用分光光度計對溶液進行測定時，首先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據(jù)是該被測溶液的吸取曲線。在一般情況下，我們總是選擇最大吸取波長作為測量波長，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下最大吸取峰很尖銳、吸取過大或相近有干擾存在，就不能選最大吸