醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物2015-12-10發(fā)布IGB18281.5—2015/ISO11138-5:2006 2規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14通用要求 5試驗(yàn)菌 16菌懸液 17載體和內(nèi)層包裝 28染菌載體和生物指示物 29微生物數(shù)量和抗力 2附錄A(規(guī)范性附錄)測(cè)定低溫蒸汽甲醛滅菌過程中抗力的方法 3附錄B(資料性附錄)低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測(cè)試方法原理 4參考文獻(xiàn) 5ⅢGB18281的本部分的全部技術(shù)內(nèi)容為強(qiáng)制性。GB18281《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物》分為以下五個(gè)部分：——第1部分：通則；——第2部分：環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物；——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物；——第4部分：干熱滅菌用生物指示物；——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。本部分是GB18281的第5部分。本部分按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分使用翻譯法等同采用ISO11138-5:2006《醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌生物指示物溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物》。與本部分中規(guī)范性引用的國際文件有一致性對(duì)應(yīng)關(guān)系的我國文件如下：——GB18281.1—2015醫(yī)療保健品滅菌生物指示物第1部分：通則(ISO第5部分：低11138-1:2006,本部分做了下列編輯性修改：——按照GB/T1.1的要求進(jìn)行了一些編輯上的修改；——?jiǎng)h除國際標(biāo)準(zhǔn)的前言。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)行機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本部分由國家食品藥品監(jiān)督管理總局提出。本部分由全國消毒技術(shù)與設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC200)歸口。本部分起草單位：國家食品藥品監(jiān)督管理局廣州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心、杭州泰林生物技術(shù)設(shè)備有限公司、山東新華醫(yī)療器械股份有限公司。GB18281規(guī)定了用于監(jiān)測(cè)滅菌周期的生物指示物在生產(chǎn)、標(biāo)簽、測(cè)試方法和性能方面的通用要求，還包括運(yùn)營商打算用于驗(yàn)證和監(jiān)控滅菌過程的菌懸液。GB18281的本部分給出了具體的用于低溫蒸汽甲醛滅菌處理的生物指示物的要求。GB18281標(biāo)準(zhǔn)系列所提供的是一般要求和所需的測(cè)試方法。目前這個(gè)先進(jìn)的標(biāo)準(zhǔn)系列是由專業(yè)的制造商、使用者和監(jiān)管部門參與制定的標(biāo)準(zhǔn)。其意圖不僅僅是不提倡在不建議使用的方面使用生物指標(biāo)，而是提供現(xiàn)今為人所知的生產(chǎn)那些生物指示物通用的要求。標(biāo)準(zhǔn)中提供了用于驗(yàn)證和監(jiān)控低溫蒸汽甲醛滅菌過程的一般要求(見ISO14937)。注意：一些國家或地區(qū)已經(jīng)出版的標(biāo)準(zhǔn)可能涵蓋滅菌或生物指示物的要求。對(duì)生物指示物結(jié)果的選用、使用和解釋可見ISO14161。1醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物GB18281的本部分規(guī)定了測(cè)試微生物、菌懸液、染菌載體、生物指示物和利用低溫蒸汽甲醛為滅菌劑來評(píng)估滅菌處理效果的生物指示物測(cè)試方法的通用要求。注1:低溫蒸汽甲醛滅菌過程的控制和確認(rèn)的要求見ISO14937。注2:關(guān)于工作場(chǎng)所的安全要求見國家或區(qū)域條例。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。ISO11138-1:2006醫(yī)療保健品滅菌生物指示物第1部分：通則(Sterilizationofhealthcareproducts—Biologicalindicators—Part1:Genralrequirements)3術(shù)語和定義ISO11138-1中界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。通過動(dòng)力排氣，使預(yù)先包裝的物品處于負(fù)壓狀態(tài)暴露于蒸汽，在低于100℃溫度下，注入甲醛氣體，使得滅菌劑在維持時(shí)間保持穩(wěn)態(tài)的工藝。4通用要求ISO11138-1的要求適用于本部分。5試驗(yàn)菌5.1試驗(yàn)菌應(yīng)是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其他已被證明符合本部分要求的等效性能的微生物菌株。注1:嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。注2:目前被認(rèn)為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如NCIB8224、DSM6790、ATCC10149和ATCC12980。5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌以外的一株試驗(yàn)菌，那么這株試驗(yàn)菌的抗力適宜性應(yīng)待確定。6菌懸液ISO11138-1的要求適用于本部分。27載體和內(nèi)層包裝7.1用低溫蒸汽甲醛為滅菌劑的生物指示物的載體和內(nèi)層包裝的材料應(yīng)符合ISO11138-1:2006中5.2注：由于纖維素表面對(duì)甲醛的化學(xué)吸附作用，濾紙類不適宜作載體。7.2應(yīng)遵守確定的暴露條件：a)最低暴露溫度：不小于5℃(上述制造商聲稱的最高溫度);b)最高暴露溫度：依照制造商聲稱的最大值；如果制造商未聲明，最大暴露溫度應(yīng)不小于c)暴露時(shí)間：不小于60min。注：這些條件已成為一種告戒，對(duì)帶菌體的實(shí)際限制在低溫蒸汽甲醛滅菌過程的應(yīng)用范圍內(nèi)。條件的選擇要能顯示出實(shí)際的低溫蒸汽甲醛滅菌過程對(duì)載體的實(shí)際要求。8染菌載體和生物指示物ISO11138-1的要求適用于本部分。9微生物數(shù)量和抗力9.1制造商應(yīng)根據(jù)ISO11138-1:2006中6.4的要求規(guī)定抗力特性。9.2活菌計(jì)數(shù)的增殖量應(yīng)不大于0.1×10”/每個(gè)單位(如：每毫升菌懸液、每個(gè)待接種的帶菌體、每個(gè)生物帶菌體).9.3待接種的帶菌體和生物帶菌體的增殖量應(yīng)不小于1.0×10?。9.4抗力應(yīng)表示為60℃時(shí)的D值，單位為分(min)。每一批/批次的生物指示物或者染菌載體的D值應(yīng)用60℃時(shí)的D值表示，保存至一位小數(shù)。9.5當(dāng)按照附錄A進(jìn)行測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)基、染菌載體或生物指示物包括嗜熱脂肪地芽孢桿菌的Da值應(yīng)≥6min。其他微生物也應(yīng)有D值以便應(yīng)用。9.6生物指示物的抗力也可以用Fo值表示(見ISO11138-1:2006中3.7)。本部分和GB18281的其他部分特指的抗力應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特定條件測(cè)試。9.7應(yīng)按照ISO11138-1:2006的附錄C和附錄D所給定的方法測(cè)定D值。9.8D值的測(cè)定和存活-殺滅反應(yīng)特性基于附錄A中的過程參數(shù)。9.9存活-殺滅區(qū)間可用ISO11138-1:2006中附錄E的公式來計(jì)算。注：比較同一生產(chǎn)商的不同批號(hào)的產(chǎn)品信息對(duì)于使用者是有用的。示例：套用ISO11138-1:2006中附錄E的公式以及本部分給出的種群和最小D值，存活-殺滅反應(yīng)特性值是：——60℃時(shí)：存活時(shí)間≥18min,殺滅時(shí)間≤54min。3(規(guī)范性附錄)測(cè)定低溫蒸汽甲醛滅菌過程中抗力的方法A.1通則本方法是基于一種染菌載體浸入到甲醛水溶液的定性的測(cè)試。本方法的測(cè)試結(jié)果比使用氣相腔式方法的結(jié)果有更好的重現(xiàn)性。A.3提供了測(cè)試方法的特別要求。A.2染菌載體的暴露條件A.2.1測(cè)試系統(tǒng)中包含裝有10mL甲醛水溶液的試管，并使試管放在一個(gè)自動(dòng)控溫的水浴裝置中。測(cè)試系統(tǒng)應(yīng)能在1min～150min(精確至±10s)時(shí)間段內(nèi)保持特定的暴露條件。A.2.2甲醛水溶液的濃度應(yīng)用化學(xué)分析方法確定。A.2.3該方法應(yīng)被驗(yàn)證過。A.3.1將染菌載體完全浸入測(cè)試試管中已預(yù)熱至60℃±0.5℃的1mol/L±0.01mol/L的甲醛水溶液中。A.3.2確認(rèn)染菌載體完全浸入甲醛水溶液中而不是漂浮于表面。A.3.3進(jìn)行測(cè)試時(shí)使用防護(hù)技術(shù)以防止偶發(fā)污染。A.3.4在設(shè)定的暴露時(shí)間終了，取出甲醛溶液中的染菌載體。A.3.5去除載體上的多余液體，將其將在室溫下浸入裝有過濾過的2%Na?SO?溶液的試管10min,以反應(yīng)掉載體上殘留的甲醛。蓋上試管。要注意盡量不要攪動(dòng)甲醛及中和劑溶液，以防止“沖走”測(cè)試微注：組氨酸和半胱氨酸是有效的中和劑。A.3.6特定的生長培養(yǎng)基應(yīng)能保證覆蓋測(cè)試微生物。注：本測(cè)試中大豆酪蛋白消化酶適用。A.3.8將試管保持90℃60min以激發(fā)孢子的活性。A.4測(cè)定抗力抗力特性值應(yīng)用ISO11138-1:2006的附錄C、附錄D和附錄E給定的方法測(cè)定。4(資料性附錄)低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測(cè)試方法原理B.1通則為了指示物測(cè)試方法的可重復(fù)性，應(yīng)使用特定的測(cè)試設(shè)備(電阻測(cè)試儀)和測(cè)試方法。在低溫蒸汽甲醛滅菌過程中，電阻測(cè)試儀中的甲醛氣體濃度極難達(dá)到穩(wěn)定，因?yàn)楫?dāng)一定量的甲醛注入容器中后，會(huì)有甲醛溶于出現(xiàn)的少量的水珠(冷凝物)中。甲醛在水中的溶解濃度依照溫度的不同，高于其在氣體狀態(tài)濃度的1000倍～10000倍。因此，本部分采用甲醛濃度可以明確的液相測(cè)試方法，以達(dá)到測(cè)試方法的可重復(fù)性。B.2低溫甲醛蒸汽滅菌過程即使在連續(xù)的蒸汽條件下和穩(wěn)定的甲醛氣體濃度中，滅菌過程仍然嚴(yán)重依賴于滅菌腔的設(shè)計(jì)和負(fù)載物的特性。甲醛滅菌過程可以簡單地劃分為兩步：a)在蒸汽滅菌過程中，在負(fù)載物表面會(huì)產(chǎn)生水珠冷凝物膜，這個(gè)冷凝過程非常快；b)因?yàn)榧兹┰跉庖浩胶鉅顟B(tài)下的濃度變化極大(1:1000～1:10000),達(dá)到平衡所需要的時(shí)間相對(duì)較長，在實(shí)際情況下，需要的時(shí)間為10min～2h。滅菌過程取決于甲醛在液態(tài)中的濃度，比如，冷凝物的表面。確認(rèn)這種平衡條件的時(shí)間常數(shù)項(xiàng)非[1]ISO14161:2000Sterilizationofhenlthcareproducts—Biologicalindicators—Guidancefortheselection,useandinterpretationofresults[2]ISO14937:2000Sterilizationofhenlthcareproducts—Generalrequirementsforcharizationo