茶用酶制劑的生產(chǎn)第一節(jié)菌種選育第二節(jié)酶的生產(chǎn)方式第三節(jié)培養(yǎng)基第四節(jié)滅菌第五節(jié)發(fā)酵過程的控制第六節(jié)酶的工業(yè)提取第七節(jié)酶生產(chǎn)實例第一節(jié)菌種選育一、概述1、酶的來源微生物、植物、動物2、微生物酶的優(yōu)越性（1）生長速度快，易于大量培養(yǎng)；（2）通過菌種選育改進(jìn)培養(yǎng)條件，便于人為提高產(chǎn)量；（3）菌種不同，產(chǎn)生酶的種類有差異；（4）利用微生物酶反應(yīng)，以活菌體進(jìn)行催化，簡化工藝，縮短反應(yīng)周期；（5）產(chǎn)量高、成本低、不受季節(jié)限制，便于工業(yè)化生產(chǎn)第一節(jié)菌種選育一、概述3、菌體內(nèi)酶與菌體外酶菌體外酶

產(chǎn)生的酶分泌到菌體外，又叫胞外酶。胞外酶的使用：（1）除去菌體后含酶的培養(yǎng)濾液直接用于生物催化反應(yīng)（2）把酶抽提出來用一定的方法結(jié)合制成的固定化酶制成“固定化酶”如：葡萄糖淀粉酶與羧甲基纖維素（CMC）離子第一節(jié)菌種選育一、概述4、良好的菌種是微生物發(fā)酵工業(yè)的基礎(chǔ)

首先是選種的問題：

1）向菌種保藏機(jī)構(gòu)、工廠或科研單位直接索??；

2）從自然界中以特定的方法分離出新菌株。

其次是育種的工作：根據(jù)菌種的遺傳特點，改良菌株的生產(chǎn)性能，使產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量不斷提高。

第三是菌種復(fù)壯菌種性能下降時，要設(shè)法復(fù)壯；

第四是合適的工藝條件和合理先進(jìn)的設(shè)備與菌種配合，才能充分發(fā)揮菌種的優(yōu)良性能。第一節(jié)菌種選育二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

自然界中微生物種類繁多，估計不少于幾十萬種，但目前已為人類研究及應(yīng)用的不過千余種。自然界工業(yè)菌種分離篩選的主要步驟是：

從自然界中分離篩選菌種的方法步驟采樣

增殖培養(yǎng)

純種分離純培養(yǎng)生產(chǎn)性能測定方法、地點、時間、數(shù)量和周圍環(huán)境記錄純種分離的原則就是使培養(yǎng)物獲得單個菌落：1．稀釋分離法2．平板劃線分離法

⑴

涂菌：

⑵

劃線分離：①分步劃線法；②一次劃線法：

3．組織分離法

測定代謝產(chǎn)物或其它目的性狀二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

1、采樣

以采集土壤為主一般在有機(jī)質(zhì)較多的肥沃土壤－－微生物的數(shù)量最多中性偏堿的土壤－－以細(xì)菌和放線菌為主酸性紅土壤及森林土壤－－霉菌較多果園、菜園和野果生長區(qū)等富含碳水化合物的土壤和沼澤地－－酵母和霉菌較多。采樣的對象也可以是植物，腐敗物品，某些水域等。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

1、采樣

采樣應(yīng)充分考慮采樣的季節(jié)性和時間因素，以溫度適中，雨量不多的秋初為好。真正的原地菌群的出現(xiàn)可能是短暫的，如在夏季或冬季土壤中微生物存活數(shù)量較少，暴雨后土壤中微生物會顯著減少。采樣方式是在選好適當(dāng)?shù)攸c后，用無菌刮鏟、土樣采集器等，采集有代表性的樣品，如特定的土樣類型和土層、葉子碎屑和腐質(zhì)，根系及其周圍區(qū)域，海底水，泥及沉積物等。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

1、采樣

采樣具體方法

就森林、旱地、草地而言，可先掘洞，由土壤下層向上層順序采集；就水田等浸水土壤而言，一般是在不損土層結(jié)構(gòu)的情況下插入圓筒采集。如果層次要求不嚴(yán)格，可取離地面5－15cm處的土。將采集到的土樣盛入清潔的聚乙烯袋、牛皮袋或玻璃瓶中。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

1、采樣

采樣具體方法

采好的樣必須完整地標(biāo)上樣本的種類及采集日期、地點以及采集地點的地理、生態(tài)參數(shù)等。采好的樣品應(yīng)及時處理，暫不能處理的也應(yīng)貯存于4℃下，但貯存時間不宜過長。這是因為一旦采樣結(jié)束，試樣中的微生物群體就脫離了原來的生態(tài)環(huán)境，其內(nèi)部生態(tài)環(huán)境就會發(fā)生變化，微生物群體之間就會出現(xiàn)消長。如果要分離嗜冷菌，則在室溫下保存試樣會使嗜冷菌數(shù)量明顯降低。

二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

2、增殖培養(yǎng)

培養(yǎng)基的確定、培養(yǎng)條件的確定一般情況下，采來的樣品可以直接進(jìn)行分離通過選擇性的配制培養(yǎng)基（如營養(yǎng)成分、添加抑制劑等），選擇一定的培養(yǎng)條件（如培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基酸堿度等）來控制，需設(shè)法增加樣品中所要菌種的數(shù)量。如根據(jù)微生物利用碳源的特點，可選定糖、淀粉、纖維素，或者石油等，以其中的一種為唯一碳源，那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長，而其他微生物就可能死亡或淘汰。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

2、增殖培養(yǎng)

在分離細(xì)菌時，培養(yǎng)基中添加濃度一般為50μg／m1的抗真菌劑(如放線菌酮和制霉素)，可以抑制真菌的生長。在分離放線菌時，通常于培養(yǎng)基中加入1－5m1天然浸出汁(植物、巖石、有機(jī)混合腐質(zhì)等的浸出汁)

作為最初分離的促進(jìn)因子，可分離出更多不同類型的放線菌類型；在放線菌分離瓊脂中通常加入抗真菌劑制霉菌素或放線菌酮，以抑制真菌的繁殖；為對某些特殊種類的放線菌進(jìn)行富集和分離，可選擇性地添加一些抗生素如新生霉素二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

2、增殖培養(yǎng)

在分離真菌時，利用低碳／氮比的培養(yǎng)基可使真菌生長菌落分散，利于計數(shù)、分離和簽定；在分離培養(yǎng)基中加入一定的抗生素如氯霉素、四環(huán)素、卡那霉素、青霉素、鏈霉素等即可有效地抑制細(xì)菌生長及其菌落形成；抑制細(xì)菌的另外一些方法有：在使用平皿之前，將平皿先干燥3－4天；降低培養(yǎng)基的pH值或在無法降低pH時，加入1：30000玫瑰紅。這樣有利于下階段的純種分離。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

3、培養(yǎng)分離

通過增殖培養(yǎng)后，還需分離、純化，常用的分離方法有稀釋分離法、劃線分離法和組織分離法：稀釋分離法：將樣品進(jìn)行適當(dāng)稀釋，然后將稀釋液涂布于培養(yǎng)基平板上進(jìn)行培養(yǎng)，待長出獨立的單個菌落，進(jìn)行挑選分離。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

3、培養(yǎng)分離

劃線分離法：首先倒培養(yǎng)基平板，然后用接種針（接種環(huán)）挑取樣品，在平板上劃線?？捎梅植絼澗€法或一次劃線法，確保培養(yǎng)出單個菌落組織分離法：主要用于食用菌菌種或某些植物病原菌的分離。分離時，首先用10%漂白粉或0.1%升汞液對植物或器官組織進(jìn)行表面消毒，用無菌水洗滌數(shù)次后，移植到培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上，于適宜溫度培養(yǎng)數(shù)天后，可見微生物向組織塊周圍擴(kuò)展生長。經(jīng)菌落特征和細(xì)胞特征觀察確認(rèn)后，即可由菌落邊緣挑取部分菌種進(jìn)行移接斜面培養(yǎng)。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

3、培養(yǎng)分離

對于有些微生物如毛霉、根霉等在分離時，由于其菌絲的蔓延性，極易生長成片，很難挑取單菌落。常在培養(yǎng)基中添加0.1%的去氧膽酸鈉或在察氏培養(yǎng)基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖，利于單菌落的分離。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

4、篩選

經(jīng)過分離培養(yǎng)后出現(xiàn)很多單個菌落，通過菌落形態(tài)觀察，選出所需菌落，然后取菌落的一半進(jìn)行菌種鑒定，對于符合目的菌特性的菌落，可將之轉(zhuǎn)移到試管斜面純培養(yǎng)。分初篩和復(fù)篩二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

4、篩選

菌種的初篩

(1)用簡單的定性反應(yīng)進(jìn)行初篩；

(2)在最初分離階段就給予特殊的培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件，讓目的菌株得以繁殖，盡可能地把只成為目的菌的菌株或只將其最適菌株的一株純化分離。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

4、篩選

菌種的復(fù)篩

初篩之后，還要進(jìn)行復(fù)篩。復(fù)篩的目的是在初篩的基礎(chǔ)上，篩選產(chǎn)酶量高、性能更符合生產(chǎn)要求的菌種。

酶活測定方法的建立尤其重要二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

4、篩選

對復(fù)篩獲得菌株的要求

(1)不是致病菌；

(2)菌株不易變異和退化；

(3)不易感染噬菌體；

(4)微生物產(chǎn)酶量高；

(5)酶的性質(zhì)符合應(yīng)用的需要，最好是胞外酶；

(6)產(chǎn)生的酶便于分離和提取，得率高；

(7)微生物培養(yǎng)營養(yǎng)要求低。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

5、毒性試驗

如果產(chǎn)物與食品制造有關(guān)，需對菌種進(jìn)行毒性鑒定自然界的一些微生物在一定條件下將產(chǎn)生毒素，為了保證食品的安全性，凡是與食品工業(yè)有關(guān)的菌種，均需通過兩年以上的毒性試驗。但啤酒酵母、脆壁酵母、黑曲霉、米曲霉和枯草桿菌無須作毒性試驗二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

6、新種性能的測試

從自然界中分離得到的純種稱為野生型菌株，它只是篩選的第一步，所得菌種是否具有生產(chǎn)上的實用價值，能否作為生產(chǎn)菌株，還必須采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，通過三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗，以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。如果此野生型菌株產(chǎn)量偏低，可以留之作為菌種選育的出發(fā)菌株。二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

7、最佳產(chǎn)酶條件的初步確定

(1)培養(yǎng)方式的確定；

(2)最佳培養(yǎng)條件組合；

(3)微生物產(chǎn)酶的特性(胞內(nèi)酶、胞外酶)；

(4)微生物酶收集的時間順序二、

自然界工業(yè)菌種篩選程序

8、微生物產(chǎn)酶性能的進(jìn)一步提高

(1)獲得高產(chǎn)菌種的突變體；

(2)利用代謝工程和代謝調(diào)節(jié)機(jī)理來提高微生物的酶產(chǎn)量；

(3)運用遺傳工程、基因工程的手段將原有菌株中的目的基因轉(zhuǎn)移到另外一些對生產(chǎn)環(huán)境更適應(yīng)性的微生物細(xì)胞之內(nèi)，使其高效表達(dá)。三、

微生物的誘變育種

從自然界直接分離的菌種，不能達(dá)到工業(yè)生產(chǎn)的要求，因此需改良菌種。以微生物的自然變異率太小，僅為10-6－10-10，采用物理和化學(xué)因素促進(jìn)其誘發(fā)突變可加大變異率。

當(dāng)今發(fā)酵工業(yè)所使用的高產(chǎn)菌株，幾乎都是通過誘變育種而大大提高了生產(chǎn)性能。育種方法有雜交、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)以及基因工程、原生質(zhì)體融合等，但誘變育種仍為目前比較主要、廣泛使用的育種手段。1、誘變育種的一般步驟和方法

出發(fā)菌株

同步培養(yǎng)

使菌細(xì)胞處于相同或接近的生理狀態(tài)

單細(xì)胞（或單孢子）菌懸液的制備

單細(xì)胞或單孢子的意義

酵母或霉菌孢子106/ml、細(xì)菌108/ml

誘變劑的選擇及其劑量的確定

以致死率為90％～99％為宜

誘變處理

①物理誘變劑

②化學(xué)誘變劑

確定出發(fā)菌株

↓菌種的純化選優(yōu)

↓←出發(fā)菌株的性能鑒定同步培養(yǎng)

↓制備單細(xì)胞（或單孢子）懸液

↓←活菌濃度測定誘變劑的選擇與確定誘變劑量的預(yù)試驗

↓誘變處理

↓平板分離

↓計形態(tài)變異的菌落數(shù)，計算突變率挑取疑似突變菌落純培養(yǎng)

↓突變體的初步篩選

↓←用簡單快捷的方法重復(fù)篩選

↓←搖瓶發(fā)酵試驗選出突變體（根據(jù)情況進(jìn)行生產(chǎn)試驗或重復(fù)誘變處理）三、微生物的誘變育種四、

微生物菌種的保藏和復(fù)壯

1、菌種的保藏

1)低溫保藏法斜面菌種直接放入0～4℃冰箱中保藏，保存時間不宜過長，一般為3～6個月；用-20℃以下的超低溫冰箱或干冰、液氮（-195℃）凍結(jié)保藏，長達(dá)數(shù)年。

2)干燥保藏法主要是指把菌種接種到適當(dāng)載體上，在干燥條件下進(jìn)行保藏。這種保藏方法主要適合于細(xì)菌的芽胞和霉菌的孢子。細(xì)菌芽胞用沙土管保藏；霉菌的孢子多用麩皮管保藏。四、

微生物菌種的保藏和復(fù)壯

1、菌種的保藏

3)隔絕空氣保藏法用固體石蠟密封試管口以隔絕空氣

4)真空冷凍干燥保藏法培養(yǎng)菌種→加菌種保護(hù)劑（一般食品工業(yè)用菌種多用牛乳作保護(hù)劑）→分裝、預(yù)凍→真空凍干→真空封口。

5)寄主保藏法用常規(guī)方法保藏的動植物病原菌和病毒四、

微生物菌種的保藏和復(fù)壯

2、菌種退化的原因及防止措施菌種退化的主要原因：有關(guān)基因的負(fù)突變措施：

1）控制傳代次數(shù)

2）創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件

3）利用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行移種傳代

4）采用有效的菌種保藏方法四、

微生物菌種的保藏和復(fù)壯

3、退化菌種的復(fù)壯

1）純種分離

采用平板劃線分離法、稀釋平板法或涂布法，把仍保持原有典型優(yōu)良性狀的單細(xì)胞分離出來，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)恢復(fù)原菌株的典型優(yōu)良性狀，若能進(jìn)行性能測定則更好。

2）通過寄主進(jìn)行復(fù)壯

寄生型微生物的退化菌株可接種到相應(yīng)寄主體內(nèi)以提高菌株的活力。

3）聯(lián)合復(fù)壯

對退化菌株還可用高劑量的紫外線輻射和低劑量的DTG聯(lián)合處理進(jìn)行復(fù)壯。第二節(jié)酶的生產(chǎn)方式酶的生產(chǎn)方式分：固體發(fā)酵法又稱為麩曲培養(yǎng)法，該法是利用麩皮和米糠為主要原料，添加豆餅等，加水拌成半固體狀態(tài)，供微生物生長和產(chǎn)酶用。適合于霉菌酶的生產(chǎn)。常用的有淺盤法、轉(zhuǎn)桶法和厚層通氣法。液體發(fā)酵法有液體表面發(fā)酵和液體深層發(fā)酵，后者常用第三節(jié)培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖和代謝的需要及合成酶的營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基成分和配比合適與否，對微生物的生長、酶的生物合成和提取工藝，甚至最后對成品的產(chǎn)量和質(zhì)量都會產(chǎn)生相當(dāng)大的影響。良好的培養(yǎng)基配比可以充分發(fā)揮生產(chǎn)菌種合成酶的能力，使之獲得最大的生產(chǎn)效果。培養(yǎng)基的配比隨著生產(chǎn)實踐的不斷進(jìn)展、原料來源及成本、菌種不斷更新與發(fā)酵條件的不斷改進(jìn)而隨時加以調(diào)整或改變。一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求

水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長素－培養(yǎng)基的五要素1、水

培養(yǎng)基需要以水為介質(zhì)，微生物的生長必須有水，水是組成微生物細(xì)胞的主要成份。水在培養(yǎng)基中的主要功用有：（1）水是良好的溶劑；（2）水是生活細(xì)胞中一切反應(yīng)的媒介物；（3）水能維持細(xì)胞中的滲透壓；（4）水是熱的良好導(dǎo)體。發(fā)酵所用的水主要為自來水，還有深井水和江河水等一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求

2、碳源

碳源是用來供給微生物細(xì)胞生命活動所需要的能量和構(gòu)成菌體細(xì)胞以及各種代謝產(chǎn)物的物質(zhì)基礎(chǔ)（代謝產(chǎn)物中的碳架）。碳源不僅需要量大，而且是主要的營養(yǎng)要素，是酶制劑發(fā)酵的主要原料之一。大量的農(nóng)副產(chǎn)物是主要的有機(jī)碳原料。微生物的營養(yǎng)類型不同，對碳源要求也不同。一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求

3、氮源氮源是必不可少的重要原料氮源是組成蛋白質(zhì)和核酸的主要元素。微生物細(xì)胞的原生質(zhì)是由蛋白質(zhì)、核酸、脂類和水組成的，酶自身亦為蛋白質(zhì)。氮的來源可分為無機(jī)氮（硫酸氨、尿素等）和有機(jī)氮，豆餅、花生餅粉等農(nóng)副產(chǎn)物則是常用的有機(jī)氮源，其他還有魚粉，蛋白胨等。一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求

4、無機(jī)鹽和微量元素主要元素—磷、硫、鎂、鉀、鈣等。微量元素—鐵、錳、鋅、銅等。一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求

5、生長因子和產(chǎn)酶促進(jìn)劑凡能調(diào)節(jié)微生物代謝活動的微量有機(jī)物，都稱為生長因子，一般指B族維生素。如果添加少量物質(zhì)，就能顯著增加酶的產(chǎn)量，這些物質(zhì)通常稱為產(chǎn)酶促進(jìn)劑。大部分是誘導(dǎo)物或者表面活性劑誘導(dǎo)劑一般是底物或者底物類似物二、培養(yǎng)基的種類1、斜面培養(yǎng)基能夠使菌種生長繁殖快、健壯，不容易引起菌種變異2、種子培養(yǎng)基供菌種生長和繁殖用。營養(yǎng)要豐富和完全，但營養(yǎng)物質(zhì)的濃度又不可以太高，以免影響種子的質(zhì)量，因為種子的質(zhì)量是決定發(fā)酵成敗的關(guān)鍵之一。二、培養(yǎng)基的種類3、發(fā)酵培養(yǎng)基供菌種生長和發(fā)酵產(chǎn)物合成用，要求營養(yǎng)適當(dāng)豐富和完全，適合菌種的生理特性和要求，使菌種迅速生長、健壯，能在較短的周期內(nèi)發(fā)揮產(chǎn)酶菌合成發(fā)酵產(chǎn)物的能力；同時要注意成本和糧耗。發(fā)酵培養(yǎng)基還要配合發(fā)酵裝備、培養(yǎng)工藝和通氣攪拌性能而選擇。第三節(jié)培養(yǎng)基三、培養(yǎng)基的選擇

以前用單因子實驗法，就是根據(jù)搖瓶、小罐中做實驗，確定效果好壞，以及是否合適推廣到發(fā)酵罐中。浪費時間，勞動量較大。現(xiàn)在使用正交實驗法，有二因子、三因子和多因子的正交設(shè)計，效果好，速度快，減少了實驗次數(shù)，提高了工作效率。第三節(jié)培養(yǎng)基四、選擇原料的依據(jù)對于工業(yè)上大規(guī)模投入生產(chǎn)的原料，除了工藝要求外，還要考慮生產(chǎn)管理和經(jīng)濟(jì)上的要求五、發(fā)酵生產(chǎn)的主要原材料山芋干、玉米粉、黃豆餅粉、麩皮第四節(jié)滅菌一、空氣過濾除菌1、介質(zhì)除菌機(jī)理沉降作用、擴(kuò)散作用、慣性撞擊作用、阻攔作用、靜電引力。2、空氣過濾除菌的工藝流程由高空采集的空氣經(jīng)粗過濾器，進(jìn)入空壓機(jī)。空壓機(jī)出口的空氣一般要控制壓力2.0kg/cm2以上，此時溫度為120～150℃，進(jìn)入空氣貯罐，經(jīng)二次空氣冷卻和分離，溫度降到10～25℃，除去油和水，再經(jīng)熱交換器加熱至30℃左右，最后通過空氣總過濾器和分過濾器除菌，從而獲得清潔，壓力、溫度和流量都符合工藝要求的無菌空氣。一、空氣過濾除菌3、空氣過濾介質(zhì)棉花-活性炭為介質(zhì)的空氣總過濾器涂樹脂的超細(xì)玻璃纖維紙為介質(zhì)的空氣分過濾器。新材料：

1）燒結(jié)材料過濾介質(zhì)

2）高效過濾器

3）絕對過濾器

4）富氧空氣除菌新思路—膜法富氧第四節(jié)滅菌二、高溫滅菌

滅菌鍋在一定的濕熱環(huán)境中殺滅微生物第四節(jié)滅菌三、防止染菌的檢查雜菌的方法

1、污染途徑原料、種子、無菌空氣和設(shè)備。

2、雜菌污染原因及防治

3、噬菌體的危害和防止措施第五節(jié)發(fā)酵過程的控制一、發(fā)酵過程中的代謝變化

1、與代謝變化有關(guān)的參數(shù)

1）物理參數(shù)溫度、壓力、攪拌轉(zhuǎn)速、攪拌功率、溶解氧等。

2）化學(xué)參數(shù)基質(zhì)濃度、pH值、酶活力。

3）生物參數(shù)菌體形態(tài)，菌體濃度等。

2、生長代謝曲線

1）菌體生長階段

2）產(chǎn)酶階段

3）菌體自溶階段第五節(jié)發(fā)酵過程的控制二、影響產(chǎn)酶的重要條件

1、溫度菌體生長時需要降溫，而發(fā)酵初期需要保溫，一般來說，發(fā)酵溫度比種子生長溫度要偏高一些。

2、pH值在酶制劑生產(chǎn)中，控制發(fā)酵液pH值的方法，通常是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的原始pH，掌握原料的配比，保持一定的C/N；或者添加緩沖劑使發(fā)酵液具有緩沖能力，也可以通過調(diào)節(jié)通氣量，使發(fā)酵液的氧化還原電位差能維持在一定范圍內(nèi)。如果在發(fā)酵過程中，pH偏高通過添加糖和淀粉來調(diào)節(jié)，而pH過低通過添加氨來調(diào)節(jié)。第五節(jié)發(fā)酵過程的控制二、影響產(chǎn)酶的重要條件

3、溶解氧影響溶解氧的因素有攪拌、通風(fēng)量和空氣流速等。

4、泡沫

5、濕度第五節(jié)發(fā)酵過程的控制三、發(fā)酵過程中的中間補料補料分為補糖，氮，無機(jī)鹽和產(chǎn)酶促進(jìn)劑，補全料和補水。第六節(jié)酶的工業(yè)提取一、發(fā)酵液預(yù)處理

1、加熱

2、凝聚和絮凝從目的物的帶電性入手。如果添加酸或堿會改變pH，改變粒子的電荷，如若電荷減少，則有可能就會發(fā)生凝聚，比較容易過濾。

3、吸附在助濾劑在過濾前添加助濾劑，使發(fā)酵液中的膠體物質(zhì)吸附在助濾劑上。最有效的助濾劑有兩種：硅藻土和珍珠巖。第六節(jié)酶的工業(yè)提取二、發(fā)酵液過濾

1、影響因素濾液的性質(zhì)、固體粒子的性質(zhì)、固液比、回收對象等

2、過濾設(shè)備板框、轉(zhuǎn)鼓真空、帶式真空過濾機(jī)第六節(jié)酶的工業(yè)提取三、酶液濃縮

常用的濃縮方法有真空濃縮和冷凍濃縮和超濾濃縮，