新型隱球菌性腦膜炎患者外周血Th1/Th2及相關(guān)T淋巴細(xì)胞水平變化及意義[摘要]目的：通過(guò)檢測(cè)新型隱球菌性腦膜炎患者外周血中Th1及Th2類細(xì)胞及NKT細(xì)胞、γδT細(xì)胞的分布比例，從患者水平進(jìn)一步了解機(jī)體T輔助淋巴細(xì)胞及相關(guān)T淋巴細(xì)胞在新型隱球菌感染過(guò)程中的作用機(jī)制。方法：收集新型隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎的16例患者（HIV檢測(cè)陰性）及作為對(duì)照組的10例正常健康人外周血標(biāo)本，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中Th1及Th2類細(xì)胞及NKT細(xì)胞、γδT細(xì)胞的在外周血T淋巴細(xì)胞中的分布比例，并采用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較。結(jié)果：1.隱腦患者（治療前）Th1細(xì)胞在CD4+T淋巴細(xì)胞中所占比例為（13.093±4.618）%，低于正常對(duì)照組的比例（19.582±4.949）%，而Th2細(xì)胞所占比例為（1.769±0.865）%，高于正常對(duì)照組的比例（0.584±0.202）%，差異皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；2.隱腦患者經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后Th1細(xì)胞在CD4+T淋巴細(xì)胞中所占比例為（16.069±1.516）%，較好轉(zhuǎn)前的比例（13.589±2.101）%增加，Th2細(xì)胞所占比例為（1.499±0.274）%，較好轉(zhuǎn)前的比例（1.673±0.290）%下降，但差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；3.隱腦患者（治療前）NKT細(xì)胞在整體T淋巴細(xì)胞中所占比例為（11.848±2.936）%，低于正常對(duì)照組的比例（17.918±8.088）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而隱腦患者的γδT細(xì)胞在整體T淋巴細(xì)胞中所占比例為（9.166±3.989）%，與正常對(duì)照組的比例（9.873±3.509）%對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；4.隱腦患者經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后NKT細(xì)胞在T淋巴細(xì)胞中所占比例為（14.806±1.513）%，較好轉(zhuǎn)前比例（11.830±1.350）%增加，γδT細(xì)胞所占比例為（6.984±0.843）%，則較好轉(zhuǎn)前比例（8.094±2.037）%下降，但差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：1.新型隱球菌性腦膜炎患者存在Th1細(xì)胞減少，Th2細(xì)胞增加，及NKT細(xì)胞在T淋巴細(xì)胞中所占比例下降，其說(shuō)明新型隱球菌性腦膜炎患者的細(xì)胞免疫功能明顯低下；2.經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后的病例，Th1/Th2失衡狀態(tài)改善，可能提示患者的細(xì)胞免疫功能恢復(fù)對(duì)疾病預(yù)后起重要作用。關(guān)鍵詞：新型隱球菌感染Th1/Th2NKTγδT新型隱球菌性腦膜炎(以下簡(jiǎn)稱隱腦)是由新型隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的真菌感染。近年來(lái)，由于廣譜抗生素，腎上腺皮質(zhì)激素，腫瘤化療、放療和器官移植后免疫抑制劑的長(zhǎng)期廣泛應(yīng)用，以及艾滋病的流行，隱腦的患病率明顯增加。在我國(guó)，隱腦大多散發(fā)，主要集中在非艾滋病的其他免疫功能缺陷人群中[1,2]。國(guó)外研究表明T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在抵御新生隱球菌的過(guò)程中具有重要的意義，其中，CD4+T細(xì)胞在此過(guò)程中起著核心作用，Th1及Th2細(xì)胞間的平衡狀態(tài)能顯著影響感染的結(jié)局[3,4]。Th1細(xì)胞及其分泌細(xì)胞因子主要引起細(xì)胞免疫，可上調(diào)機(jī)體抗新型隱球菌的各種免疫反應(yīng)，而Th2細(xì)胞及其分泌細(xì)胞因子主要引起體液免疫，可下調(diào)與Th1細(xì)胞相關(guān)的各種免疫反應(yīng)，因此，當(dāng)Th1/Th2平衡失調(diào)，Th2細(xì)胞增加時(shí)，機(jī)體抵御新型隱球菌感染能力下降，導(dǎo)致易感性增加及感染后病情進(jìn)一步發(fā)展。T細(xì)胞還存在其他亞群，其中包括自然殺傷T(NKT)細(xì)胞和γδT細(xì)胞，在各種細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)下，NKT和γδT細(xì)胞能共同調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞介導(dǎo)的抗隱球菌免疫反應(yīng)[5]，NKT細(xì)胞能調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡向Th1方向傾斜，在新型隱球菌感染中發(fā)揮保護(hù)作用，而γδT細(xì)胞則可抑制NKT細(xì)胞所介導(dǎo)的各種Th1細(xì)胞相關(guān)炎癥反應(yīng)，從而下調(diào)了機(jī)體抗新型隱球菌感染的能力。目前關(guān)于Th1/Th2平衡、NKT細(xì)胞、γδT細(xì)胞與新型隱球菌感染間的關(guān)系的研究多只限于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)水平，而對(duì)新型隱球菌感染患者組織或血液中NKT細(xì)胞、γδT細(xì)胞水平變化的研究國(guó)內(nèi)外鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)新型隱球菌性腦膜炎患者外周血中Th1及Th2類細(xì)胞及NKT細(xì)胞、γδT細(xì)胞的分布比例，探討是否與正常對(duì)照人群存在差異性，其變化是否與病情的轉(zhuǎn)歸呈相關(guān)性，從患者水平進(jìn)一步了解機(jī)體T淋巴細(xì)胞免疫在新型隱球菌感染過(guò)程中的作用機(jī)制。材料與方法1.1資料1.1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象收集2009年1月～2015年12月在中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院及廣州市第八人民醫(yī)院住院并確診為新型隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎患者的外周血標(biāo)本16例。其中男性11例,女性5例；年齡28～71歲；所有患者入院前均無(wú)在外院行抗真菌治療，無(wú)接受手術(shù)、化療、放療史，HIV抗體檢測(cè)均陰性，無(wú)明確接觸史。健康志愿者10例，來(lái)源于患者家屬、門診體檢者及工作人員。所有患者及志愿者均知情同意。1.1.2診斷與療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)①有發(fā)熱、頭痛、嘔吐和腦膜刺激征等中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染臨床表現(xiàn)；②腦脊液(CSF)墨汁染色涂片找到新型隱球菌；和/或腦脊液新型隱球菌培養(yǎng)陽(yáng)性?；颊咄瑫r(shí)具備以上兩點(diǎn)條件為確診病例。本文的治愈標(biāo)準(zhǔn)為臨床癥狀消失,每周一次連續(xù)3次腦脊液墨汁涂片及培養(yǎng)陰性；好轉(zhuǎn)為臨床癥狀明顯改善，菌體計(jì)數(shù)減少，但涂片或培養(yǎng)未轉(zhuǎn)陰；無(wú)效為臨床癥狀、體征無(wú)明顯改善，菌體無(wú)明顯變化或患者死亡。1.1.3分組本研究共入選隱腦患者16例，其中7例經(jīng)抗真菌治療后臨床癥狀明顯改善，腦脊液檢查隱球菌體計(jì)數(shù)<10個(gè)/ml，腦脊液常規(guī)及生化檢查基本正常，達(dá)到病情好轉(zhuǎn)標(biāo)準(zhǔn)。=1\*GB3①按抗真菌治療前的隱腦患者與健康志愿者將實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分為A0組及A1組；=2\*GB3②按隱腦患者自身好轉(zhuǎn)前后將檢測(cè)結(jié)果分為分為B0組及B1組；1.1.4酶抗體及試劑PE-Cy5anti-humanCD8(CD8a;alphachain)eBioscienceFITCanti-humanCD3eBiosciencePEanti-humanIL-4(Interleukin-4)eBiosciencePEanti-humanIFN-γ(Interferon-gamma)eBiosciencePEMouseIgG1,KIsotypeControleBiosciencePMAENZO(Alexis－Biomol)IonomycinENZO(Alexis－Biomol)MonensinENZO(Alexis－Biomol)Fix&Perm(固定液及溶血、破膜劑)IVGNMouseAnti-HumanCD3/16+562colorIVGNPEanti-humangammadeltaTCR(γδTCR)eBioscience1.2實(shí)驗(yàn)步驟1.2.1標(biāo)本采集受試者清晨空腹抽取靜脈血4ml，各取2ml注入EDTA抗凝管及肝素鈉抗凝管中，輕輕混勻后靜置。1.2.2標(biāo)本處理（一）Th1及Th2細(xì)胞因子（IFN-γ、IL-4）樣本制備從肝素鈉抗凝管中取200μl血液標(biāo)本于試管中，用RPMI1640等體積稀釋，加入適量PMA工作液及Ionomycin、Monensin工作液，于培養(yǎng)箱培養(yǎng)4～6小時(shí)，加入各20μlCD3單抗及CD8單抗，室溫避光孵育，分成4管后標(biāo)記，每管加入固定液，孵育后加PBS，離心，棄上清液，加入破膜及溶血液，同時(shí)各加入IFN-γ單抗、IL-4單抗及同型對(duì)照抗體，再次離心，棄上清液，重懸樣本后予流式細(xì)胞儀檢測(cè)，每個(gè)樣本每次檢測(cè)1×104個(gè)細(xì)胞。（二）NKT、γδT細(xì)胞樣本制備從EDTA抗凝管中各取100μl血液樣本加入到不同標(biāo)記的流式管中，取20μlCD3/16+56抗體及CD3+γδTCR抗體、同型對(duì)照試劑分別加入相應(yīng)的流式管內(nèi)，加入溶血素后避光反應(yīng)，再離心及棄上清液后重懸樣本，予流式細(xì)胞儀檢測(cè)，每個(gè)樣本每次檢測(cè)1×104個(gè)細(xì)胞。1.2.3流式細(xì)胞儀檢測(cè)調(diào)節(jié)儀器補(bǔ)償，采用Cellques軟件獲取分析細(xì)胞，以前向角（FSC）和側(cè)向角（SSC）散射光散點(diǎn)圖設(shè)門區(qū)分淋巴細(xì)胞，以CD3和CD8散點(diǎn)圖設(shè)門區(qū)分Th細(xì)胞（近似等于CD3+CD8-），以同型對(duì)照為陰性群，最終再以IFN-γ、IL-4的散點(diǎn)圖表示Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞。，以CD3散點(diǎn)圖設(shè)門區(qū)分T淋巴細(xì)胞，以同型對(duì)照為陰性群，再以CD16+CD56、γδTCR散點(diǎn)圖分別表示NKT、γδT細(xì)胞。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)以表示，各組數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性方差齊性檢驗(yàn)后，組間比較采用t檢驗(yàn)，P值取0.05。結(jié)果2.1.1流式細(xì)胞儀檢測(cè)散點(diǎn)圖結(jié)果2.1.1.1Th1/Th2（IFN-γ/IL-4）檢測(cè)隱腦患者IFN-γ檢測(cè)正常健康人IFN-γ檢測(cè)隱腦患者IL-4檢測(cè)正常健康人IL-4檢測(cè)2.1.1.2NKT、γδT細(xì)胞檢測(cè)

隱腦患者NKT細(xì)胞檢測(cè)正常健康人NKT檢測(cè)隱腦患者γδT細(xì)胞檢測(cè)正常健康人γδT檢測(cè)2.2.1患者、正常對(duì)照組結(jié)果顯示，Th1/Th2細(xì)胞因子、NKT、γδT細(xì)胞分布比例均與年齡、性別無(wú)相關(guān)性（P>0.05）。2.3.1隱腦患者組（治療前）、正常對(duì)照組之間Th1/Th2細(xì)胞平衡狀態(tài)比較：A0、A1兩組IFN-γ、IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞各占CD3+CD8-細(xì)胞群（近似等于CD4+T細(xì)胞）比例比較。如表1結(jié)果示A0組IFN-γ單抗陽(yáng)性細(xì)胞所占比例較A1組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；A0組IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞所占比例較A1組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。由以上結(jié)果可知經(jīng)治療前患者組Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)Th1細(xì)胞在CD4+T淋巴細(xì)胞中所占比例減少，Th2細(xì)胞所占比例增加。表1A組IFN-γ、IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞各占CD3+CD8-細(xì)胞群比例比較分組抗IFN-γ陽(yáng)性細(xì)胞占CD3+CD8-細(xì)胞群比例（%）抗IL-4陽(yáng)性細(xì)胞占CD3+CD8-細(xì)胞群比例（%）A013.093±4.6181.769±0.865A119.582±4.9490.584±0.202t-3.3934.229P值0.0020.0002.3.2隱腦患者組好轉(zhuǎn)前后Th1/Th2細(xì)胞分布比例比較：B0、B1兩組IFN-γ、IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞各占CD3+CD8-細(xì)胞群比例比較。如表2結(jié)果示經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后隱腦患者IFN-γ單抗陽(yáng)性細(xì)胞所占比例較治療前有所增加，IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞所占比例較治療前有所下降，但差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。表2B組IFN-γ、IL-4單抗陽(yáng)性細(xì)胞各占CD3+CD8-細(xì)胞群比例比較分組抗IFN-γ陽(yáng)性細(xì)胞占CD3+CD8-細(xì)胞群比例（%）抗IL-4陽(yáng)性細(xì)胞占CD3+CD8-細(xì)胞群比例（%）B013.589±2.1011.673±0.290B116.069±1.5161.499±0.274t-0.9560.440P值0.3580.6682.4.1隱腦患者組（治療前）、正常對(duì)照組之間NKT、γδT細(xì)胞分布比例比較：A0、A1兩組NKT、γδT細(xì)胞各占外周血T淋巴細(xì)胞比例比較。如表3結(jié)果示隱腦患者NKT細(xì)胞所占比例較正常對(duì)照人低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而兩組γδT細(xì)胞分布比例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。表3A組NKT、γδT細(xì)胞占外周血T淋巴細(xì)胞比例比較分組NKT占T淋巴細(xì)胞比例（%）γδT占T淋巴細(xì)胞比例（%）A011.848±2.9369.166±3.989A117.918±8.0889.873±3.509t-2.677-0.302P值0.0130.7682.4.2隱腦患者組好轉(zhuǎn)前后NKT、γδT細(xì)胞分布比例比較：B0、B1兩組NKT、γδT細(xì)胞各占外周血T淋巴細(xì)胞比例比較。如表4結(jié)果示經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后隱腦患者NKT細(xì)胞所占比例較治療前有所增加，γδT細(xì)胞所占比例較治療前有所下降，但差異皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。表4B組NKT、γδT細(xì)胞占外周血T淋巴細(xì)胞比例比較分組NKT占T淋巴細(xì)胞比例（%）γδT占T淋巴細(xì)胞比例（%）B011.830±1.3508.094±2.037B114.806±1.5136.984±0.843t-1.4680.504P值0.1680.624討論隱腦治療困難，病死率高。在我國(guó)目前感染病例報(bào)道主要以HIV陰性人群為主，但其中相當(dāng)部分患者發(fā)病前已經(jīng)存在各種基礎(chǔ)疾病，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能缺陷，T輔助細(xì)胞（CD4+T）、殺傷性T淋巴細(xì)胞（CTL）等重要免疫功能細(xì)胞進(jìn)行性減少。但近年也有研究表明無(wú)基礎(chǔ)疾病而新型隱球菌病的發(fā)病人群中可能存在著未察覺的細(xì)胞免疫低下情況，如CD4+或CD8+淋巴細(xì)胞倒置[6]、淋巴細(xì)胞亞型分配不合理等[7]。目前認(rèn)為T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)在抵御新生隱球菌感染過(guò)程中具有重要的意義，其作用機(jī)制一般認(rèn)為與體內(nèi)CD4+T的功能密切相關(guān)，其中Th1/Th2細(xì)胞間的平衡狀態(tài)被認(rèn)為是機(jī)體抵御隱球菌感染的核心機(jī)制[3,4]。Th1/Th2類細(xì)胞因子與新型隱球菌感染的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸都有密切的關(guān)系。在生理?xiàng)l件下，機(jī)體Th1/Th2細(xì)胞的免疫功能處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，如果該狀態(tài)失衡，Th1類細(xì)胞因子減少，Th2類細(xì)胞因子占優(yōu)勢(shì)，則可導(dǎo)致機(jī)體抵御新型隱球菌的免疫功能減弱或者喪失，導(dǎo)致易感性增加[3]。在既往的研究中[8,9]通過(guò)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的小鼠比較，當(dāng)缺乏Th1類細(xì)胞因子時(shí)（如IFN-γ、TNF-α等）的小鼠對(duì)隱球菌的易感性較對(duì)照組明顯增加；而在缺乏Th2類細(xì)胞因子（如IL-4、IL-10等）時(shí)小鼠感染后的癥狀則比對(duì)照組明顯為輕。在初始Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化的過(guò)程中，IL-12的表達(dá)起著至關(guān)重要的作用，而IL-12的表達(dá)同時(shí)也受到IL-18的調(diào)控，在近年的研究中[10]發(fā)現(xiàn)，通過(guò)中斷IL-12或IL-18相關(guān)基因的表達(dá)，能明顯減弱寄主Th1細(xì)胞對(duì)新型隱球菌感染的反應(yīng)，降低抵抗能力，這都說(shuō)明了Th細(xì)胞及其分泌細(xì)胞因子在抵御隱球菌感染中起著重要作用。本研究將未經(jīng)抗真菌治療隱腦患者及健康對(duì)照人群進(jìn)行對(duì)比，可發(fā)現(xiàn)在對(duì)CD4+T細(xì)胞進(jìn)行刺激后，患者組IFN-γ表達(dá)較健康人低，而IL-4表達(dá)水平則較健康人高，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其結(jié)果表明隱腦患者Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)，Th1細(xì)胞在CD4+T淋巴細(xì)胞中所占比例減少，Th2細(xì)胞所占比例增加。而在對(duì)經(jīng)治療好轉(zhuǎn)前后的隱腦患者自身進(jìn)行對(duì)比，可發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后好轉(zhuǎn)組Th1細(xì)胞所占比例較治療前增加，而Th2細(xì)胞所占比例則有所下降，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），考慮可能與入選好轉(zhuǎn)組病例數(shù)偏少有關(guān)。最近發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞還存在著其他亞群，其中NKT細(xì)胞及γδT細(xì)胞被認(rèn)為能共同調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞介導(dǎo)的抗新型隱球菌免疫反應(yīng)[5]。在對(duì)動(dòng)物感染模型的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)NKT和γδT細(xì)胞在新型隱球菌初始感染后可各自通過(guò)不同模式迅速在肺組織中聚集，而在使Vα14NKT細(xì)胞合成障礙的基因敲除小鼠中，Th1細(xì)胞相關(guān)炎癥反應(yīng)及病原微生物的清除較對(duì)照小鼠明顯減弱；而在缺乏γδT細(xì)胞的小鼠中，機(jī)體對(duì)新型隱球菌感染的保護(hù)性炎癥反應(yīng)反而得到了增強(qiáng)。在對(duì)已經(jīng)感染新型隱球菌小鼠注射NKT活化劑α-GalCer進(jìn)行治療，可發(fā)現(xiàn)NKT細(xì)胞水平明顯上調(diào)的同時(shí)，機(jī)體對(duì)組織中感染病原體的清除能力也同時(shí)得到了增強(qiáng)。在上述的研究中，NKT、γδT細(xì)胞都被認(rèn)為在機(jī)體抵抗新型隱球菌感染進(jìn)程中起著重要的作用，但其結(jié)論都基于各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果，目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)隱球菌感染患者組織或血液中NKT、γδT細(xì)胞水平變化研究的報(bào)告。本研究將未經(jīng)抗真菌治療隱腦患者及健康對(duì)照人群進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)在未經(jīng)治療的患者組NKT在T淋巴細(xì)胞中的比例較健康人明顯為低，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而γδT所占比例則與健康人無(wú)明顯差別，經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后患者組NKT比例則較治療前有所增加，γδT比例則有所下降，但其差異性皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。通過(guò)本研究結(jié)果可知，新型隱球菌性腦膜炎/腦膜腦炎患者的Th1/Th2平衡狀態(tài)失調(diào)，Th1細(xì)胞及其分泌細(xì)胞因子減少，Th2細(xì)胞及其分泌細(xì)胞因子增加，這不僅使機(jī)體對(duì)新型隱球菌易感性增加，并弱化了之后免疫系統(tǒng)針對(duì)隱球菌感染后的各項(xiàng)細(xì)胞免疫反應(yīng)，導(dǎo)致病情進(jìn)一步發(fā)展。而在經(jīng)過(guò)抗真菌治療，病情好轉(zhuǎn)，Th1/Th2失衡狀態(tài)同時(shí)亦有所改善，Th1細(xì)胞較治療前回升，而Th2細(xì)胞水平則較前下降，平衡向Th1方向傾斜，這可能提示患者的細(xì)胞免疫功能恢復(fù)對(duì)疾病預(yù)后起重要作用。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果同時(shí)可知，患者組的NKT細(xì)胞較正常人明顯為低，因此無(wú)法產(chǎn)生足夠的IFN-γ及IL-12作用于Th0細(xì)胞，使其向Th1方向分化，NKT細(xì)胞的減少亦無(wú)法激活正常數(shù)量的NK細(xì)胞，最終導(dǎo)致機(jī)體抗隱球菌感染的能力低下。由于固有免疫T細(xì)胞間可能存在著一種相互制約的關(guān)系使Th1及Th2類因子處于一種適當(dāng)?shù)钠胶鉅顟B(tài)，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示患者組的γδT細(xì)胞與正常人并無(wú)明顯差異，導(dǎo)致平衡向Th2方向傾斜，從而下調(diào)了機(jī)體抵御新生隱球菌感染能力。雖然在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證實(shí)Th1類細(xì)胞因子減少可導(dǎo)致其對(duì)新型隱球菌易感，但由于無(wú)法預(yù)先檢測(cè)隱腦患者患病前Th1及Th2類細(xì)胞因子及NKT、γδT細(xì)胞的分布比例，因此無(wú)法確定患病后其比例失調(diào)與患者本身存在免疫功能缺陷有關(guān)，還是由于隱球菌感染自身也可導(dǎo)致。目前也尚無(wú)分析感染前后Th1/Th2平