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v 1 4 4 9 關于本手冊本手冊所述信息旨在為操作人員提供指導操作人員必須具備免疫磁珠分離(IMS)的理論知識及實驗室操作經(jīng)驗。請?zhí)貏e注意用戶預期用途DynaMagCTS磁力架是適合與Dynabeads磁珠結合使用的磁性設備,可用于中等至大規(guī)模的細胞分離??梢栽跓o菌封閉系統(tǒng)中進行靶細胞的陽性分離或去除不想要的細接下頁一個底座裝置,帶有溶液桿,可容納含有填裝和沖洗溶液的袋子;以及一塊伸縮板,可容納含有(捕獲磁珠結合細胞后)殘留細胞的袋子。圖中的標準血袋和導管旋轉裝置圖1.DynaMagCTS磁力架概述7.磁角測量儀圖2.DynaMagCTS磁力架詳細介紹底座裝置底座裝置(1)支撐旋轉裝置(2)和溶液桿(3),用伸縮板底座裝置下方的伸縮板(4)提供了額外的空間,可容納至多3kg的袋子。水平放置袋子可以減輕2主磁體主磁體包括一排磁性極強的釹鐵硼永磁體。磁體排列已經(jīng)過優(yōu)化,具有高場強和磁場梯度,可介紹了采用同類磁珠分離系統(tǒng)對較大體積樣本進行連續(xù)流動分離的步驟[參考文獻2主磁體可與旋轉裝置拆分,如果需要冷分離,則可以置于冰箱內。參閱“連接和拆分主磁體”袋的下方或上方(圖9,第7頁)。當磁體位于樣本袋上方時,磁珠-細胞復合物會在重力作用下移主磁體由透明的有機玻璃蓋保護。嵌入蓋子的鐵板可以在磁力作用下對樣本袋施加壓力。此開/關把手磁體柄注:磁體的場強隨磁體表面距離呈指數(shù)型下降。在特定的應用中,如果場強過高,則可通過在接下頁主磁角測量儀通過旋轉底座并倒置主磁體,可使主磁體位于無菌袋的下方或上方。磁體可以逆時針傾斜–15°磁角測量儀磁體固定銷次級磁體由單個的釹鐵硼磁體組成,方向與柱的軸平行。采用特定的配置,由非磁性材料將單個磁體相互隔開,確保流穿系統(tǒng)中的磁性捕獲的優(yōu)化(即較大的表磁性導管夾4接下頁滾軸導軌拉磁體固定銷推5打開和關閉主磁體蓋按照下列步驟打開主磁體蓋。反向操作關閉主磁體蓋。l抬拉l抬拉開/關把手鐵板接下頁6注意:當蓋子打開時,切勿轉動主磁體。固定銷頭可能會撞到旋轉裝置,損壞蓋子。確保蓋子1123推23推接下頁7珠-細胞復合物在磁力作用下與重力呈反向移動,避免了非特異性的細胞捕獲。注:開始該過程1.取下次級磁體2.傾斜主磁體94.轉動旋轉裝置180°。5.活接下頁8?生物材料應作為具有潛在傳染性的物質進行處理,在清潔過程中9免疫磁珠分離(IMS)的將Dynabeads加入血袋中,與樣本一可直接或間接進行細胞分離:圖11顯示了直接細胞分離圖11顯示了直接細胞分離。將Dynabeads磁珠加入無菌袋的細胞群體中。在短在陽性分離中,磁珠結合的細胞被用于下游應用領域。采用去除磁珠,棄去不想要的細胞類型,將余下的未結合細胞用于下將磁珠結合的細胞保留在第一個袋子將未結合(無磁珠)細胞排入第二個袋接下頁磁珠分離的說明(續(xù))磁珠分離磁珠分離采用無菌技術完成所有步驟??膳cDynaMagCT主袋中容納包含Dynabeads磁珠的樣本和在主磁體中分離的細胞。主磁體吸引并保留磁珠-細胞復合物,而無磁珠的細胞懸液則從主磁體進入采集袋。離開主袋的所有液體先通過次級磁體,然后進入采集袋。用填裝和沖洗溶液注滿與袋子相連的導管,排出空氣后再分離。分離后,用接下頁3.確保連接管路上的所有管路磁夾和滾軸磁夾均已關閉。將含有填裝和沖洗溶液的袋子懸掛在磁珠結合細胞的分離12.打開磁體蓋,取出主袋。打開填入主袋內。輕輕重懸磁珠-細胞復合物。使用與初始磁珠捕獲的效率取決于磁珠的大小和鐵含量,以及樣本的粘度。由于條件差異,我們建議每位研究人員已經(jīng)在大鼠中研究了Dyna
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