GB××××—2009GB22253-201xPAGEGB22253—xxxxGB22253—xxxx食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿力甜的測定（征求意見稿）xxxx-xx-xx實(shí)施xxxx-xx-xx發(fā)布中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿力甜的測定（征求意見稿）xxxx-xx-xx實(shí)施xxxx-xx-xx發(fā)布中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布2010-06-01實(shí)施2010-××-××發(fā)布GB22253—xxxxPAGE5前言本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T22253-2008《食品中阿力甜的測定》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T22253-2008相比主要修改如下：——明確了方法的適用范圍；——對編制說明進(jìn)行修改；——按照GB/T20001.4-2001對原標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了修改。食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿力甜的測定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了碳酸飲料、乳飲料、濃縮果汁、果凍、膠基果糖和固體飲料中阿力甜的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于碳酸飲料、乳飲料、濃縮果汁、果凍、膠基果糖和固體飲料中的阿力甜的測定。原理根據(jù)阿力甜易溶于水和乙醇等溶劑特點(diǎn)，果凍、膠基果糖和固體飲料試樣中阿力甜用蒸餾水在超聲波振蕩下提取，提取液用水定容；濃縮果汁、碳酸飲料類試樣用蒸餾水定容；乳飲料類試樣中阿力甜用乙醇沉淀蛋白，上清液用乙醇+水（2+1）定容；提取液在液相色譜C18反相柱上進(jìn)行分離，在波長200nm處檢測，以色譜峰的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。試劑和材料注1：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室一級水。3.1試劑甲醇(CH3OH)：色譜純。乙醇(CH3CH2OH)：優(yōu)級純。3.2標(biāo)準(zhǔn)品阿力甜標(biāo)準(zhǔn)：純度≥99%。3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制阿力甜標(biāo)準(zhǔn)儲備液（0.5mg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.0500g阿力甜置于100mL容量瓶中，加入水溶解并定容至刻度，置于冰箱保存，有效期為90d。阿力甜標(biāo)準(zhǔn)工作液系列的制備:將阿力甜標(biāo)準(zhǔn)儲備液用水逐級稀釋為100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液系列。置于冰箱保存，有效期為60d。儀器和設(shè)備4.1液相色譜儀：配有二極管陣列檢測器。4.2超聲波震蕩器。4.3天平：感量為0.1mg。4.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000r/m。分析步驟試樣制備碳酸飲料稱取約10.000g試樣，50℃微溫除去二氧化碳，用水定容至25mL～50mL，混勻離心，上清液，經(jīng)0.45m水系濾膜過濾，備用。乳飲料稱取約5.000g試樣（于50mL離心管，加入10mL乙醇，蓋上蓋子，輕輕上下顛倒數(shù)次（不能振搖），靜置1min，4000rpm離心5min，上清液濾入25mL容量瓶，沉淀用5mL乙醇+水（2+1）洗滌，離心后合并上清液，用乙醇+水（2+1）定容至刻度，經(jīng)0.45m有機(jī)系濾膜過濾，備用。濃縮果汁稱取約0.500g～2.000g試樣，用水定容到25mL～50mL，混勻4000rpm離心5min，上清液經(jīng)0.45m水系濾膜過濾，備用。固體飲料、果凍、膠基果糖稱取約0.200g～1.000g試樣，加水后超聲波震蕩提取20min，并定容到25mL～50mL，混勻4000rpm離心5min，上清液經(jīng)0.45m水系濾膜過濾，備用。儀器參考條件色譜柱:ODSC18柱，4.6mm×250mm，5μm。柱溫：25℃。流動(dòng)相：甲醇+水（53＋47）。流速：0.8mL/min。進(jìn)樣量：10L。檢測器：二極管陣列檢測器。檢測波長：200nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將阿力甜標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別在上述色譜條件下測定相應(yīng)的峰面積(峰高)，以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積（峰高）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試樣溶液的測定在相同的液相色譜條件下，將試樣溶液注入液相色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以試樣峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。分析結(jié)果的表述按標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法計(jì)算試樣中阿力甜的含量。計(jì)算公式見式（1）：……（1）式中：X——試樣中阿力甜的含量，單位為克每千克（g/kg）；c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出進(jìn)樣液中阿力甜的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；V——試樣的最后定容體積，單位為毫升（mL）；M——試樣質(zhì)量，單位克（g）；1000——由μg/g換算成g/kg的換算因子。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。其他當(dāng)稱樣量為5g，定容體積為25mL，進(jìn)樣10L時(shí)，方法