【分子生物學實驗】【ExperimentalMolecularBiology】一．基本信息課程代碼：【103621】課程學分/學時：【1/16】面向?qū)I(yè)：【生物工程】課程性質(zhì)：【學科基礎必修課】開課院系：生物與醫(yī)學工程學院使用教材：主教材【自編實驗講義】輔助教材【分子生物學實驗指導劉文北京:科學出版社2018】參考教材【分子克隆實驗指南(第三版)(上下冊)（美）J.薩姆布魯克等著；黃培堂等譯北京：科學出版社2015】先修課程：【生物化學100711（4.0）生物化學實驗100724(1.5)】并修課程：【分子生物學100792(3.0)】后續(xù)課程：【基因工程原理100861（2.0）畢業(yè)設計（論文）109771（14.0）】二．課程目標分子生物學實驗是生物工程專業(yè)的基礎必修課，分子生物技術作為生物學核心技術近年來發(fā)展很快，涉及內(nèi)容很廣，從實驗主體包括了動物分子生物學技術，植物分子生物學技術，微生物分子生物學技術等。本實驗根據(jù)生物工程專業(yè)特點及東華大學特色，以細菌的分子鑒定為主線，把該實驗設計成一個彼此連貫、前后呼應的系列實驗。強調(diào)實驗方法的基礎性、實用性。實驗內(nèi)容涉及了基因工程的主要過程，DNA、質(zhì)粒的提取、引物設計、PCR、核酸電泳、限制性酶切、序列分析等。通過本課程的學習，學生應掌握分子操作基本技術，能夠利用NCBI網(wǎng)站得到所需要序列并可通過BLAST比對得出序列之間新源關系；具有很好的團隊合作意識，能協(xié)同合作處理實驗中遇見問題并合作解決；初步具有獨立設計并執(zhí)行實驗操作能力。要達成的課程目標如下:課程目標1（知識目標）:能夠掌握核酸分子的基本操作實驗，能利用專業(yè)軟件分析得到的分子生物學實驗結果，得到合理的結論。課程目標2（能力目標）:具有良好的團隊合作意識和能力，并能在分子生物學實驗過程中完成個人所承擔的任務。掌握分子生物學實驗基本原理對生物工程復雜工程問題進行分析、研究與解決，得出有效結論。能針對分子生物學實驗出現(xiàn)問題提出解決方案，在方案中綜合運用實驗所學知識和設計規(guī)范。能根據(jù)工程實踐學習經(jīng)歷對解決方案的可行性進行初步評價；在分子生物學實驗的設計中體現(xiàn)創(chuàng)新意識，分析改進的方案。課程目標3（素質(zhì)目標）：能夠養(yǎng)成學以致用的素養(yǎng)，從分子生物學實驗角度主動思考關注社會熱點、前沿問題，將所學分子生物學實驗知識與合成生物學相結合，理解其在合成生物學中的地位。使學生樹立正確的學習觀和價值觀；具備質(zhì)疑求實的科學態(tài)度和嚴謹?shù)倪壿嬎季S；塑造學生的職業(yè)精神與工匠精神，增強學生的時代責任感和使命感。三．課程基本內(nèi)容及要求（一）教學內(nèi)容結構關系圖（二）課程內(nèi)容及要求表2教學內(nèi)容及對應的課程目標課程內(nèi)容對應課程目標學生學習成果學時安排實驗一細菌基因組提?。ㄋ颊?nèi)容：人類基因組計劃，當時中國在該項目中的作用。文化自信）1，2掌握利用SDS法或試劑盒提取基因組DNA的基因操作過程。4實驗二DNA質(zhì)量分析：比色、電泳（思政內(nèi)容：內(nèi)因是基礎，外因是輔助）1，2掌握水平板瓊脂糖凝膠的制備過程及電泳；紫外比色測定核酸質(zhì)量及濃度方法。4實驗三16SrDNA擴增、電泳檢測與T載體連接1，2利用已合成的細菌16SrDNA引物擴增細菌基因組DNA4實驗四E.coli感受態(tài)制備1，2掌握CaCl2法制備大腸桿菌感受態(tài)方法。4實驗五質(zhì)粒轉(zhuǎn)化1，2掌握熱擊法將外源DNA轉(zhuǎn)化入大腸桿菌。4實驗六挑菌落、PCR驗證（思政內(nèi)容：通常在實驗結果中會出現(xiàn)的一些反常現(xiàn)象，以及學生由此產(chǎn)生的一些負面情緒，告訴學生對待非預期實驗結果不要害怕，不要躲避，而是要從中發(fā)現(xiàn)有可能的科學研究創(chuàng)新點。）1，2掌握PCR法驗證陽性克隆。4實驗七質(zhì)粒提取1，2掌握堿裂解法提取細菌質(zhì)粒。4實驗八酶切、PCR（與菌落PCR比較）1，2掌握核酸的限制性酶切過程。4實驗九測序及序列分析（課外練習）1，2，3掌握利用NCBI已知序列分析（Blast）未知序列方法并進行細菌進化樹構建,撐握DNAStar及MEGA使用方法。4（課外學時）合計32+4（課外學時）四．課程考核方式與評分標準（一）課程考核方式 考核方式包括實驗考勤、實驗操作及實驗報告，考核內(nèi)容及所見比例如下。表3課程成績構成表課程目標考核內(nèi)容考核方式課程目標占總成績的比例實驗考勤、實驗操作實驗報告課程目標1核酸分子的基本操作實驗，利用專業(yè)軟件分析分子生物學實驗結果。70%40%50%課程目標2團隊合作意識和能力，實驗過程中完成個人所承擔的任務。利用分子生物學基本原理對生物工程復雜工程問題進行分析、研究與解決。針對分子生物學實驗出現(xiàn)問題的解決方案。工程實踐學習經(jīng)歷對解決方案的可行性的評價，在分子生物學實驗的設計中體現(xiàn)的創(chuàng)新意識，分析改進的方案。20%35%30%課程目標3養(yǎng)成學以致用的素養(yǎng)，從分子生物學實驗角度主動思考關注社會熱點、前沿問題，將所學分子生物學實驗知識與合成生物學相結合，理解其在合成生物學中的地位。使學生樹立正確的學習觀和價值觀；具備質(zhì)疑求實的科學態(tài)度和嚴謹?shù)倪壿嬎季S；塑造學生的職業(yè)精神與工匠精神，增強學生的時代責任感和使命感。10%25%20%考核方式占總成績的比例50%50%100%（二）評分標準1、實驗報告評分標準實驗報告滿分均為100分，60分及以上為及格。每位學生獨立完成實驗報告。表4實驗報告評分標準91-100分75-90分59-74分1-59分0分評分標準內(nèi)容正確字跡工整修改痕跡少內(nèi)容基本正確字跡工整能夠認真修改內(nèi)容正確率低字跡較工整修改痕跡較多抄襲報告不交報告2、實驗考勤、操作評分標準由教師、助教進行評分，操作考試（40%）、考勤及平時表現(xiàn)（10%）、實驗報告（50%）平時成績基準分為80分，曠課一次扣5分，遲到一次扣2-3分，打掃衛(wèi)生，積極進行實驗中出現(xiàn)的公共問題的處理，加5-10分。實驗操作滿分均為100分，60分及以上為及格。表5實驗操作評分標準91-100分75-90分59-74分1-59分0分評分標準遵守實驗操作規(guī)程，按要求，認真操作；細心觀察實驗現(xiàn)象，認真記錄實驗數(shù)據(jù)，作出結論；愛護公物，小心使用儀器和實驗設備，注意節(jié)約用水、電、藥品和器材；實驗完畢后，認真清點整理好儀器及其他設備。玻璃儀器要洗刷干凈擺放整齊，經(jīng)老師允許后離開實驗室。遵守實驗操作規(guī)程，按要求，認真操作；能夠觀察實驗現(xiàn)象，記錄實驗數(shù)據(jù)，作出結論；愛護公物，小心使用儀器和實驗設備，注意節(jié)約用水、電、藥品和器材；實驗完畢后，認真清點整理好儀器及其他設備。玻璃儀器要洗刷干凈擺放整齊，經(jīng)老師允許后離開實驗室?；咀袷貙嶒灢僮饕?guī)程，按要求，認真操作；能夠觀察實驗現(xiàn)象，記錄實驗數(shù)據(jù)，作出結論；較愛護公物，小心使用儀器和實驗設備，注意節(jié)約用水、電、藥品和器材；實驗完畢后，能夠認真清點整理好儀器及其他設備。玻璃儀器要洗刷干凈擺放整齊，經(jīng)老師允許后離開實驗室