安徽省滁州三中2025屆高考仿真卷生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結果見下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細菌Ⅰ5.111.22.2細菌Ⅱ8.113.01.6有關本實驗的敘述，錯誤的是A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異2．下列有關教材中應用的素材事實和結論不匹配的是（）A．變形蟲切割實驗中無核部分不能攝取食物，說明細胞核控制細胞的遺傳B．人的細胞和小鼠的細胞融合，一段時間后紅色、綠色熒光均勻分布，說明細胞膜具有流動性C．加拉帕格斯群島上地雀的形成，說明通過長期的地理隔離可以形成新物種D．食蟲鳥數量增多抑制害蟲數量增多，說明生物群落內部存在負反饋調節(jié)3．為了解赤霉索(GA3)和烯效唑（一種生長調節(jié)劑）對大豆幼苗生長的影響，研究人員先分別用61mg/L的GA3和1．25μmol/L的烯效唑浸種，再在適宜條件播種，測得大豆幼苗光合速率如圖。有關敘述錯誤的是（）A．GA3和烯效唑實驗濃度的確定應來自預實驗B．應以清水浸種作為對照，其它條件與實驗組相同C．GA3對大豆幼苗生長作用表現(xiàn)出兩重性D．適宜濃度的烯效唑能提高大豆幼苗的光合速率4．某生物興趣小組探究溫度和營養(yǎng)物質X對酵母菌種群數量變化的影響，進行的實驗及其結果如下表所示：實驗組別實驗處理實驗條件實驗結果實驗1？在其他條件相同且適宜的情況下進行培養(yǎng)實驗2培養(yǎng)液10mL，加入干酵母0.1g，環(huán)境溫度28℃實驗3培養(yǎng)液10mL，加入干酵母0.1g，環(huán)境溫度5℃下列相關敘述正確的是（）A．實驗1處理應為培養(yǎng)液5ml，加入干酵母0.1g，環(huán)境溫度28℃B．實驗2在該實驗中起對照作用，其對應的實驗結果為曲線a所示C．b組前6天種群密度對其增長的制約逐漸減弱·增加培養(yǎng)液后曲線與a一致D．計數時若視野內酵母菌數目太多，須通過預實驗確定最適稀釋度再進行統(tǒng)計5．“率”是指兩個相關的數在一定條件下的比值，有關生物學中幾個“率”的敘述不正確的是()A．對種群的大小和種群密度起決定作用的是出生率和死亡率B．生態(tài)農業(yè)的建立，提高了各營養(yǎng)級間的能量傳遞效率C．種群數量變化的“J”型曲線中，能保持穩(wěn)定的是種群增長率D．適當降低溫度可以降低綠色植物的細胞呼吸速率6．下列關于細胞結構和功能的敘述，正確的是A．生長素從頂芽運輸至側芽的過程主要由線粒體供能B．吞噬細胞攝取、處理抗原與溶酶體中的溶菌酶有關C．高等植物成熟篩管細胞在衰老過程中染色質要收縮D．低等植物細胞分裂末期細胞板的形成與中心體有關7．已知果蠅的灰體與黑檀體為一對相對性狀，直毛與分叉毛為另一對相對性狀，兩對相對性狀各由一對等位基因控制。一只灰體分叉毛雄蠅與一只黑檀體直毛雌蠅雜交，F(xiàn)1為灰體直毛，F(xiàn)1果蠅相互交配得到的F2中，灰體直毛：黑檀體直毛：灰體分叉毛：黑檀體分叉毛=9：3：3：1。下列分析錯誤的是（）A．灰體對黑檀體為顯性、直毛對分叉毛為顯性B．控制上述兩對相對性狀的等位基因獨立遺傳C．控制直毛和分叉毛的基因可能位于常染色體上D．控制灰體和黑檀體的基因可能僅位于X染色體上8．（10分）機體缺氧時缺氧誘導因子（HIF）聚集到細胞核中激活靶基因特定的DNA片段（HRE），促進促紅細胞生成素（EPO）的合成。EPO是一種糖蛋白質激素，可作用于骨髓造血組織，促進紅細胞生成改善缺氧。氧含量的增加促進HIF解體，以減少EPO的合成，調節(jié)過程如圖所示。下列說法正確的是（）A．EPO合成場所是細胞核B．缺氧時，EPO在HIF的作用下轉變成了血紅蛋白C．氧氣充足時，HIF被解體以減少EPO的合成，這屬于負反饋調節(jié)D．EPO作用的靶細胞是紅細胞，紅細胞數量增加可以改善缺氧情況二、非選擇題9．（10分）提高作物的光合速率是提高作物產量的關鍵措施。請回答下列問題：（1）小面積種植時，當陽光不足或日照時間過短時，可以通過____________的措施來提高作物光合效率。植物吸收的光能用于___________。光照強度較弱時，植物吸收CO2的速率減慢，出現(xiàn)這種變化的原因是_________。（2）研究發(fā)現(xiàn)，噴施低濃度的NaHSO3溶液能提高光合速率從而提高小麥生長速率。為了驗證NaHSO3是通過影響光合速率而不是通過影響呼吸速率來提高小麥植株的生長速率的，請以小麥幼苗和2mmol·L-1的NaHSO3溶液等為材料。設計實驗驗證這一結論。（要求簡要寫出實驗思路和預期結果）實驗思路：_____________________________________________________________________________。預期結果：_____________________________________。10．（14分）下圖為某正常生長的植物葉肉細胞內進行的光合作用和細胞呼吸的圖解（①~⑤代表物質，Ⅰ~Ⅴ表示生理過程）。據圖回答下列問題：（1）過程Ⅰ中吸收藍紫光和紅光的色素位于________________上，以________________作圖，所得的曲線就是該色素的吸收光譜。（2）物質②能為過程Ⅱ中的關鍵步驟提供________________，物質③和④依次代表________________。若將圖中的光照撤離，則短時間內三碳酸的生成速率將________________。若利用過程Ⅱ的產物進行細胞呼吸并在過程Ⅲ中產生了6個ATP，則過程Ⅱ的循環(huán)需要進行________________輪。（3）過程Ⅱ從根本上受到光的驅動。在光照條件下，水的裂解使H+在類囊體腔內積累，同時電子在類囊體膜上傳遞的過程中，H+又被不斷由________________運向類囊體腔累積，因此過程Ⅱ的幾個關鍵酶的最適pH________________7（填“＞”“＝”“＜”）。11．（14分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關性疾病有關，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進行鼠源GFP-VNNI重組質粒的構建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構建重組質粒，研究小組從數據庫查找到VNNl的DNA序列，并設計引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點），之后進行PCR擴增，PCR的原理是________。擴增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構建重組質粒。（2）GFP基因在重組質粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質粒切割后，進行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結果表明________。（3）IL-6為體內重要的炎癥因子，能與相應的受體結合，激活炎癥反應。圖2為GFP-VNNI重組質粒對細胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質粒轉染組IL-6的表達有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。12．某XY型性別決定植物，籽粒顏色與甜度由常染色體上基因決定。用兩種純合植株雜交得F1，F(xiàn)1雌雄個體間雜交得F2，F(xiàn)2籽粒的性狀表現(xiàn)及比例為紫色非甜∶紫色甜∶白色非甜∶白色甜=27∶9∶21∶7。請回答下列問題。（1）紫色與白色性狀的遺傳由_________對等位基因決定，遵循基因的_________定律。（2）親本性狀的表現(xiàn)型的可能組合是_________。（3）若F2中的白色籽粒發(fā)育成植株后，彼此間隨機受粉，得到的籽粒中紫色籽粒占_________。（4）若一株紫色籽粒的雄性植株的葉型表現(xiàn)為異形葉，該異形葉植株與雙親及周圍其他個體的葉形都不同，若該葉形由核內顯性基因控制，讓該異形葉植株與正常植株雜交，得到足夠多的F1植株，統(tǒng)計F1表現(xiàn)型及比例為異形葉雄∶正常葉雄∶異形葉雌∶正常葉雌=1∶1∶1∶1，此結果說明該異形葉植株為_________（填純合子或雜合子）_________（填“可以確定”或“不可以確定”）該基因位于常染色體上。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，會產生透明圈?！驹斀狻颗囵B(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會產生透明圈，說明兩種菌均可以產生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；淀粉分解菌的H/C越大，說明其產生的淀粉酶分解的淀粉相對越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。因此，本題答案選C。2、A【解析】

細胞核是遺傳和代謝的控制中心，是遺傳信息庫。隔離是新物種形成的必要條件，新物種形成的標志是產生生殖隔離?！驹斀狻緼、變形蟲切割實驗中無核部分不能攝取食物，說明細胞核控制細胞代謝，A錯誤；B、人細胞和小鼠細胞融合后紅綠熒光均勻分布，說明細胞膜具有流動性，B正確；C、加拉帕格斯群島上地雀的形成，首先經過地理隔離不能進行基因交流，之后產生生殖隔離，形成新物種，說明通過地理隔離可以形成新物種，C正確；D、食蟲鳥數量增多抑制害蟲增多，說明生物群落內部存在負反饋調節(jié)，二者數量相互抑制，共同進化，D正確。故選A。3、C【解析】

分析題圖：該實驗的自變量是赤霉索(GA3)和烯效唑與處理后的時間，因變量是光合速率，據此分析作答?！驹斀狻緼、實驗開始前進行預實驗是為進一步的實驗摸索出較為可靠的濃度探究范圍，以避免由于設計不當，盲目開展實驗，A正確；B、根據實驗設計的對照原則，對照組應不添加實驗變量，故應以清水組作為對照；按照實驗的無關變量一致原則，其它條件應與實驗組相同，B正確；C、兩重性是指低濃度促進，高濃度抑制的作用，與對照相比，出苗14天后后隨濃度升高，GA3對大豆幼苗生長均表現(xiàn)為促進，不能體現(xiàn)兩重性，C錯誤；D、據實驗結果可知，在實驗濃度下，使用烯效唑的實驗組對于幼苗光合速率的提高均有促進效果，故適宜濃度的烯效唑能提高大豆幼苗的光合速率，D正確。故選C?！军c睛】明確實驗設計的變量原則及兩重性的含義，并能結合題圖分析作答是解答本題的關鍵。4、B【解析】

本課題的目的是探究溫度和營養(yǎng)物質X對酵母菌種群數量變化，所以自變量是溫度和有無營養(yǎng)物質X，所以實驗1加入無菌水，溫度影響酶的活性從而影響微生物種群數量的變化?！驹斀狻緼、實驗1處理應為無菌水10mL，加入干酵母0.1g，環(huán)境溫度28℃；若為培養(yǎng)液5mL，加入干酵母0.1g環(huán)境溫度28℃，曲線前期應上升較快，A錯誤；B、實驗2養(yǎng)分充足、溫度適宜，起到了對照作用其結果對應曲線a，B正確；C、b組對應實驗3，前6天種群密度對其增長的制約逐漸增強，若增加培養(yǎng)液其曲線也無法與a組一致，因其還受溫度制約，C錯誤；D、計數時，若視野內酵母菌數目太多可增大稀釋度，不一定必須通過預實驗來確定稀釋度，預實驗可為進一步的實驗摸索條件，并不能確定最適的稀釋度，D錯誤。故選B?！军c睛】本題考查探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量變化的相關知識，關鍵是要根據曲線圖中種群數量的變化規(guī)律分析出酵母菌生長的條件，找準實驗自變量和因變量。5、B【解析】

A項，出生率和死亡率決定種群密度和種群數量，故A項正確。B項，食物鏈能量的傳遞效率在10%~20%之間，不能提高，能量只能多級利用，故B項錯誤。C項，J型曲線中，種群增長率不變，種群數量持續(xù)增長，故C項正確。D項，當適當降低溫度時，會抑制有關細胞呼吸的酶的活性，所以細胞呼吸速率降低，故D項正確。故選B。6、A【解析】

1、植物細胞中生長素的運輸方式有：橫向運輸、極性運輸和非極性運輸，三種運輸方式都需要消耗能量，主要由線粒體提供；2、吞噬細胞通過胞吞作用攝取抗原，需要消耗能量；3、沒有成形細胞核的細胞有：成熟篩管細胞、哺乳動物成熟的紅細胞等?！驹斀狻緼、生長素從頂芽運輸到側芽是極性運輸，需要消耗能量，主要由線粒體提供，A正確；B、吞噬細胞將抗原攝入細胞內，與細胞膜的流動性有關，對于攝入細胞的抗原可利用溶酶體中的溶菌酶處理，B錯誤；C、高等植物的篩管細胞在成熟過程中，細胞核已退化、消失，衰老過程中無細胞核的變化，C錯誤；D、低等植物細胞分裂末期細胞板的形成于高爾基體有關，D錯誤。故選A。7、D【解析】

相對性狀的親本雜交，子代只有一種表現(xiàn)型，則可判斷子代出現(xiàn)的性狀即為顯性性狀。XY型性別決定的生物，隱性性狀的雌性和顯性性狀的雄性雜交，若子代雌性均為顯性性狀，雄性均為隱性性狀，則可判斷基因位于X染色體上?！驹斀狻緼、因為灰體分叉毛雄蠅與黑檀體直毛雌蠅雜交，F(xiàn)1表現(xiàn)為灰體直毛，因此灰體對黑檀體為顯性、直毛對分叉毛為顯性，A正確；B、F1果蠅相互交配得到的F2中，灰體直毛：黑檀體直毛：灰體分叉毛：黑檀體分叉毛=9：3：3：1，符合基因自由組合定律，B正確；C、單獨分析毛型這對表現(xiàn)型，分叉毛雄蠅×直毛雌蠅，F(xiàn)1全為直毛，F(xiàn)2中直毛與分叉毛的比例為3：1，僅根據以上數據我們不能準確判斷出控制果蠅毛型的基因是位于常染色體上還是僅位于X染色體上，需要補充數據，如統(tǒng)計分叉毛個體的性別比例，C正確；D、單獨分析體色這對表現(xiàn)型，若控制果蠅體色的基因僅位于X染色體上，灰體雄蠅×黑檀體雌蠅，后代雌蠅應全為灰體，雄蠅應全為黑檀體，這與實驗結果不符，因此控制果蠅體色的基因不可能僅位于X染色體上，D錯誤。故選D?！军c睛】本題旨在考查學生對于伴性遺傳規(guī)律、基因的自由組合定律的實質和應用的理解，根據子代表現(xiàn)型在雌雄個體間的比例判斷性狀遺傳是常染色體遺傳還是性染色體的遺傳的方法的掌握程度，并應用相關知識對某些遺傳問題進行解釋、推理、判斷的能力。8、C【解析】

1.激素作用的一般特征：微量高效、通過體液運輸、作用于靶器官靶細胞。2.激素既不組成細胞結構，又不提供能量，也不起催化作用，而是隨體液到達靶細胞，使靶細胞原有的生理活動發(fā)生變化，是調節(jié)生命活動的信息分子?！驹斀狻緼、題意顯示EPO是糖蛋白質激素，故其合成場所是核糖體，A錯誤；B、缺氧時，（HIF）聚集到細胞核中激活靶基因特定的DNA片段（HRE），促進促紅細胞生成素（EPO）的合成EPO，EPO作用于骨髓造血組織，促進紅細胞生成改善缺氧，并非是EPO在HIF的作用下轉變成了血紅蛋白，B錯誤；C、氧氣充足時，HIF被解體以減少EPO的合成，從而維持了血液中紅細胞數目的穩(wěn)定，該過程屬于負反饋調節(jié)，C正確；D、結合題意可知，EPO作為一種激素，其作用的靶細胞是骨髓造血干細胞，造血干細胞增殖分化為紅細胞，使紅細胞數量增加，改善缺氧情況，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、補充人工光照光反應中水的光解和ATP的合成光反應產生的[H]和ATP較少，還原C3化合物較慢，使CO2的固定速率減慢，故植物吸收的CO2減少取生長狀況相同的小麥幼苗若干，平均分為四組，置于密閉容器中，記為甲、乙、丙、丁組，測定各組密閉容器中的二氧化碳含量并記錄。甲組用一定量的2mmol·L-1的NaHSO3溶液噴施小麥幼苗，不遮光，乙組用等量清水噴施小麥幼苗，不遮光；丙組用與甲組等量的2mmol·L-1的NaHSO3溶液噴施小麥幼苗，并遮光，丁組用等量清水噴施小苗幼苗，并遮光。將四組置于其他培養(yǎng)條件相同且適宜的環(huán)境下，一段時間后測量并記錄各組密閉容器中二氧化碳含量。甲組和乙組對比，甲組密閉容器中二氧化碳減少的更多，丙組和丁組對比，兩組中CO2增加的量相同【解析】

影響光合作用的主要外界因素有光照強度、CO2濃度和溫度等，光合作用過程分為光反應和暗反應，光反應為暗反應提供[H]和ATP，暗反應為光反應提供ADP和Pi，所以光反應和暗反應是緊密聯(lián)系、缺一不可的整體?！驹斀狻浚?）小面積種植時，當陽光不足或者光照時間過短時，可以通過補充人工光照的措施提高作物光合效率。植物吸收的光能一方面使水光解產生[H]和氧氣，另一方面可促使ADP與Pi轉變成ATP。光照強度較弱時，植物吸收CO2的速率減慢，主要是因為光照強度較弱時，葉片中葉綠體中的光反應速率減慢，產生的[H]和ATP減少，還原C3化合物較慢，使CO2的固定速率減慢，因此所需要的CO2減少。（2）本實驗是為了驗證低濃度的NaHSO3是通過影響光合速率而不是通過影響呼吸速率來提高小麥植株的生長速率的，即實驗目的為兩個，所以應設四組實驗，兩兩對照。其中兩組用來驗證低濃度的NaHSO3可影響光合速率，另外兩組可用來驗證低濃度的NaHSO3不影響呼吸速率。所以實驗思路為：取生長狀況相同的小麥幼苗若干，平均分為四組，置于密閉容器中，記為甲、乙、丙、丁組，測定各組密閉容器中的二氧化碳含量并記錄。甲組用一定量的2mmol·L-1的NaHSO3溶液噴施小麥幼苗，不遮光，乙組用等量清水噴施小麥幼苗，不遮光；丙組用與甲組等量的2mmol·L-1的NaHSO3溶液噴施小麥幼苗，并遮光，丁組用與乙組等量清水噴施小苗幼苗，并遮光。將四組置于其他培養(yǎng)條件相同且適宜的環(huán)境下，一段時間后測量并記錄各組密閉容器中二氧化碳含量。實驗的預期結果為：甲組和乙組對比，甲組密閉容器中二氧化碳減少的更多，丙組和丁組對比，兩組中CO2增加的量相同?！军c睛】本題考查影響光合速率和呼吸速率的因素，意在考查考生的實驗分析和設計能力。10、葉綠體的類囊體膜(光合膜)這種物質對不同波長光的吸收率為縱坐標，以波長為橫坐標能量和氫三碳糖和RuBP（或核酮糖二磷酸）減小18葉綠體基質＞【解析】

光反應與碳反應的反應式如表所示。光反應碳反應水的光解：H2O→H++O2+e-CO2的固定：CO2+RuBP→三碳酸ATP的合成：ADP+Pi+能量→ATP三碳酸的還原：三碳酸→三碳糖NADPH的合成：NADP++H++能量→NADPHRuBP的再生：三碳糖→RuBP能量轉化：光能→電能→ATP、NADPH中活躍的化學能能量轉化：ATP、NADPH中活躍的化學能→有機物中穩(wěn)定的化學能【詳解】（1）過程Ⅰ為光反應階段，場所位于類囊體膜，吸收藍紫光和紅光的色素位于葉綠體的類囊體膜(光合膜)上。以這種物質對不同波長光的吸收率為縱坐標，以波長為橫坐標作圖，所得的曲線就是該色素的吸收光譜。（2）物質②為NADPH，能為過程Ⅱ（碳反應）中的關鍵步驟（三碳酸的還原）提供能量和氫。物質③為三碳酸還原得到的三碳糖，④為固定CO2的RuBP（或核酮糖二磷酸）。若將圖中的光照撤離，RuBP（或核酮糖二磷酸）生成減少，短時間內三碳酸的生成速率將減?。ǖ孜镒兩伲Ｈ衾眠^程Ⅱ的產物（糖類）進行細胞呼吸，并在過程Ⅲ（糖酵解）中產生了6個ATP，1分子丙酮酸產生2分子ATP，1分子葡萄糖產生2分子丙酮酸，說明碳反應產生了3分子葡萄糖，而離開卡爾文循環(huán)（碳反應產生）的葡萄糖（C6H12O6）有3分子的話，說明有18個碳原子離開了卡爾文循環(huán)，1分子CO2參與1次卡爾文循環(huán)有1個碳原子離開循環(huán)，因此過程Ⅱ的循環(huán)需要進行18輪。（3）過程Ⅱ從根本上受到光的驅動。在光照條件下，水的裂解使H+在類囊體腔內積累，同時電子在類囊體膜上傳遞的過程中，H+又被不斷由葉綠體基質運向類囊體腔累積，因此葉綠體基質中H+的濃度較低，過程Ⅱ為碳反應，場所為葉綠體基質，因此幾個關鍵酶的最適pH＞7?！军c睛】本題重點考查光合作用過程以及和呼吸的聯(lián)系，識圖是關鍵。11、DNA雙鏈復制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標記基因鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中（合理即可）VNN1基因表達產物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對細胞的損傷（或用到的化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。第二步：基因表達載體的構建第三步：將目的基因導入受體細胞常用的轉化方法：將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是顯微注射技術；將目的基因導入微生物細胞：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。第四步：目的基因的檢測和表達?！驹斀狻浚?）PCR的原理是DNA雙鏈復制，為防止切割的質粒環(huán)化，通常選擇兩種的限制酶進行切割，同時需要用相同的限制酶對目的基因進行處理，所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用DNA連接酶處理形成重組質粒。（2）GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，所以在重組質粒中可以作為標記基因；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來；電泳條帶顯示分子量增加表明VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中。（3）從柱狀圖中看出VNN1組中IL-6的濃度增加