PAGE4-海洋生物制藥復習提綱海洋生物制藥涵義應用海洋藥源生物具明確藥理作用的活性物質(zhì),按制藥工程進行系統(tǒng)的研究，研制成為海洋藥物的制藥工程。海洋生物制藥品種與藥品特點品種：中藥，化學藥（西藥），生物制品特點：①是新發(fā)展的藥物研究領域②藥源來自海洋藥用生物③海洋生物活性物質(zhì)含量低微、結(jié)構(gòu)奇特、活性顯著，是海洋生物制藥先導化合物的豐富來源。應用海洋生物活性物質(zhì)研發(fā)海洋生物新藥的途徑與思路研發(fā)途徑：活性物質(zhì)——構(gòu)效關系————藥物 研發(fā)構(gòu)思：①了解海洋生物活性物質(zhì)的特點：活性集中（抗腫瘤）；來源于低等動植物；化學結(jié)構(gòu)、生物來源具多樣性，含量低 ②采集與提取標準化 ③藥理篩選④結(jié)合現(xiàn)代生物技術，保證可持續(xù)發(fā)展利用：再生資源優(yōu)先開發(fā)；養(yǎng)殖的工業(yè)化和生物合成；生物反應器及基因工程技術的應用；必須立足我國特有的海洋藥用生物資源研發(fā)海洋生物一類新藥我國海洋生物制藥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的重點領域（1）海洋生物抗癌藥物的研究（2）海洋生物心腦血管藥物的研究（3）海洋生物抗菌、抗病毒藥物研究（4）海洋生物消化系統(tǒng)藥物的研究（5）海洋生物鎮(zhèn)痛抗炎藥物的研究（6）海洋生物泌尿系統(tǒng)藥物研究（7）海洋生物免疫調(diào)節(jié)作用藥物的研究（8）海洋生物毒素先導化合物的研究海洋生物的特點（海洋生物活性成分特異性的原因）（1）生活環(huán)境與陸生生物迥然不同：有一定的水壓、高鹽度、小溫差、有限的溶解氧、有限的光照及化學緩沖海水體系；（2）次生代謝產(chǎn)物較陸生生物獨特新穎：新陳代謝、生存繁殖方式、適應機制具有顯著特性；（3）化合物結(jié)構(gòu)獨特、生物活性多樣；（4）開展海洋藥物研究具有重要的理論意義與實際應用價值。藻酸雙酯鈉PSS的研制（來源、修飾、研制單位和領軍人物）與它的藥理作用3種已經(jīng)開發(fā)的海洋藥物的藥理作用與其來源海洋生物有效化學成份的概念和主要的化學成分種類概念：指從海洋生物中分離純化出具有生物活性的天然有機化合物。種類：①大環(huán)內(nèi)酯類；②聚醚類化合物；③肽類化合物；④C15乙酸原化合物；⑤前列腺類似物溶劑分離法的原理與選用溶劑的注意點。原理：根據(jù)活性物質(zhì)在溶劑中溶解度（極性）的差異分離選擇溶劑注意點：①對有效成分溶解度大,對雜質(zhì)溶解度??；②不與化學成分起化學變化；③經(jīng)濟、易得、使用安全色譜法原理及其分類。原理：利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇分配性，以流動相對固定相中物質(zhì)進行洗脫，混合物中不同物質(zhì)會以不同速度沿固相移動，最終達到分離效果超臨界流體萃取的原理,什么是超臨界CO2萃取及其特點原理：利用流體在超臨界狀態(tài)時具有密度大、粘度小、擴散系數(shù)大等優(yōu)良的傳質(zhì)特性而成功開發(fā)的，具有提取率高、產(chǎn)品純度好、流程簡單、能耗低的特點。超臨界CO2萃?。阂猿R界狀態(tài)下的CO2為溶劑，利用該狀態(tài)下流體CO2所具有的高滲能力和高溶解能力分離混合物的過程。特點：①可以在接近室溫(35-40℃)及CO2氣體籠罩下進行提取，有效地防止了熱敏性物質(zhì)的氧化和逸散，完整保留生物活性，而且能把高沸點，低揮發(fā)渡、

易熱解的物質(zhì)在其沸點溫度以下萃取出來。②由于全過程不用有機溶劑，因此萃取物絕無殘留溶媒，同時也防止了提取過程對人體的毒害和對環(huán)境的污染，100%的純天然，符合當今“綠色環(huán)保”、“回歸自然”的高品位追求。③控制工藝參數(shù)可以分離得到不同的產(chǎn)物，可用來萃取多種產(chǎn)品，而且原料中的重金屬、無機物、塵土等都不會被CO2溶解帶出。④蒸餾和萃取合二為一，可以同時完成蒸餾和萃取兩個過程，尤其適用于分離難分離的物質(zhì)，如有機混合物、同系物的分離精制等

。⑤能耗少；熱水、冷水全都是閉路循環(huán)，無

廢水、廢渣排放。CO2也是閉路循環(huán)，僅在排料時帶出少許，不會污染環(huán)境。由于能耗少、用人少、物料消耗少，所以運行費用非常低。高速逆流色譜儀(HSCCC)如何做到化合物樣品的分離（1）樣品中一種高分配系數(shù)的化合物在固定相中的濃度要高于在流動相中的濃度，要晚一些從柱子里洗脫出來。（2）另一種低分配系數(shù)的化合物在流動相中的濃度要高于在固定相中的濃度，要早一些洗脫出來。（3）如果一種化合物在兩相中的是平均分配的(D=1)

，不論哪一相溶劑被選為流動相，在流動相流出1倍柱體積的量后，這種化合物都會被洗脫出來。質(zhì)譜儀器中最主要的三種離子是什么？分子離子的三個特征是什么？分子離子：樣品分子失去一個電子而形成的離子稱為分子離子。同位素離子：由重同位素組成的分子形成的離子碎片離子：由M+·或碎片離子單分子裂解產(chǎn)生的離子特征：①質(zhì)核比為分子量；②是奇電離子，分子失去一個價電子生成的離子；③并非所有的有機物分子離子都能出現(xiàn)質(zhì)譜在鑒定海洋天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的應用有哪些？（1）（最基本）提供分子量信息（2）確定碎片離子（3）確定有機化合物的元素組成及其分子式（4）確定有機化合物的結(jié)構(gòu)式海洋藥用無脊椎動物的主要生物學來源有哪幾個門,各舉一例,并說明其主要的藥用價值。（1）多孔動物門：海綿，活體檢測水質(zhì)，具有抗腫瘤活性物質(zhì)。（2）環(huán)節(jié)動物門：沙蠶，提取沙蠶毒素。是一種仿殺蟲劑。（3）腔腸動物門：海蜇，治療心血管疾病。珊瑚，抑制癌細胞增長。（4）軟體動物門：貝類、烏賊、海兔，中藥：厴，海螵鞘，石決明，珍珠。（5）節(jié)肢動物門：蝦、蟹、鱟，甲殼質(zhì)、殼聚糖。（6）苔蘚動物門：苔蟲素防腐蝕劑，抗癌，促進造血。（7）棘皮動物門：海星、海膽、海參海洋藥用大型藻類的主要生物學來源有哪幾個門，各舉一例，并說明其主要的藥用價值。門類：紅藻門（石花菜）、褐藻門（裙帶菜）、輪藻門（苦草）藥用價值：①石花菜：清肺化痰、清熱燥濕，滋陰降火、涼血止血②裙帶菜：抗癌③苦草：清熱解毒，止咳祛痰，養(yǎng)筋和血。用于急、慢性支氣管炎、咽炎，扁桃體炎，關節(jié)疼痛；外治外傷出血。紅樹林有哪些主要的次生代謝產(chǎn)物，簡述其中的一、兩種。（1）萜類：是紅樹林植物中含量最為豐富的一種代謝產(chǎn)物,二萜是最為重要的化學成分,與多種生物活性密切相關。二倍半萜化合物-檸檬苦素具有較好的細胞毒性。（2）糖苷類化合物：是紅樹林植物中一種重要的代謝產(chǎn)物。（3）甾醇：植物甾醇是濱海濕地植物中的常見化學成分，含量高且類型單一。（4）生物堿類：在濱海濕地植物中發(fā)現(xiàn)較少。但在紅樹林植物中發(fā)現(xiàn)了新穎結(jié)果的生物堿，有拒食活性。（5）含硫化合物：是濱海濕地植物中一類比較特殊的成分，目前僅在紅樹科的Brugiera屬中有發(fā)現(xiàn)。有新穎結(jié)構(gòu)的化合物發(fā)現(xiàn)。（6）其它：芳香類表現(xiàn)抗革蘭氏陽性菌和陰性菌活性。紅樹里植物的次生代謝產(chǎn)物主要有哪些生物學活性？①抗病毒活性；②抗腫瘤活性；③鎮(zhèn)痛、抗炎及抗氧化活性；④抗菌、毒素和昆蟲拒食素及其他活性海洋生物技術概念與內(nèi)容概念：利用海洋生物或其組成部分，綜合應用基因工程、細胞操作技術和細胞培養(yǎng)等技術手段，生產(chǎn)出有用如何選擇海洋生物新藥的主要藥效實驗的實驗動物?（1）選擇健康的實驗動物。選擇動物必須健康、有些動物必須預選。（2）實驗動物年齡和性別的選擇。一般是成年動物，常用雄性動物或雌雄各半。（3）實驗動物種屬的異同性。實驗動物和人間對藥物的反應有共同性也有差異；多選擇幾種動物；不同種屬動物對藥物反應有明顯差別；同一種屬的不同品系之間，有時對藥物反應也會有差異。海洋生物新藥主要藥效學評價的指導原則（1）負責人和研究人員專業(yè)（2）實驗室條件、儀器設備、各種試劑及組織管理均符合規(guī)范化要求（3）實驗設計應遵循科學研究的基本規(guī)律，按隨機、對照和重復的原則進行設計（4）試劑保證純度，規(guī)格恒定，實驗動物用藥后的觀察其內(nèi)，要加強管理海洋生物藥物制劑研究的概念：指將原料通過制劑技術制成適宜劑型的過程。海洋生物新藥制劑類型的選擇依據(jù)（1）臨床需要和用藥對象；（2）藥物性質(zhì)和處方劑量；（3）充分考慮安全性藥物動力學的概念及其研究目的和意義概念：研究藥物在體內(nèi)的量變過程的規(guī)律，采用數(shù)學方法定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄除的量變特征，特別是研究藥物在體內(nèi)方式中的量變規(guī)律。目的和意義：（1）為臨床安全用藥和合理用藥提供依據(jù)和參考；（2）應用藥代動力學和生物利用度研究結(jié)果指導新制劑的設計或改造；（3）是新藥設計的中藥組成部分。海洋生物新藥臨床前安全性評價的目的和內(nèi)容和意義。目的：安全、有效是一切藥物所具備的兩大要素內(nèi)容：①一般毒理學、②特殊毒理學、③藥物依賴性、④安全性藥理、⑤毒代動力學意義：藥品是一種特殊的商品，它的安全與否關系到人民的生命健康，海洋生物新藥臨床前的安全性評價有助于人們了解藥品的安全情況，很大方面上避免新藥對人們生命健康的損害。補充：（說明：此部分內(nèi)容?？瓢嘟o的題庫中有，而我們班沒有的，可能是我們兩個班拷得題庫版本不同。）1.什么是核磁共振譜、化學位移？影響化學位移的因素有哪些？核磁共振譜：在靜磁場中具有磁矩的原子核(1H、13C)存在不同能級，當原子核被特定頻率的電磁波照射時，原子核便產(chǎn)生能級的躍遷而獲得共振信號，即核磁共振譜。化學位移：由于有機分子中各種質(zhì)子受到不同程度的屏蔽效應，引起外加磁場（）或共振頻率（v）偏離標準值而產(chǎn)生移動的現(xiàn)象。影響化學位移的因素：2.使用核磁共振儀進行物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定時，樣品應該如何處理？（1）對樣品的要求：樣品要純；樣品量不能太小，通常為1-3mg(低靈敏度NMR儀需10-30mg)、不含氧和灰塵；固體樣品要用合適溶劑溶解；加入內(nèi)標，如TMS（2）對溶劑的要求：不含質(zhì)子、沸點低、不與樣品締合、溶解度好，如CCl4,CS2,CHCl3,。為防干擾，多采用D代試劑，如CHCl3-d1,(CH3)2CO-d6,H2O-d2(水溶性試劑）TMS只能在測定時加入，不要加入過早。3.核磁共振儀在海洋生物制藥中的主要應用有哪些？（1）結(jié)構(gòu)鑒定：對于1H-NMR的簡單圖譜，可用化學位移鑒別質(zhì)子的類型。CH3O-,CH3CO-,CH2=C-,Ar-CH3,>HCH3,CH3CH2-,-CHO,-OH,等。對于復雜的未知物，可以配合IR,UV,MS等數(shù)據(jù)，推定結(jié)構(gòu)。（2）定量分析：4.碳核磁共振譜（13C-NMR）的特征有哪些？（1）13C-NMR譜比1HNMR譜作用更大（化學位移δ范圍更廣）;（2）能反映出化合物結(jié)構(gòu)上的精細變化；（3）有利于對化合物中碳原子的確認；（4）可以區(qū)別伯仲叔季各類碳原子；（5）靈敏度較低，需要樣品量較大，費時。（6）在實際應用氫譜和碳譜是相互補充的。5.什么是旋光光譜？如何表示，實際工作中又如何表示？紫外及可見光經(jīng)尼可爾棱鏡產(chǎn)生偏振光，以偏振光照射具有旋光性的化合物，偏振光振動平面產(chǎn)生改變，產(chǎn)生旋光現(xiàn)象。測出旋光度(α)，以波長對比旋度[α]×10-2作圖，所得曲線即旋光光譜。[α]D=（α實/CL）×100〔φ〕λ=〔α〕λ·M／1006.什么是正常的或平坦的旋光譜線？什么叫簡單康頓效應譜線？（1）正常的或平坦的旋光譜線：化合物無發(fā)色團時，ORD譜線只是在一個相內(nèi)延伸，沒有峰也沒有谷（2）簡單康頓效應譜線：分子中有一個簡單的發(fā)色團時，ORD曲線在紫外光譜λmax處越過零點，進入另一個相區(qū)。形成的一個峰和一個谷組成的ORD譜線7.如何利用本課程中學習的技術鑒定一個未知化合物的結(jié)構(gòu)（包括立體結(jié)構(gòu)）。（1）質(zhì)譜(MS)：確定分子量、分子式（2）計算不飽和度，推測化合物的大致類型（3）紫外光譜(UV)：是否具有共軛基團，是芳香族還是脂肪族化合物。（4）紅外光譜(IR)：官能團類型（5）核磁共振氫譜(1H-NMR)：質(zhì)子類型(具有哪些種類的含氫官能團)；氫分布(各種官能團中含氫的數(shù)目)；氫核間的關系（6）質(zhì)譜(MS)：驗證所推測的未知物結(jié)構(gòu)的正確性8.高通量篩選的模型有哪些？（1）分子水平的藥物篩選模型；包括受體篩選模型；酶篩選模型；離子通道篩選模型。（2）細胞水平藥物篩選模型；包括：內(nèi)皮細胞激活；細胞凋亡；抗腫瘤活性轉(zhuǎn)錄調(diào)控檢測；信號轉(zhuǎn)導通路；細菌蛋白分泌；細菌生長。9.什么是虛擬藥物篩選？其組成如何？虛擬藥物篩選定義：針對重要疾病特定靶標生物大分子的三維結(jié)構(gòu)或定量構(gòu)效關系（QSAR）模型，從現(xiàn)有小分子數(shù)據(jù)庫中，搜尋與靶標生物大分子結(jié)合或符合QSAR模型的化合物，進行實驗篩選研究。組成：虛擬藥物篩選應用軟件，理論方法，操作對象，操作過程，結(jié)果分析評價。10.基于分子對接的虛擬篩選的過程如何？（1）收集文獻上發(fā)表的小分子化合物結(jié)構(gòu)的信息，組成二維小分子數(shù)據(jù)庫。對每個小分子進行原子類型和化學鍵歸屬，將2D結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變成3D結(jié)構(gòu)并進行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，組成3D小分子數(shù)據(jù)庫。（2）對生物大分子（蛋白質(zhì)）進行質(zhì)子化合原子電荷歸屬，并進行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，確定小分子結(jié)合位點，構(gòu)建計算網(wǎng)格；（3）將3D小分子數(shù)據(jù)庫中的每個化合物對接到生物大分子的活性位點，并進行打分-計算小分子-生物大分子的結(jié)合強度Ki（結(jié)合自由能）（4）根據(jù)打分的結(jié)果挑選化合物（打分比較高的分子）進行類藥性評價，選擇化合物進行生物實驗測試。11.什么是高內(nèi)涵篩選？其組成如何？是指在保持細胞結(jié)構(gòu)和功能完整性的前提下，同時檢測被篩選樣品對細胞形形態(tài)、生長、分化、遷移、凋亡、代謝途徑及信號轉(zhuǎn)導各個環(huán)節(jié)的影響，在單一實驗中獲取大量相關信息，確定其生物活性和潛在毒性。組成：熒光顯微系統(tǒng)、自動化熒光圖像獲取系統(tǒng)、檢測儀器、圖像處理分析軟件、結(jié)果分析系統(tǒng)、數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)和其他（生物信息學工具、新型細胞株的研制和選擇性試劑）。12.比較3種現(xiàn)代藥物篩選技術的優(yōu)缺點。高通量：參見32題虛擬篩選：優(yōu)點：提高了篩選化合物的速度和效率，縮短新藥研究的周期。 缺點：（課件上沒找到）高內(nèi)涵篩選：優(yōu)