——地方標準編制說明一、目的意義1、江蘇行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀江蘇漢族人群常染色體STR基因座等位基因頻率主要用于法醫(yī)物證親權鑒定中的累積親權指數(shù)計算。本文件為保持法醫(yī)物證鑒定結果的科學、嚴謹、客觀、規(guī)范而提出。親權鑒定是依據(jù)孟德爾遺傳規(guī)律（即子女的基因組DNA各有一半分別來源于親生父母一方）,采用現(xiàn)代化的DNA分型檢測技術進行檢測、分型、計算、分析等綜合評判爭議個體之間是否存在親生、隔代或其他血緣關系。親權鑒定目前已廣泛應用于：申報戶口、辦理出生證、收養(yǎng)、公證、出入境移民、離婚與財產(chǎn)繼承案、嬰兒抱錯案、拐賣兒童案、器官移植、失散多年的父（母）子認親等的血緣關系鑒定，其他一些需要確認爭議個體間親緣關系的鑒定，如同胞關系鑒定、祖孫關系鑒定等。因此，親權鑒定技術為家庭和諧、社會穩(wěn)定發(fā)揮著越來越重要的作用。目前親權鑒定采用國際公認的DNA-STR分型技術進行檢測。短串聯(lián)重復序列（shorttandemrepeat,STR）又稱微衛(wèi)星DNA（microsatelliteDNA），是一類廣泛存在于人類基因組中的DNA多態(tài)性基因座，由2-6堿基對構成核心序列，呈串聯(lián)重復排列，長度一般在100～300bp之間，因個體間DNA片斷長度或DNA序列差異而成高度多態(tài)性。由于STR核心序列及重復次數(shù)不同，所以不同民族、不同地區(qū)人群中的STR基因座基因型的分布會產(chǎn)生較大差異，構成了其遺傳多態(tài)性。實驗表明，在研究關系較近群體時，一般認為STR是最為理想的遺傳標記。親權鑒定采用的DNA-STR檢測方法，不但是一門科學、先進可靠的技術，在實際操作過程中還有嚴格的技術標準和規(guī)范。對親權鑒定結果評判的重要參考值是累積親權指數(shù)（CPI），國標GB/T37223-2018《親權鑒定技術規(guī)范》明確以CPI值大于10000作為“支持”結論的主要依據(jù)，而CPI值的計算則主要引用人群STR基因座上等位基因的“基因頻率”進行統(tǒng)計學運算。由于各地區(qū)、各民族人群基因頻率存在差異，為確保鑒定結果更加科學、客觀，本地區(qū)人群均應使用符合本地區(qū)人群特點的基因頻率。2、制定標準的必要性、可行性“基因頻率”的獲取需要對地區(qū)人群進行大樣本抽樣、調研和分析，特別是中國地域廣闊，人群經(jīng)過數(shù)千年時間的不斷遷徙，基因差異性已經(jīng)突顯。已經(jīng)證明，運用或借用其他地區(qū)人群頻率可能會造成親權鑒定結果的偏差，影響法醫(yī)物證鑒定結果的準確性和可靠性。目前，江蘇地區(qū)已有19個等位基因的地方標準（DB32/T4028-2021），但仍然不能滿足半同胞、全同胞（39-75個基因座要求）親緣鑒定技術規(guī)范的工作需要（SF/T0117—2021《生物學全同胞關系鑒定技術規(guī)范》、SF/T0131—2023《生物學半同胞關系鑒定技術規(guī)范》）。從司法鑒定科學性和嚴謹性的角度，迫切需要盡快完成全省范圍內STR基因座的“基因頻率”標準化工作。因此，本地方標準制定的目的是通過對江蘇大樣本人群數(shù)據(jù)的收集、整理、分析、統(tǒng)計，制定符合江蘇漢族人群的基因頻率，為司法鑒定法醫(yī)物證工作的規(guī)范化、標準化提供依據(jù)。江蘇省人民醫(yī)院司法鑒定所是2005年經(jīng)江蘇省司法廳首批批準成立的公立性司法鑒定機構，已取得國家認監(jiān)委CNAS和CMA雙認證。為省內親權鑒定工作的重點單位，已完成鑒定案例20000多例。機構負責人周惠英是江蘇省司法鑒定法醫(yī)物證DNA專業(yè)協(xié)會主任委員，也是國家司法鑒定專家?guī)欤ǚㄡt(yī)物證DNA專業(yè)）專家，國家級、省級司法鑒定行業(yè)資質認定評審專家，中國研究型醫(yī)院學會醫(yī)藥法律專業(yè)委員會副主任委員等。長期從事法醫(yī)物證DNA鑒定工作。每年組織省法醫(yī)物證親權鑒定室間比對及評審工作，多次作為法醫(yī)物證技術專家受邀參加江蘇省法醫(yī)物證專業(yè)資質認定評審工作，對江蘇地區(qū)的行業(yè)狀況有深入了解并有豐富的實際工作經(jīng)驗，為本項目的研究奠定了堅實的基礎。3、預期經(jīng)濟社會效益分析本頻率參數(shù)的制定在江蘇發(fā)布后，將發(fā)揮以下作用：推動全省法醫(yī)物證鑒定行業(yè)的科學化、規(guī)范化和標準化發(fā)展。鼓勵新技術方法在親緣鑒定領域的應用和推廣，推動江蘇省在該領域的技術創(chuàng)新。提升全省法醫(yī)物證行業(yè)質量管理水平。二、任務來源根據(jù)2023年8月4日《省市場監(jiān)管局關于下達2023年度江蘇省地方標準項目計劃的通知》（蘇市監(jiān)標〔2023〕173號）文件的第204項立項，由江蘇省人民醫(yī)院、江蘇省司法鑒定協(xié)會、南京市司法鑒定協(xié)會等負責制定《常染色體STR補充基因座等位基因頻率參數(shù)計算規(guī)范》（現(xiàn)更名為：20個常染色體STR基因座等位基因頻率參數(shù)）。由江蘇省人民醫(yī)院司法鑒定所承擔并負責本標準的起草編制工作。對口行政主管部門為江蘇省衛(wèi)生健康委員會。三、編制過程1、組織調查研究（2023年1月-2023年8月）為保證標準制定的科學性、可實施性，起草前期對江蘇地區(qū)部分鑒定機構進行了調研。本所實際查看了各機構現(xiàn)用的基因頻率表及其來源，對各機構在統(tǒng)一基因頻率上的需求進行了調查和充分的學術交流。2、成立起草小組（2023年8月）江蘇省人民醫(yī)院司法鑒定所作為起草單位，負責標準的調研、起草、編制和修改等工作。組建標準起草工作組，制定標準的進度安排以及人員分工。為進一步做好《常染色體STR補充基因座等位基因頻率參數(shù)計算規(guī)范》的制定工作，體現(xiàn)標準的科學性和適用性，2023年8月底啟動標準起草工作，召開了起草工作會議，確定編制方案.所長對本標準制定工作的技術要求、地方特點等方面工作提出要求，力求充分發(fā)揮地方標準的積極作用。在標準編制過程中，起草工作組收集了以下現(xiàn)行的資料：GB/T37223-2018《親權鑒定技術規(guī)范》GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》SF/ZJD0105011-2018《法醫(yī)學STR基因座命名規(guī)范》GA/T1163-2014《人類DNA熒光標記STR分型結果的分析與應用》GA/T382-2014《法庭科學DNA實驗室建設規(guī)范》GA/T383-2014《法庭科學DNA實驗室檢驗規(guī)范》SF/T0117—2021《生物學全同胞關系鑒定技術規(guī)范》SF/T0131—2023《生物學半同胞關系鑒定技術規(guī)范》3、樣本分型數(shù)據(jù)的收集整理（2023年9月-2024年5月）5300份樣本來源于江蘇省人民醫(yī)院鑒定所已完成親緣關系鑒定的無關漢族個體。采用本機構自主研發(fā)的親權鑒定信息管理系統(tǒng)和司法部司法鑒定科學研究院研發(fā)的親權鑒定信息管理系統(tǒng)進行嚴格篩選，確保所有樣本均來自江蘇省各地級市范圍。DNA提取、擴增及分型對1mm×1mm血斑免提取進行直接擴增。擴增體系、擴增條件及分型方法按蘇州閱微基因技術有限公司生產(chǎn)的21IDSystem操作說明書進行。10μl反應體系進行擴增，擴增產(chǎn)物在3130基因分析儀（美國AB公司）上進行電泳。采用GeneScan3.2軟件進行分型結果分析。聯(lián)合應用PowerStatsv12軟件和SPSS19.0軟件對20個常染色體STR基因座進行Hardy-Weinberg平衡檢驗以及基因頻率分析，計算雜合度（heterozygosity，H）、匹配概率（probabilityofmatch，Pm）、個體識別率（discriminationpower，DP）、非父排除率（probabilityofpaternityexclusion，PE）、多態(tài)信息含量（polymorphicinformationcontent，PIC）等法醫(yī)群體遺傳學參數(shù)分析。4、編制標準草案（2024年5-6月）依據(jù)相關法律、法規(guī)、政策，收集、整理國內外的相關標準、文件和資料，由專業(yè)標準化人員根據(jù)前期調研、實驗數(shù)據(jù)、分析結果，進行標準初期編制，形成了標準草案。并召開標準起草論證會，項目組成員對標準草案進行詳細討論，并對標準框架、技術指標和可操作性等方面提出意見和建議。5、標準征求意見（2024年6-7月）組織省內外司法鑒定行業(yè)的相關專業(yè)專家對本標準進行評議。并征求省內11家相關單位專家意見，11家相關單位組織討論并回函，由三家單位提出了5條修改意見。編制小組對每條意見都進行了認真分析和研究，并結合實際情況進行了修改和完善，形成了標準的初審稿。序號章條編號意見內容意見提出單位/專家14.3雜合度分為觀察雜合度（observedheterozygosity,Hobs）和期望雜合度（expectedheterozygosity,Hexp）。其中Hobs和Hexp中的obs和exp應為下標，即Hobs和Hexp。公式中也應相應修改。蘇州大學司法鑒定中心/高玉振24.4同上，公式PEtrios和PEduos中的trios和duos也應為下標。蘇州大學司法鑒定中心/高玉振35.3表2注中提及按國際法醫(yī)遺傳學會推薦公式計算…,建議引用推薦的參考文獻或網(wǎng)站地址，以供查詢。蘇州大學司法鑒定中心/高玉振41范圍：本文件規(guī)定了漢族人群20個常染色體STR基因座的等位基因頻率。最好改為：江蘇漢族人群南京醫(yī)科大學司法鑒定所/冀強5該標準草案編制標準高，無具體修改意見。南京紅十字血液中心司法鑒定所/戴宇東6無意見蘇州市立醫(yī)院司法鑒定所/王瑋7無意見南京康寧司法鑒定中心/邢曉娟8無意見南京東南司法鑒定中心/劉雙城9挺好的沒意見南通大學附屬醫(yī)院司鑒所/吳瑋10無意見連云港市第三人民醫(yī)院司法鑒定所/周保成115.35.3最后的注中：出現(xiàn)稀有等位基因時，建議加一個計算示例，更加直觀。（參考GB/T37223-2018《親權鑒定技術規(guī)范》中7.1.2不符合孟德爾遺傳定律的常染色體STR基因座親權指數(shù)計算示例，在表格下端。）泰州華德司法鑒定所/杜水紅12無意見江蘇省人民醫(yī)院宿遷醫(yī)院（宿遷市第一人民醫(yī)院）司法鑒定所13無意見無錫中誠鑒證技術有限公司司法鑒定中心6、初審與修訂（2024年8-9月）邀請業(yè)內至少5名以上的知名專家對標準進行全面細致的審查。針對標準的形式和內容進行深入討論，并結合實際情況提出修改意見。7、審查與修訂四、主要內容本文件規(guī)定了以下漢族人群20個常染色體STR基因座的等位基因頻率?；蜃ǎ篋1S1656、D2S441、D3S3045、D4S2366、D5S2500、D6S477、D7S3048、D8S1132、D9S925、D10S1435、D11S2368、D13S325、D14S608、D15S659、D17S1290、D18S535、D19S253、D20S470、D21S1270、D22-GATA198B05。這些基因座是人類遺傳標記物，具有豐富的遺傳多態(tài)性，聯(lián)合應用可以進行親緣關系鑒定。通過總結這些基因座等位基因的頻率，對于完善江蘇地區(qū)人群的基因頻率參數(shù)，更好推進SF/T0117—2021《生物學全同胞關系鑒定技術規(guī)范》、SF/T0131—2023《生物學半同胞關系鑒定技術規(guī)范》的地區(qū)規(guī)范化應用具有積極作用。本文件適用于江蘇地區(qū)司法鑒定機構和司法鑒定人從事法醫(yī)物證鑒定的活動，其他相關單位可參照使用。第1章范圍：明確了《20個常染色體STR基因座等位基因頻率參數(shù)》包括的基因座及適用工作領域。第2章規(guī)范性引用文件：包括GB/T37223親權鑒定技術規(guī)范SF/ZJD0105010常染色體STR基因座的法醫(yī)學參數(shù)計算規(guī)范第3章術語和定義：《20個常染色體STR基因座等位基因頻率參數(shù)》對親權鑒定、基因座、等位基因、Hardy-Weinberg平衡定律等四個術語進行了定義。第4章群體遺傳學參數(shù)計算：明確了親權指數(shù)、等位基因頻率、雜合度、排除概率、累積排除概率、個體識別能力、累積個體識別能力、多態(tài)信息含量等的定義及計算公式。第5章群體遺傳學參數(shù)結果：明確了所需要的樣本的選擇要求，檢測、分析所用的技術、方法及相關的儀器設備和統(tǒng)計分析軟件，并提供了20個STR基因座的法醫(yī)學參數(shù)和等位基因頻率參數(shù)。五、技術指標確定的依據(jù)本標準的制定，旨在滿足我省法醫(yī)物證鑒定行業(yè)發(fā)展需要，推動行業(yè)規(guī)范化發(fā)展，提高江蘇省法醫(yī)物證鑒定質量。（一）標準制定原則1．標準編制遵循“科學性、實用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性”的原則，結合我省的實際情況制定完成。2．注重標準中各條款的可操作性，各項技術指標要求有明確科學依據(jù)或文獻來源。本標準按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》的要求進行編寫。在編寫過程中參考了GB/T37223-2018《親權鑒定技術規(guī)范》等國家標準，確保了標準形式和內容的規(guī)范性。標準規(guī)定了術語、定義、提供具體的20個STR基因座等位基因頻率等方面的具體內容，使得標準的實施更加實用和具可操作性。3．廣泛征求鑒定機構的專家以及部分檢測產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)的意見。標準制定依據(jù)本標準規(guī)定了江蘇漢族人群常染色體20個STR基因頻率的應用范圍、術語和定義。1.范圍適用于所有司法鑒定機構在面向江蘇漢族人群從事法醫(yī)物證親緣鑒定時計算累積親權指數(shù)。江蘇周邊及省市人群可參考使用。2.術語與定義親權鑒定、基因座、等位基因等定義依據(jù)GB/T37223-2018、SF/ZJD0105011-2018、SF/T0131—2023《生物學半同胞關系鑒定技術規(guī)范》等確定。本標準相關參數(shù)的制定，是按照相關的標準規(guī)范對符合要求的樣本進行檢測并按遺傳學原理統(tǒng)計分析得出的科學數(shù)據(jù)，進行了討論分析驗證。六、重大分歧意見的處理過程和依據(jù)無七、與相關法律法規(guī)和國家標準的關系本標準為司法鑒定行業(yè)法醫(yī)物證（親權鑒定）專業(yè)地方性行業(yè)標準，編寫格式依據(jù)GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準結構和編寫》給出的規(guī)則編寫。行業(yè)現(xiàn)行的GB/T37223-2018《親權鑒定技術規(guī)范》為親權鑒定的技術性規(guī)范，側重實驗步驟、分析方法和評判標準等操作性內容。但上述規(guī)范提及但沒有提供具體的地區(qū)性STR基因座基因頻率，為本標準的制定提供了空間。本標準可作為上述規(guī)范的必要補充，更好的適應江蘇地區(qū)人群的基因頻率特點，是司法鑒定機構面向江蘇人群開展親權鑒定時依據(jù)的基因頻率參數(shù)。本次20個常染色體STR基因座等位基因頻率參數(shù)與2021-05-14發(fā)布江蘇省地方標準DB32/T4028—2021《常染色體STR基因座等位基因頻率參數(shù)》不同，是全新基因座基因頻率參數(shù)的統(tǒng)計發(fā)布。旨在針對江蘇人群滿足2021年后新近頒布實施的SF/T0117—2021《生物學全同胞關系鑒定技術規(guī)范》、SF/T0131—2023《生物學半同胞關系鑒定技術規(guī)范》的技術要求。八、推廣實施建議本標準可在江蘇省及周邊地區(qū)推廣應用，可以應用于全同胞關系鑒定、部分半同胞關系鑒定、疑難復雜關系鑒定和親緣關系鑒定等多種情況。為了保證標準的貫徹執(zhí)行，具體要求如下：1、宣傳培訓標準實施過程中加強標準的宣貫指導工作，制定標準宣傳培訓計劃，組織標準宣貫培訓工作。本標準發(fā)布后，通過召開專題培訓會的方式進行宣貫：由省司法鑒定協(xié)會牽頭，在省內開展標準宣貫培訓工作，對司法鑒定行業(yè)從事法醫(yī)物證鑒定的相關人員進行專業(yè)培訓，促進本規(guī)范統(tǒng)一使用。2、動態(tài)評估及時收集整理各地在《規(guī)范》使用過程中出現(xiàn)的問題，對《規(guī)范》的實施效果進行動態(tài)評估。九、起草單位和起草人員信息及分工根據(jù)江蘇省市場監(jiān)督管理局蘇市監(jiān)標〔20