PAGEPAGE11-共21-院系：院系：專業(yè)班級：姓名：學號：裝訂線專業(yè)：考試日期：試卷所需時間：120分鐘閉卷試卷總分：100分一．名詞解釋（共10小題，每小題3分，共30分）1.大分子結合修飾2.核酶3.臨界溫度4.酶活回收率5.包埋法6.鎖鑰理論7.固定化酶8.模擬酶9.交錯延伸PCR10.免疫拷貝法二．判斷題（對打“√”，錯打“╳”。共10小題，每題1分，共10分）1.如果某種酶有幾種底物，則對每一種底物各有一個特定Km值，其中Km值最大的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。（）2．若酶促反應持續(xù)時間縮短，則此條件下測得的最適反應溫度往往偏低。（）3．化學修飾劑聚乙二醇(PEG)既溶于水,也溶于有機溶劑，而且免疫原性和毒性很低。（）4．有機相酶催化必需微量的水，這對于維持酶活性結構非常重要。（）5.雖然米氏方程對許多酶提供了很好的實驗數(shù)據(jù)模式，但少數(shù)酶與米氏方程不相符合，如誘導酶。（）6．從最佳的抽提效果著眼，最好遠離待抽提酶的等電點。也就是說，酸性蛋白質(zhì)宜用堿性溶液抽提，堿性蛋白質(zhì)宜用酸性溶液。（）7.酶作用機制的“鎖鑰理論”無法解釋酶催化反應中的可逆反應。（）8．膜分離過程中，膜的作用是選擇性地讓小于其孔徑的物質(zhì)顆粒成分或分子通過，而把大于其孔徑的顆粒截留。（）9．固定化酶的活力在多數(shù)情況下比天然酶高，其底物專一性可能發(fā)生改變。（）10．采用化學修飾法確定某種氨基酸殘基在酶分子中所存在的狀態(tài)（表面或分子內(nèi)部），通常表面基團能反應，而分子內(nèi)部不能反應。（）三、填空題(每空1分，共12分)1.酶的催化機理包括___、___、___、___、___等方面。2.酶分子修飾的主要目的是改進酶的性能，即___、____、____等方面。3.根據(jù)酶催化反應類型，核酶可分為____、_____兩大類。4.專一性不可逆抑制劑通常可分為___和____兩種類型。四、問答題（共8小題，每小題6分，共48分）1．酶分子修飾的常用方法包括哪些并簡述其方法原理？2．簡述酶分子定向進化的概念及定向進化的主要策略。3．試說明有機相酶催化反應的特點及應用？4．何謂手性藥物？手性藥物立體異構體所表現(xiàn)出的作用可能存在哪些差異？5．有5克淀粉酶制劑，用水溶解成100ml，從中取出0.1ml測定酶活，測知10min分解0.5克淀粉。計算每克酶制劑所含的淀粉酶活力單位數(shù)。（淀粉酶活力單位定義：在最適條件下每小時分解1克淀粉的酶量稱為一個酶活單位）6．影響固定化酶性質(zhì)的因素有哪些？請解釋固定化后酶最適pH變化規(guī)律。7.簡述酶制劑的應用，并舉例加以說明。8.酶的可逆抑制作用常見的有哪幾種類型？請用雙倒數(shù)作圖法比較幾種酶抑制動力學參數(shù)的變化，并加以簡要說明。《酶工程》課程試卷B答案一．名詞解釋（共10小題，每題3分，共30分）大分子結合修飾：是指利用水溶性大分子與酶結合，使酶的空間結構發(fā)生某些精細的改變，從而改變酶的特性與功能的方法。核酶：是指具有催化活性的RNA分子。臨界溫度：指使物質(zhì)由氣相變?yōu)橐合嗟淖罡邷囟冉信R界溫度。每種物質(zhì)都有一個特定的溫度，在這個溫度以上，無論怎樣增大壓強，氣態(tài)物質(zhì)不會液化，這個溫度就是臨界溫度。酶活回收率：是指提純前與提純后酶的總活力之比。包埋法：是指將酶或含酶菌體包埋在各種多孔載體中，使酶固定化的方法。鎖鑰理論：是一種酶催化作用原理的假說，其觀點認為：酶分子與底物分子就像鎖和鑰匙的相互關系，兩者的構象能夠相互契合。固定化酶：是指在一定空間內(nèi)呈閉鎖狀態(tài)存在的酶，能連續(xù)地進行反應，反應后的酶可以回收重復使用。模擬酶：是指吸收酶中那些起主導作用的因素，利用有機化學、生物化學等方法設計和合成一些較天然酶簡單的非蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)分子。9．交錯延伸PCR：是指在PCR反應中把常規(guī)的退火和延伸合并為一步，縮短其反應時間，從而只能合成出非常短的新生鏈，經(jīng)變性的新生鏈再作為引物與體系內(nèi)同時存在的不同模板退火而繼續(xù)延伸。此過程反復進行，直到產(chǎn)生完整的基因長度。10.免疫拷貝法：制備抗體酶的方法，是指以原酶為抗原，注入免疫動物體內(nèi)，獲得抗血清，再以抗血清為抗原，注入另一種免疫動物體內(nèi)，得到的抗抗體即為抗體酶。二、判斷題(對打“√”，錯打“╳”。共10小題，每小題1分，共10分)1.╳2.╳3.√4.√5.╳6.√7.√8.√9.╳10.√三、填空題(每空1分，共12分)酸堿催化、共價催化、鄰近及定向效應、變形或張力、微環(huán)境效應2.酶活力、穩(wěn)定性、抗原性。3.剪切型核酶、剪接型核酶4.Kcat型不可逆抑制劑、KS型不可逆抑制劑。四．問答題（共8小題，每小題6分，共48分）1．酶分子修飾的常用方法包括哪些并簡述其方法原理？金屬離子置換修飾（采用某些二價金屬離子取代酶分子中的金屬離子，改變其特性）大分子結合修飾（利用聚乙二醇等大分子與酶分子共價或非共價結合，降低酶的抗原性和提高穩(wěn)定性）肽鏈有限水解修飾（將酶分子多肽鏈的一部分水解，達到改變酶特性的目的）酶蛋白側鏈基團修飾（采用小分子化學修飾劑修飾酶蛋白的側鏈基團）氨基酸置換修飾（利用化學方法或基因工程方法改變酶分子中某些氨基酸）物理修飾（通過改變溫度、壓力等物理因素來改變酶特性）酶交聯(lián)晶體修飾（酶分子先結晶，然后通過多功能交聯(lián)劑進行交聯(lián)）酶的親和修飾（利用某些能和酶分子進行專一性結合的修飾劑進行修飾反應）2．簡述酶分子定向進化的概念及定向進化的主要策略。所謂酶分子定向進化，即人為創(chuàng)造特殊的進化條件，模擬自然進化機制，在體外對基因進行隨機突變，從一個或多個已經(jīng)存在的親本酶出發(fā)，經(jīng)過基因的突變和重組，構建一個人工突變酶庫，通過一定的篩選或選擇方法最終獲得預先期望的具有某些特性的進化酶。定向進化的主要策略：易錯PCR技術、DNA改組技術（DNAshuffling）、外顯子改組、體外隨機引發(fā)重組、交錯延伸技術。3．試說明有機相酶催化反應的特點及應用？有機相酶催化反應的特點包括：（1）有利于疏水性底物的反應?？商岣呙傅臒岱€(wěn)定性?？筛淖兎磻胶庖苿臃较颉？煽刂频孜飳Ｒ恍钥煞乐褂伤鸬母狈磻??？蓴U大反應pH值的適應性。酶和產(chǎn)物易于回收。可避免微生物污染。有機相酶催化反應的應用：手性藥物的合成;功能高分子的合成等4.何謂手性藥物？手性藥物對映體所表現(xiàn)出的作用可能存在哪些差異？(6分)手性藥物是指藥物分子屬于手性分子，而手性分子存在兩種對映異構體其藥物作用可能存在差異。手性藥物立體異構體所表現(xiàn)出的作用可能存在以下差異：一種異構體有顯著的治療作用，另一種異構體無或有很弱的作用。一種異構體有治療作用，另一種異構體有副作用。兩種異構體都有治療作用，但其中一種異構體有副作用或另外一些輔助作用。兩種異構體的作用有互補性。5．有5克淀粉酶制劑，用水溶解成100ml，從中取出0.1ml測定酶活，測知10min分解0.5克淀粉。計算每克酶制劑所含的淀粉酶活力單位數(shù)。（淀粉酶活力單位定義：在最適條件下每小時分解1克淀粉的酶量稱為一個酶活單位）解：①0.5/(10/60)=3②3/(5/100)=60③60/0.1=600U6．影響固定化酶性質(zhì)的因素有哪些？請解釋固定化后酶最適pH變化規(guī)律。(6分)固定化對酶活性和酶反應體系的影響是十分復雜的，常因酶的種類、反應系統(tǒng)的組成，特別是固定的方法及載體而顯著不同。可以概括為三種類型。（1）微環(huán)境的影響（2）構象改變和屏蔽效應（3）．分配效應與擴散效應載體帶負電荷，pH向堿性方向移動。載體帶正電荷，pH向酸性方向移動。7.簡述酶制劑的應用，并舉例加以說明。食品工業(yè)方面的應用。如酶法生產(chǎn)葡萄糖；果葡糖漿的生產(chǎn)；飴糖的生產(chǎn)；酶在蛋白制品加工中的應用酶在輕工業(yè)方面的應用。如造紙工業(yè)、紡織工業(yè)中原料的處理；洗滌劑中添加各種酶類。在醫(yī)學方面的應用。一些酶可作為消炎、促消化等藥物，另外很多酶可作為診斷各種疾病的指標環(huán)境保護方面的應用。使用酶進行污水中有