3 3 3 3 4 4 5 21 24一、申請人名稱邁杰轉化醫(yī)學研究（蘇州）有限公司二、申請人住所蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園B5樓901室三、生產(chǎn)地址蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園B5樓801單元、901單元一、產(chǎn)品概述（一）產(chǎn)品主要組成成分本試劑盒由即用型PD-L1兔單抗和同型對照試劑組成（見下表即用型PD-L1兔單抗的主要成分是使用抗體稀釋液稀釋的兔抗人PD-L1單克隆抗體（抗體濃度約0.6μg/mL抗體類型是IgG，克隆號是JS311。同型對照試劑的主要成分是使用抗體稀釋液稀釋的兔抗人IgG單克隆抗體（抗體濃度約0.6μg/mL抗體類型是IgG。劑（二）產(chǎn)品預期用途本試劑盒用于體外定性檢測經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）的三陰性乳腺癌組織中的程序性死亡受體-配體1（ProgrammedDeath-Ligand1，PD-別可使用特瑞普利單抗注射液（ToripalimabInjection，拓益?)治療的三陰性乳腺癌患者，用作拓益?的伴隨診斷。（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格15測試/盒、30測試/盒、50測試/盒。（四）產(chǎn)品檢驗原理本產(chǎn)品是利用抗原抗體特異性結合的原理檢測PD-L1蛋白表達情況。產(chǎn)品中的即用型PD-L1兔單抗作為一抗，在染色過程中特異性結合檢測樣本中的PD-L1蛋白，并形成抗原-抗體復合物（抗原建議采用高pH值的EDTA抗原修復液進行高溫熱色試劑顯色，使得檢測樣本切片中相應抗原部位出現(xiàn)著色。封片后，經(jīng)光學顯微鏡觀察，以此判斷樣本中PD-L1蛋白的表達二、臨床前研究概述（一）主要原材料1.主要原材料的選擇本產(chǎn)品主要原材料包括兔抗人PD-L1單克隆抗體、兔抗人IgG單克隆抗體和抗體稀釋液。兔抗人PD-L1單克隆抗體和兔抗人IgG單克隆抗體為外購方式獲得，抗體稀釋液為申請人自制，并通過免疫組化驗證。申請人選擇有資質的供應商提供的制定了各主要原材料質量要求并經(jīng)檢驗合格。2.企業(yè)參考品和質控品設置情況本產(chǎn)品企業(yè)參考品針對PD-L1染色評分和染色強度進行了設置，包括陽性參考品和陰性參考品，其中陽性參考品用于產(chǎn)品的符合性，批內重復性和批間重復性檢測。陽性參考品包括三陰性乳腺癌和其他乳腺癌FFPE組織樣本，并涵蓋不同的PD-L1染色評分和不同的染色強度。陰性參考品用于產(chǎn)品的符合性檢測，陰性參考品包括三陰性乳腺癌和其他乳腺癌FFPE組織本產(chǎn)品于說明書中推薦了質量控制方案。同時提供了同型對照試劑，確保染色過程的特異性。（二）生產(chǎn)工藝及反應體系研究申請人通過企業(yè)參考品試驗確定最佳的生產(chǎn)工藝及反應體系，包括：即用型PD-L1兔單抗、同型對照試劑的配液工序、分裝工序、組裝工序等，同時對反應體系中的樣本切片厚度、預處理溫度及時間、抗原修復溫度及時間、一抗孵育溫度及時間、過氧化物酶滅活時間、二抗孵育時間、DAB顯色時間、蘇木素復染時間等進行研究，確定了最佳的反應體系。（三）分析性能評估本產(chǎn)品分析性能包括免疫反應性、分析靈敏度、分析特異性1.免疫反應性申請人對30種正常人體組織進行免疫反應性研究，對著色位置及染色特點進行描述，每種組織類型均不少于3例。在檢測的細胞類型或者組織類型中沒有觀察到超出預期的結果，對于正常組織中的PD-L1免疫組化表達，觀察到的染色與文獻報道一致。結果總結見下表：表1：30種正常人組織PD-L1免疫反應檢測結果申請人對26種相關良性、惡性病變組織（非正常組織）進行免疫反應性研究，對著色位置及染色特點進行描述，每種組織類型均不少于3例。在檢測的細胞類型或者組織類型中沒有觀察到超出預期的結果，對于非正常組織中的PD-L1免疫組化表達，觀察到的染色與文獻報道一致。結果總結見下表：表2：26種非正常人組織PD-L1免疫反應檢測結果//（3）2.分析靈敏度敏度評價，研究結果顯示，所有樣本均能準確檢出，與預期結果3.分析特異性申請人使用不同PD-L1表達水平的細胞系進行特異性研究，研究結果表明本產(chǎn)品的檢測結果與細胞系的PD-L1蛋白表達水申請人使用包含人PD-L1和PD-L2蛋白的細胞裂解液進行免疫印跡分析（WesternBlotAnalysis,WB）。研究結果表明本產(chǎn)品能特異性識別PD-L1蛋白，不識別PD-L2蛋白。證明PD-L1單克隆抗體對人PD-L1蛋白具有特異性，與PD-L2蛋白無交叉表位的不同濃度的特異性肽的條件下孵育同一批抗體，結果顯示本產(chǎn)品能夠被含抗體結合表位的特異性肽抑制，無肽和無關的非特異性肽均能正常染色，研究結果表明本產(chǎn)品能夠特異性4.精密度申請人采用三批試劑盒進行了實驗室內精密度研究（同一場所包括批間精密度、批內精密度、同一輪內精密度、日內精密度、日間精密度、檢測人員間精密度；閱片一致性研究，包括不同閱片者之間、同一閱片者不同閱片時間之間；外部重復性研究（三個外部場所包括不同閱片者之間、不同實驗室之間、實驗室內非連續(xù)日間；申請人對檢測結果進行配對比較，確采用Wilson評分方法計算雙側95%置信區(qū)間。研究結果表明本產(chǎn)品的精密度良好，符合預期要求。表3同一場所精密度ULTRA上一天內2個不同時間點對20例5名實驗人員，采用3個批次的試劑對20表4閱片一致性研究間表5外部重復性研究（四）陽性判斷值或參考區(qū)間研究申請人采用103例三陰性乳腺癌組織樣本，使用已上市的PD-L1檢測試劑作為參考方法，通過受試者工作特征曲線（ROC）和一致性比對的方法初步確立了本產(chǎn)品的陽性判斷值為PD-L1綜合陽性評分CPS≥1。申請人在TORCHLIGHT研究（NCT04085276一項多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照性III期研究，旨在評估特瑞普利單抗聯(lián)合白蛋白紫杉醇對比安慰劑聯(lián)合白蛋白紫杉醇在首診IV期或復發(fā)/轉移性三陰性乳腺癌患者的有效性和安全性）中，使用確立的陽性判斷值（綜合陽性評分CPS≥1）作為受試者分層標準，以無進展生存期（PFS）為主要終點，比較了特瑞普利單抗聯(lián)合注射用紫杉醇（白蛋白結合型）與安慰劑聯(lián)合注射用紫杉醇（白蛋白結合型）對首診IV期或復發(fā)轉移性TNBC患者的療效。研究結果顯示，特瑞普利單抗聯(lián)合化療對比安慰劑聯(lián)合化療顯著延長PD-L1陽性人群無進展生存期（PFS達到臨床試驗預設的主要終點。綜合以上研究，最終確定本產(chǎn)品的陽性判斷值為PD-L1綜合陽性評分CPS≥1。（五）穩(wěn)定性研究申請人對本產(chǎn)品的實時穩(wěn)定性、使用穩(wěn)定性和運輸穩(wěn)定性進行了系統(tǒng)的研究，確定了在各種條件下試劑的有效保存時間。同時也對樣本穩(wěn)定性進行了研究。實時穩(wěn)定性：采用三批次試劑盒放置于2℃~8℃條件下保存，分別于第0個月，第6個月，第9個月，第12個月，第13個月，第14個月，第15個月，使用包含PD-L1蛋白表達不同染色強度和不同染色評分的TNBC組織樣本對試劑盒的性能進行檢測。結果顯示，各項性能指標均符合要求。確定本產(chǎn)品在2℃~8℃條件下保存，有效期12個月。使用穩(wěn)定性：將運輸模擬結束后三批次試劑盒放置于2℃~8℃條件下保存，保存期間進行16次開瓶/機載穩(wěn)定性研究。進行開瓶/機載穩(wěn)定性研究時，將本研究的所有待測試劑盒轉移至室溫下放置6小時，重復16次。研究顯示，本產(chǎn)品每次上機使用不超過6小時，上機次數(shù)不超過16次，每次使用后應立即密閉并置于2℃~8℃保存，禁止冷凍，有效期為12個月。本產(chǎn)品采用一個批次的試劑盒進行了機載穩(wěn)定性挑戰(zhàn)試驗，將試劑置于在45℃條件下連續(xù)放置14天后，產(chǎn)品各項性能指標均符合要求。運輸穩(wěn)定性：采用三批次試劑盒進行運輸穩(wěn)定性研究，使用企業(yè)參考品對運輸后及運輸后放置到有效期末的試劑盒進行檢測，研究結果表明該產(chǎn)品在冷鏈運輸?shù)臈l件下運輸5天后以及在效期末的檢測結果的各項性能指標均能夠滿足質量的要求。試劑盒的運輸時間在5天內不影響產(chǎn)品質量。樣本穩(wěn)定性：對經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋的三條件下進行了切片穩(wěn)定性。研究結果顯示，經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋的三陰性乳腺癌組織切片樣本在室溫（10℃~30℃)保存14天，對檢測結果無影響，滿足檢測要求，在2℃~8℃保存2個月，對檢測結果無影響，滿足檢測要求，在-20℃±5℃保存6個月，對檢測結果無影響，滿足檢測要求。三、臨床評價概述申請人針對試驗體外診斷試劑檢測性能提交了PD-L1檢測結果重現(xiàn)性研究資料，試驗體外診斷試劑伴隨診斷用途提供了特瑞普利單抗注射液的同步開發(fā)的藥物臨床試驗JS001-026-III-TNBC研究資料。（一）PD-L1檢測結果重現(xiàn)性研究申請人在中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院、復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院、浙江省腫瘤醫(yī)院共3家臨床機構完成了臨床試驗。包括環(huán)比試驗和閱片一致性評價試驗。環(huán)比試驗入組樣本120例，結果顯示：與參考結果比較，總一致率95.7%（95%CI：93.6%，97.9%兩兩比對研究平均總一致率91.4%（95%CI：88.5%，94.3%）。閱片一致性評價試驗入組樣本180例，三家機構各60例，結果顯示：與參考結果比較，機構內同一病理醫(yī)師閱片重復性總一致率98.3%（95%CI：97.3%，99.4%不同臨床試驗機構間閱片總一致率95.7%（95%CI：93.9%，97.4%機構內不同病理醫(yī)師閱片重復性總一致率為97.8%（95%CI：96.5%，99.0%）。兩兩比對研究顯示，機構內同一病理醫(yī)師閱片重復性平均總一致率96.7%（95%CI：95.2%，98.2%機構內不同病理醫(yī)師閱片重復性平均總一致率為95.6%（95%CI：93.8%，97.3%不同臨床試驗機構間閱片總一致率91.4%（95%CI：88.9%，93.8%）。研究結果表明產(chǎn)品臨床性能滿足要求。（二）伴隨診斷性能研究試驗體外診斷試劑的伴隨診斷意義通過同步開發(fā)的藥物臨床試驗進行確認，本產(chǎn)品作為藥物臨床試驗（JS001-026-III-雙盲、安慰劑對照、多中心、III期臨床研究，旨在評估特瑞普利單抗聯(lián)合白蛋白紫杉醇對比安慰劑聯(lián)合白蛋白紫杉醇在首診IV期或復發(fā)/轉移性三陰性乳腺癌患者的有效性和安全性。入組人群為經(jīng)組織學確診的首診IV期或復發(fā)/轉移性、且不適合手術治療的三陰性乳腺癌患者。藥物臨床試驗入組人群采用本產(chǎn)品進行篩選。研究共入組531例患者，其中PD-L1陽性人群（CPS≥1）普利單抗聯(lián)合化療組200例，安慰劑聯(lián)合化療組100例。結果顯示，特瑞普利單抗聯(lián)合化療對比安慰劑聯(lián)合化療顯著延長PD-特瑞普利單抗聯(lián)合化療相較于安慰劑聯(lián)合化療的OS獲益，HR=0.615（95%CI：0.414，0.914P=0.0148。四、產(chǎn)品受益風險判定根據(jù)“YY/T0316-2016醫(yī)療器械風險管理”標準，對本產(chǎn)品進行風險和受益分析。經(jīng)綜合評價，本產(chǎn)品的受益大于風險。（一）受益評估本試劑盒用于體外定性檢測經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）的三陰性乳腺癌組織中的程序性死亡受體-配體1（ProgrammedDeath-Ligand1，PD-別可使用特瑞普利單抗注射液（ToripalimabInjection，拓益?)治療的三陰性乳腺癌患者，用作拓益?的伴隨診斷。本產(chǎn)品臨床應用的主要獲益在于：三陰性乳腺癌是雌激素受體、孕激素受體、人表皮生長因子受體2表達缺乏的乳腺癌，在我國約占所有乳腺癌的19%-25%。三陰性乳腺癌愈后較差，復發(fā)風險較高。特瑞普利單抗聯(lián)合化療是目前國內唯一獲批的用于PD-L1表達陽性（CPS≥1）的復發(fā)或轉移性三陰性乳腺癌一線治療的免疫檢查點抑制劑藥物。本產(chǎn)品作為特瑞普利單抗的伴隨診斷試劑對用藥人群進行篩選，可讓三陰性乳腺癌患者獲得及時的治療。（二）風險評估本產(chǎn)品檢測的主要風險來自錯誤結果帶來的風險。假陽性結果可能會導致患者接受特瑞普利單抗的治療沒有顯著的臨床獲益，同時可能出現(xiàn)與特瑞普利單抗治療相關的不良反應。假陰性結果可能會導致患者失去使用特瑞普利單抗治療的機會，無法獲得潛在益處。IHC檢測過程相對比較復雜，不規(guī)范的操作和解讀可能帶來假陰性或假陽性結果。檢測過程應嚴格按照說明書要求進行操作，并進行充分和合理的質控，且任何檢測結果均應結合臨該產(chǎn)品的風險管理計劃已得到適當實施，所有的剩余風險達到可以接受的程度，本產(chǎn)品上市帶來的受益大于風險。為保證用械安全，基于對主要剩余風險的規(guī)避，需要在說明書中提示以下信息：1.本試劑盒用于體外定性檢測經(jīng)10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）的三陰性乳腺癌組織中的程序性死亡受體-配體1（ProgrammedDeath-Ligand1，PD-L1）蛋白表達情況，輔助鑒別可使用特瑞普利單抗注射液（ToripalimabInjection，拓益?)治療的三陰性乳腺癌患者，用作拓益?的伴隨診斷。本產(chǎn)品僅用于體外診斷，不做其他用途。對任何陽性或陰性結果的解讀，應由資深的病理醫(yī)生結合病理形態(tài)學、臨床表現(xiàn)及其他檢測方法進行評估，不作為單獨的診斷指標。2.警示及注意事項：產(chǎn)品說明書中介紹了該產(chǎn)品檢驗方法的局限性及使用中的注意事項。本申報項目為境內第三類體外診斷試劑產(chǎn)品注冊，屬于進入醫(yī)療器械優(yōu)先審批程序的產(chǎn)品。依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）等相關醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)對申請人提交的注冊申報資料進行系統(tǒng)評價，申報產(chǎn)品符合安全性、有效性的要求，符合現(xiàn)有認知水平，建議準予附件：產(chǎn)品說明書PD-1/PD-L1信號通路是參與腫瘤免疫中國國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）已批準特瑞普利單抗注射液（Toripalimab稀釋液稀釋的兔抗人IgG單克隆抗體（抗體濃度約0.6μg/mL抗體類型是IgG。主要組成成分為OptiView過氧硫酸銅，用于免疫組織化學染色主要組成成分為含有低密度石蠟Concentrate(10×)滌劑，用于檢測過程中反應體系的清洗，以便于對待測物質進行ReactionBuffer腐劑，用于檢測過程中反應體系的清洗，以便于對待測物質進行防腐劑，用于免疫組織化學染色主要組成成分為蘇木精，乙二醇和醋酸穩(wěn)定溶液，用于對組織細BluingReagent碳酸鈉溶液中，用于調節(jié)蘇木素生產(chǎn)商：文塔納醫(yī)療系統(tǒng)公司Ventana生產(chǎn)商：文塔納醫(yī)療系統(tǒng)公司VentanaAR級AR級/國械備20160026號泡組織的比例應足夠。固定時間以6~72小時為宜。參照病理技術規(guī)范要求取材、脫應置于2~8℃、室溫（10~30℃)或-20±5℃避光保存。置于2~8℃保存的切片應在2個10比例稀釋清洗液EZPrepConcentrate(10×)，配制足量的清洗液EZPrepConcentrate（1×)供清洗步驟使用。按1：10比例稀釋清洗液ReactionBufferConcentrate（10×),配制足量的清洗液ReactionBufferConcentrate（1×)供清洗步驟使用。手工滴加：無需注冊試劑填充瓶，設置程序中勾選“Ant/清洗液EZPrepConcentrate（1×)///////或PD-L1陰性細胞系（如：K562或KM12等）等樣本均可作為本試劑的陰性質控片。用于判斷待檢樣本是否存在非特異性染色，同型對照抗體試劑的染色結果應均為陰首先應對待檢樣本進行H&E染色評估，用于判斷待檢樣本組織形態(tài)和質量，待檢樣本應不少于100個活腫瘤細胞，才能認為待檢樣本可以進行PD-L1表達情況的評胞數(shù)（包括細胞膜染色的腫瘤細胞、細胞質和/或細胞膜染色的腫瘤相關免疫CPS＜1判定為PD-L1表達陰性3、出現(xiàn)假陽性的結果可能由于試劑與組織樣本非特異性結合所致，如紅細胞和細1、免疫組織化學法染色是一種需通過多個操作步驟完成的檢測過程。試劑的選擇5、本試劑盒提供的試劑和操作說明已經(jīng)過優(yōu)化。進一步稀釋試劑或改變染色方案6、不當?shù)谋４鏃l件可能會造成組織中抗原降解而導致假陰性結果，請根據(jù)推薦的免疫反應性中考察了本試劑對30種正常人組織及26種非正常人組織的免疫反應性。在檢測的細胞類型或者組織類型中沒有觀察到超出預期的結果，對于正常組織/胞/胞胞胞胞胞/胞采用本產(chǎn)品對制備的包含人PD-L1和PD-L2蛋白的細胞裂解液進行免疫印跡分的特異性肽的條件下孵育同一批抗體，結果顯示本產(chǎn)品能夠被含抗體結合表位的特）；表達程度不同的三陰性乳腺癌樣本OA：100.00%（94.04%-10采用3個不同批次的試劑對20例PD-L1表達程度不同的三陰性乳腺癌樣OA：100.00%（94.04%-10表達程度不同的三陰性乳腺癌樣本OA：100.00%（96.97%-10同的三陰性乳腺癌樣本進行IHC檢OA：100.00%（96.97%-10的檢測結果與共識標準結果進行比表達程度不同的三陰性乳腺癌樣本OA：100.00%（94.04%-10達程度不同的三陰性乳腺癌樣本進行不同閱片時間之間采用1個批次的試劑在BenchMark同的三陰性乳腺癌樣本在非連續(xù)的五場所的兩名病理醫(yī)生在非連續(xù)的五天采用1個批次的試劑在BenchMark同的三陰性乳腺癌樣本在非連續(xù)的五場所的兩名病理醫(yī)生在非連續(xù)的五天一致性。實驗室內非連續(xù)采用1個批次的試劑在BenchMark同