…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵人版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、與乳酸桿菌屬于同類生物的是（）A.毛霉B.根霉C.酵母菌D.醋酸菌2、下列有關(guān)基因工程中限制酶的描述，錯誤的是（）A.每一種限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列B.限制酶的活性受溫度影響C.限制酶能識別和切割RNAD.限制酶可從原核生物中提取3、2018年，我國科學(xué)家利用成纖維細胞通過核移植技術(shù)成功的培育出克隆猴“中中”和“華華”，當重組細胞重新編程為全能干細胞后，細胞中物質(zhì)含量變化最明顯的是（）A.有氧呼吸酶B.DNA聚合酶C.細胞骨架D.細胞膜蛋白4、下列有關(guān)乳腺生物反應(yīng)器的敘述錯誤的是（）A.動物基因結(jié)構(gòu)與人類基因結(jié)構(gòu)相同B.乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的藥物是自然界沒有的C.可從具有目的基因的轉(zhuǎn)基因雌性動物乳汁中提取藥物D.乳腺生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因技術(shù)在畜牧業(yè)中的應(yīng)用5、在下列選項中，沒有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是（）A.利用秋水仙素處理幼苗，得到多倍體植株B.人工種子的培育C.利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株D.利用細胞工程培育脫毒馬鈴薯苗6、植物細胞工程在農(nóng)業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)等方面有若廣泛的應(yīng)用，并且取得了顯著的社會效益和經(jīng)濟效益。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.可使不易有性繁殖的藥用植物規(guī)?；蜆藴驶a(chǎn)B.可將轉(zhuǎn)入外源基因的植物營養(yǎng)器官培育成植株C.可以為藥用植物生產(chǎn)提供優(yōu)良的資源種苗D.可利用組織培養(yǎng)技術(shù)豐富藥用植物的有效成分7、下列關(guān)于基因工程的基本工具的說法中，正確的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和載體B.DNA連接酶可將任意的DNA片段通過形成磷酸二酯鍵而連接起來C.質(zhì)粒上必須有標記基因才可作為載體D.限制性核酸內(nèi)切酶一般不僅僅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子8、圖是采用平板劃線法的劃線后的示意圖。下列有關(guān)說法錯誤的是（）

A.劃線前，應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿底外側(cè)用記號筆畫出直線進行分區(qū)、標號B.在培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，除第一次劃線外，每一次劃線都從上一次劃線的末端開始C.接種和劃線都要在酒精燈火焰旁進行D.該實驗中，接種環(huán)的灼燒次數(shù)有3次評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、表中生物工程實驗選擇的材料與實驗?zāi)康拇钆浜侠淼氖牵ǎ?/p>

。組別實驗?zāi)康膶嶒灢牧喜牧咸攸cA獲得生產(chǎn)人生長激素的轉(zhuǎn)基因動物乳腺細胞分泌乳汁將相應(yīng)產(chǎn)物排出體外B獲得脫毒苗莖尖分生區(qū)附近病毒極少，甚至不含病毒C獲得植物突變體愈傷組織細胞分裂能力強，易誘發(fā)突變D胚胎干細胞培養(yǎng)囊胚內(nèi)細胞團能分化形成各種組織和器官A.AB.BC.CD.D10、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的正確觀點是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交11、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測。其原理是：先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后對得到的DNA進行PCR擴增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接受到熒光信號，即每個DNA分子擴增一次，就有一個熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環(huán)閾值）的含義為：每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說法錯誤的是（）

A.擴增過程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗熒光探針2n-1個C.C值越大表示被檢測樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測結(jié)果可能為陰性12、生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標。衛(wèi)生部門規(guī)定1000mL自來水37℃培養(yǎng)48h后大桿菌菌落數(shù)不能超過3個，于是他們設(shè)計實驗對此冰激凌進行檢測。下列實驗操作，不合理的是（）A.再去小店買一個同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C.取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板，共培養(yǎng)18個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD.統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小13、杜泊羊因其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點，成為受廣大消費者喜歡的綿羊品種。下圖是科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程。下列說法正確的是（）

A.杜泊羊的快速繁殖過程涉及動物細胞培養(yǎng)技術(shù)B.精子入卵后，被激活的卵母細胞完成減數(shù)分裂，進而排出第二極體C.受精作用結(jié)束后，受精卵即可進行有絲分裂和減數(shù)分裂D.在胚胎發(fā)育過程中，內(nèi)細胞團細胞發(fā)育成各種組織14、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說法中，錯誤的是（）A.果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌屬于兼性厭氧生物，在有氧條件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌，它是一種嚴格厭氧的微生物，可將葡萄中的糖分解為乙酸C.多種微生物參與了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物，可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸和二氧化碳15、某牧場引進一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊；為了在短時間內(nèi)獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場通過以下流程進行了相關(guān)操作。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.在體外受精前對采集到的精子要進行獲能處理B.用孕激素對供體母羊進行處理，可獲得更多的卵母細胞C.為避免受體母羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D.為了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)16、熒光原位雜交可用熒光標記的特異DNA片段為探針；與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標記的DNA片段D.若C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）18、通過統(tǒng)計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進行計數(shù)。19、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細胞多采用___________固定化。20、醋酸菌是一種____________細菌。醋酸生成反應(yīng)式是_____________________。21、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因為植物分生區(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲藏和運輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。23、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)24、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共18分)25、隨著游泳運動的普及；游泳池水質(zhì)安全問題越來越受到人們的重視。在游泳池池水凈化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物進行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，但游離性余氯含量過高會影響人體健康。國家標準規(guī)定的人工游泳池水質(zhì)指標衛(wèi)生標準包括游離性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成單位不得超過200個/mL等指標。研究人員對某地學(xué)校、酒店、健身會所、社區(qū)等場所游泳池水進行抽樣監(jiān)測，其中，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測的實驗步驟如下：

①采樣瓶的預(yù)處理：在采樣瓶中加入適量的Na2S2O3溶液后對采樣瓶進行滅菌處理。

②采樣：在客流高峰時段進行采樣。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接種：用滅菌吸管吸取水樣1mL；注入滅菌培養(yǎng)皿中。將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿15mL。立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。平行重復(fù)若干實驗組。

④計數(shù)：待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿；置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落數(shù)，并求平均值。

回答下列問題：

(1)檢測游泳池活細菌總數(shù)時，不宜用細菌計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯。據(jù)此分析步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液，對檢測的意義是_____________。

(3)步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在____________附近進行。為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置____________個實驗組。步驟③中還應(yīng)增加對照組，下列不宜作為對照組的是______________。

a．15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

b．1m無菌水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

c．1mL蒸餾水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

(4)步驟④中，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為_____________。若觀察到培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿中的菌落連成一片，則該培養(yǎng)皿不宜計數(shù)。出現(xiàn)成片的菌落的原因可能步驟③中_____________操作不妥當造成的。

(5)不同季度微生物檢測結(jié)果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．氣溫升高b．客流量增加。

c．檢測的場館數(shù)多d．泳池氯化時間過長。季度檢測場館數(shù)合格場館數(shù)合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理。下列屬于提升游泳池水質(zhì)安全性的合理建議有____________。

a．強制要求個人淋浴后入池b．增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次。

c．游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置d．每日在臨近開館前氯化消毒26、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。27、利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高；成本低等優(yōu)點。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

請回答：

（1）PCR擴增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應(yīng)將其與____________基因的啟動子等調(diào)控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是________________________，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ莀___________________。

（3）體外受精前精子要進行____________處理，過程②包括__________技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；可用___________技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技術(shù)。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)28、基因工程已成為生物科學(xué)的核心技術(shù)；在農(nóng)牧業(yè)；工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等多方面展示出美好前景。請回答下列問題∶

（1）通過基因工程的方法可實現(xiàn)β-珠蛋白的大量生產(chǎn)。若采用基因工程的方法使大腸桿菌產(chǎn)生鼠的β一珠蛋白；則目的基因最好從____文庫中獲取，原因是____________。

（2）利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)β一珠蛋白時；首先需要將β一珠蛋白基因與乳腺蛋白基因的_______等調(diào)控組件重組在一起，常通過_____方法將目的基因?qū)氩溉閯游锏氖芫阎?，進而培養(yǎng)出可在乳腺細胞中表達β一珠蛋白的轉(zhuǎn)基因動物。

（3）與利用乳腺生物反應(yīng)器相比，利用工程菌生產(chǎn)β一珠蛋白的優(yōu)點是___________________________。29、人參是一種名貴中藥材；具有良好的滋補作用。干擾素可用于治療慢性乙肝；丙肝及部分腫瘤。下圖為三種限制酶識別序列與酶切點及制備能合成干擾素的人參愈傷組織細胞的示意圖。請回答：

（1）圖中①的DNA用HindⅢ、BamHI完全酶切后，反應(yīng)管中有__________種DNA片段。利用PC技術(shù)擴增干擾素基因時，擴增第n次時，需要__________個引物，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是__________

（2）假設(shè)圖中質(zhì)粒上BamHI識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶BcI識別位點的堿基序列，現(xiàn)用BclI和HindⅢ切割質(zhì)粒，那么該圖中①的DNA右側(cè)選擇__________進行切割，理由是__________。形成的重組質(zhì)粒能被__________切開。

（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，用HindⅢ、BamHI切割質(zhì)粒和目的基因比只用BamHI好，這樣可以防止__________和__________。②過程需要用到的酶是__________。

（4）④過程檢測人參愈傷組織細胞是否產(chǎn)生干擾素，所用的方法是__________。

（5）轉(zhuǎn)基因植物所攜帶的目的基因可能傳遞給非轉(zhuǎn)基因植物，造成基因污染。如果將目的基因?qū)肴~綠體DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是__________。30、腐乳是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵的大豆食品；該食品味道鮮美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存，所以深受人們的喜歡。如圖是腐乳制作的流程，根據(jù)流程回答問題：

（1）在豆腐上長出毛霉時；溫度控制在_____℃，毛霉是_____核生物，代謝類型為_________________。流程圖中未寫出的流程是_____。

（2）含水量為_____左右的豆腐適合用來做腐乳。制作過程中；加鹽的作用是_____________。

（3）制作腐乳的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成___________和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解為___________。

（4）傳統(tǒng)工藝制作腐乳；豆腐塊上的毛霉來自_____，現(xiàn)代工藝生產(chǎn)腐乳是在嚴格________________的條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種直接接種在豆腐上。

（5）吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”，這層“皮”是____________；影響腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的因素是_____________（至少列舉兩項）。31、科研工作者將蘇云金芽孢桿菌的Bt抗蟲基因?qū)肫胀ㄆ废得藁ǎ@得了三個純合抗蟲品系甲、乙和丙。將三個抗蟲品系與普通品系棉花雜交，F(xiàn)1均抗蟲，且F1自交所得F2抗蟲：不抗蟲均為3：1。

(1)采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入Bt基因；需先將Bt基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的__________上。以上實驗結(jié)果表明，在甲；乙，丙三個品系中Bt基因均已整合到棉花的__________上，其遺傳遵循孟德爾__________定律。

(2)將三個品系相互雜交，所得F1自交，得到F2；結(jié)果如下：

甲×乙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

乙×丙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

甲×丙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=99：1

判斷甲；乙、兩三個品系中Bt基因所插入染色體的位置關(guān)系是____________________；

讓甲、乙雜交的F1與乙、丙雜交的F1雜交；后代中抗蟲：不抗蟲=_________________________。

(3)通過基因工程另獲一對純合抗蟲基因的品系??；若要通過雜交實驗來確定丁品系中的Bt基因插入了新的染色體上，還是和甲或乙或丙的Bt基因位于同一條染色體上，請寫出。

①實驗思路：_________________________________________________________。

②預(yù)期實驗結(jié)果和結(jié)論：____________________________________________________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

乳酸桿菌是原核生物；無核膜和細胞器膜。

【詳解】

A；毛霉是真核生物；A錯誤；

B；根霉是真核生物；B錯誤；

C；酵母菌真核生物；C錯誤；

D；醋酸菌是原核生物；D正確。

故選D。2、C【分析】【分析】

限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；故每一種限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，A正確；

B；酶的作用條件溫和；酶的活性易受溫度、pH等條件的影響，故限制酶的活性受溫度的影響，B正確；

C；限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，不能識別和切割RNA，C錯誤；

D；限制酶主要從原核生物中提??；D正確。

故選C。

【點睛】3、B【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。

【詳解】

A；重組細胞重新編程為全能干細胞后；細胞中有氧呼吸酶的含量基本不變，A錯誤；

B；重組細胞重新編程為全能干細胞后；細胞中DNA聚合酶的含量明顯增加，為DNA復(fù)制做準備，B正確；

C；細胞骨架是細胞中由蛋白質(zhì)纖維組成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)；屬于結(jié)構(gòu)物質(zhì)，在該過程中含量不變，C錯誤；

D；細胞膜蛋白屬于細胞結(jié)構(gòu)的一部分；當重組細胞重新編程為全能干細胞后，細胞膜蛋白應(yīng)該不會發(fā)生明顯變化，D錯誤。

故選B。

【點睛】4、B【分析】【分析】

1；乳腺生物反應(yīng)器即人類通過對某種動物的遺傳基因進行改造；使這些動物的乳腺可以產(chǎn)生和分泌出人們所需要的某些物質(zhì)，可以節(jié)省建設(shè)廠房和購買儀器設(shè)備費用，可以減少生產(chǎn)程序和環(huán)境污染，因此這里所說的“某結(jié)構(gòu)’是指該動物的遺傳基因。

2；乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點是：（1）動物的基因組成和人類相似；從人類染色體上切下來的任何基因都可以直接轉(zhuǎn)移到動物體內(nèi)。（2）動物乳腺細胞可以是任何基因正確表達，并正確進行后加工。（3）用動物乳腺生產(chǎn)外源蛋白質(zhì)產(chǎn)量很高。用動物乳腺生產(chǎn)藥品不需要產(chǎn)品提純，不需要復(fù)雜設(shè)備，動物吃的是草，生產(chǎn)的是奶，奶中含有珍貴的蛋白質(zhì)，因此，“乳腺生物反應(yīng)器”是人們公認的、最理想的生物反應(yīng)器。

【詳解】

A；動物基因結(jié)構(gòu)與人類基因結(jié)構(gòu)相同；都是雙螺旋結(jié)構(gòu)，A正確；

B；乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的藥物是自然界已經(jīng)存在的；B錯誤；

C；乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物在轉(zhuǎn)基因雌性動物泌乳期產(chǎn)生的乳汁中提??；C正確；

D；乳腺生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因技術(shù)在畜牧業(yè)中的應(yīng)用；D正確。

故選B。5、A【分析】【分析】

由配子直接發(fā)育的個體稱為單倍體；用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗得到的不一定是多倍體植株；也可能是二倍體植株；人工種子是指通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通過人工薄膜包裝得到的種子。

【詳解】

A；利用秋水仙素處理幼苗得到多倍體植株的過程中；秋水仙素抑制紡錘體的形成，幼苗自然生長，沒有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，A正確；

B；人工種子是指通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；通過人工薄膜包裝得到的種子，可見該過程需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，B錯誤；

C；由配子直接發(fā)育的個體稱為單倍體；花藥中的花粉是植物的配子，所以采用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株，需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C錯誤；

D；利用根尖、莖尖等分生區(qū)組織進行植物組織培養(yǎng)可獲取脫毒馬鈴薯苗；D錯誤。

故選A。

【點睛】6、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)是在人為創(chuàng)造的無菌條件下將生物的離體器官；組織或細胞置于培養(yǎng)基內(nèi)；并放在適宜的環(huán)境中，進行連續(xù)培養(yǎng)以獲得細胞、組織或個體的技術(shù)。

【詳解】

A；植物細胞工程可以利用無性繁殖人工培養(yǎng)使不易有性繁殖的藥用植物規(guī)?；蜆藴驶a(chǎn)；A正確；

B；將轉(zhuǎn)入外源基因的植物營養(yǎng)器官；然后通過植物細胞工程將營養(yǎng)器官培育成植株，B正確；

C；通過植物組織培養(yǎng)可以脫除植物的病毒；因此可以用藥用植物生產(chǎn)提供優(yōu)良的資源種苗，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)技術(shù)不會改變植物本身的特性；不可利用組織培養(yǎng)技術(shù)豐富藥用植物的有效成分，D錯誤。

故選D。

7、C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動植物病毒。

【詳解】

A；限制酶和DNA連接酶才是基因工程的工具酶；載體不是酶，A錯誤；

B；DNA連接酶只能催化具有互補黏性末端或平末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵；B錯誤；

C；質(zhì)粒作為載體的必備條件之一就是要有標記基因；C正確；

D；限制酶不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保護自身DNA的安全，D錯誤。

故選C。8、D【分析】【分析】

平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。不能用于計數(shù)。

【詳解】

A；實驗過程中使用的平板較多；避免混淆，使用前做好標記，應(yīng)在劃線前，在培養(yǎng)皿的皿底外側(cè)用記號筆畫出直線進行分區(qū)、標號，A正確；

B；在培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線；除第一次劃線外，每一次劃線都從上一次劃線的末端開始，目的是使微生物數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終分散成單個細胞，B正確；

C；微生物實驗操作要防止雜菌污染；因此接種和劃線都要在酒精燈火焰旁進行，C正確；

D；每次劃線前后都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌；該實驗劃線三次，因此灼燒次數(shù)為4次，D錯誤。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)9、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的內(nèi)細胞團細胞屬于胚胎干細胞；具有很強的分裂能力，可以用胚胎干細胞培養(yǎng)；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時，受體細胞是受精卵，因為受精卵全能性最高。

【詳解】

A；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時；受體細胞是受精卵而不是乳腺細胞，因為受精卵全能性最高，A錯誤；

B；植物分生區(qū)附近（如莖尖）含病毒極少；甚至不舍病毒，因此可采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，B正確；

C；愈傷組織分裂能力強；易發(fā)生突變，容易獲得突變體，C正確；

D；囊胚的內(nèi)細胞團細胞具有很強的分裂能力；可以用于胚胎干細胞培養(yǎng)，進而誘導(dǎo)培養(yǎng)成各種組織和器官，D正確。

故選BCD。10、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

我國反對以克隆人為目的任何實驗和舉動；主要是基于以下四方面的倫理考慮：

1；克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)；

2；克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律；

3；克隆人將擾亂社會家庭的正常倫理定位；

4；克隆人的安全性在倫理上也難以確認。

【詳解】

A；設(shè)計試管嬰兒性別會引起性別比例失調(diào)；違背倫理道德，我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A錯誤；

B；基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗；但不反對治療性克隆，C正確；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯誤。

故選BC。11、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；基因擴增過程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點，擴增過程中引物和探針應(yīng)同時結(jié)合到模板DNA上，A錯誤；

B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子，每個DNA分子需要1個探針，擴增n次，可得到2n個DNA分子，則共需要消耗2n-1個探針；B錯誤；

C；由題可知C值越大；該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大，即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少，代表被檢測樣本中的病毒數(shù)目越少，C錯誤；

D；如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解；會導(dǎo)致無法檢測出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目，D正確。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)。

2；稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目的原理：①當樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；若只對一個冰激凌進行檢測；樣品太少則不能確定是某個冰激凌的質(zhì)量問題還是這個品牌冰激凌的質(zhì)量問題，正確的做法是再去小店隨機買多個同樣品牌的同種冰激凌，A錯誤；

B、測定細菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×106；B錯誤；

C；實驗應(yīng)該設(shè)置對照；取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板，再取一個平板接種等量無菌水（作為對照），共培養(yǎng)19個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當對照組無菌落生長時，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，C錯誤；

D；因為當兩個或多個細胞連在一起時；平板上觀察到的只是一個菌落，故統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小，該說法合理，D正確。

故選ABC。13、A:B:D【分析】【分析】

14、B:D【分析】【分析】

參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌，常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有發(fā)達的白色菌絲。毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒的制作原理是酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精；酵母菌屬于兼性厭氧生物，在有氧條件下大量繁殖，A正確；

B；制作果醋需要醋酸菌；它是一種好氧的微生物，可將葡萄中的糖（或乙醇）分解為乙酸，B錯誤；

C；多種微生物參與了腐乳的制作；如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正確；

D；制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物；可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，D錯誤。

故選BD。15、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體）。用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對胚胎的收集；檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查；此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑甚胚或胚囊胚階段。④對胚胎進行移植。

⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；采集到的良種公羊的精子；在體外受精前要進行獲能處理，A正確；

B；對本地母羊注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；進而獲得更多卵母細胞，B錯誤；

C；受體母羊?qū)σ迫胱訉m的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；不需要注射免疫抑制劑，C錯誤；

D；采用胚胎分割技術(shù)可提高已有胚胎的利用率；D正確。

故選BC。16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)；是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

3；目的基因的檢測與鑒定：

分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標記的DNA片段，C錯誤；

D、由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個熒光點；經(jīng)間期復(fù)制加倍，有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點，D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30019、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、判斷題(共1題，共5分)24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實驗題(共3題，共18分)25、略

【分析】【分析】

統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（1）

測定培養(yǎng)液中游泳池活細菌總數(shù)可以使用稀釋涂布平板法進行計數(shù)；而顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

（2）

氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測，步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免殘留氯殺菌。

（3）

微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意無菌操作；故步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在酒精燈火焰附近進行；為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置3個實驗組；微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意避免雜菌污染，由于蒸餾水中含有較多的雜質(zhì)和微生物，故不宜用作對照組，故選c。

（4）

步驟④中；用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；出現(xiàn)成片的菌落的原因可能是水樣與培養(yǎng)基沒有混勻，是步驟③中旋搖操作不充分造成的。

（5）

a；氣溫升高會導(dǎo)致微生物繁殖加快；導(dǎo)致合格率降低，a正確；

b、客流量增加，攜帶的微生物增多，導(dǎo)致合格率降低，b正確；

c；由于不同場館分別計數(shù)；故檢測的場館數(shù)多不是導(dǎo)致合格率降低的原因，c錯誤；

d；泳池氯化時間過長會殺滅更多的微生物；不是導(dǎo)致合格率降低的原因，d錯誤。

故選ab。

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理，可增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次、游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置，強制要求個人淋浴后入池不現(xiàn)實，每日在臨近開館前氯化消毒，余氯含量過高會影響人體健康，故選bc?！窘馕觥?1)顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

(2)避免余氯殺菌。

(3)酒精燈火焰3c

(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落旋搖

(5)abbc

26、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異27、略

【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因奶牛的產(chǎn)生采用了體外受精（精子的采集和獲能；卵母細胞的采集和培養(yǎng)、受精）、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

（1）參與PCR的主要物質(zhì)：引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等；故主要使用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）?；虮磉_載體包括目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點和標記基因等，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組。

（2）基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法。

（3）體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)。成熟的精子在受精前需獲能處理；過程②包括早期胚胎培養(yǎng)（動物細胞培養(yǎng)）技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。為了獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢；可進行胚胎分割，操作時的注意事項是將囊胚階段的內(nèi)細胞團均等分割。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白；根據(jù)抗原特異性結(jié)合原理，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

【點睛】

本題考查基因工程等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟；蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。能根據(jù)題干信息設(shè)計實驗，綜合考察運用生物學(xué)知識解決實際問題的能力?！窘馕觥繜岱€(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表達載體的構(gòu)建顯微注射法獲能早期胚胎培養(yǎng)（動物細胞培養(yǎng)）胚胎分割抗原—抗體雜交六、綜合題(共4題，共24分)28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。◤幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)體外擴增、化學(xué)合成法）；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與鑒定。基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

2；將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；其次還有基因槍法和花粉管通道法等．將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)。此方法的受體細胞多是受精卵。

【詳解】

（1）若采用基因工程的方法使大腸桿菌產(chǎn)生鼠的B一珠蛋白；則目的基因最好從cDNA文庫中獲取，原因是大腸桿菌是原核生物，cDNA文庫中沒有內(nèi)含子（非編碼序列），基因結(jié)構(gòu)與原核細胞的基因結(jié)構(gòu)更接近。

（2）利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)β—珠蛋白時；首先需要將β—珠蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子和終止子重組在一起，常通過顯微注射的方法將目的基因?qū)氩溉閯游锏氖芫阎?，進而培養(yǎng)出可以在乳腺細胞中表達β—珠蛋白的轉(zhuǎn)基因動物。

（3）與利用乳腺生物反應(yīng)器相比；利用工程菌生產(chǎn)β—珠蛋白的優(yōu)點是工程菌代謝旺盛，繁殖周期短，可以在短期內(nèi)實現(xiàn)目的基因的大量擴增和表達。

【點睛】

本題主要考查基因工程的原理和技術(shù)，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，準確判斷問題的能力。【解析】cDNA大腸桿菌是原核生物，cDNA文庫中沒有內(nèi)含子（非編碼序列），基因結(jié)構(gòu)與原核細胞的基因結(jié)構(gòu)更接近啟動子和終止子顯微注射工程菌代謝旺盛，繁殖周期短，可以在短期內(nèi)實現(xiàn)目的基因的大量擴增和表達29、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1；目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

2；基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

3；將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

4；目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）圖中①的DNA有1個HindⅢ和兩個BamHI酶切位點，用HindⅢ、BamHI完全酶切后，反應(yīng)管中有4種DNA片段。利用PC技術(shù)擴增干擾素基因時，擴增第1次時，需要2個引物，擴增第2次時，需要4個引物，所以擴增第n次時，需要2n個引物；設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列。

（2）BamHⅠ；BclⅠ切割后的黏性末端相同。假設(shè)圖中質(zhì)粒上BamHI識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶BcI識別位點的堿基序列；現(xiàn)用BclI和HindIll切割質(zhì)粒，那么該圖中①的DNA右側(cè)選擇BamHⅠ進行切割，理由是BamHⅠ、BclⅠ切割后的黏性末端相同。形成的重組質(zhì)粒能被HindⅢ切開。

（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中；用Hindlll；BamHI兩種酶切割質(zhì)粒和目的基因比只用BamHI好，這樣可以防止目的基因的自身環(huán)化和目的基因反向接入質(zhì)粒。②過程需要用到的酶是DNA連接酶。

（4）④過程檢測人參愈傷組織細胞是否產(chǎn)生干擾素；所用的方法是抗原-抗體雜交。

（5）轉(zhuǎn)基因植物所攜帶的目的基因可能傳遞給非轉(zhuǎn)基因植物；造成基因污染。如果將目的基因?qū)肴~綠體DNA中，葉綠體基因不會通過花粉傳給下一代，就可以有效避免基因污染。

【點睛】

本題結(jié)合圖示考查基因工程和PCR的相關(guān)知識，意在考察學(xué)生對基因工程的基本步驟過程的記憶和理解?！窘馕觥?2n干擾素基因兩端的部分核苷酸序列BamHⅠBamHⅠ、BclⅠ切割后的黏性末端相同HindⅢ目的基因的自身環(huán)化目的基因反向接入質(zhì)粒DNA連接酶抗原-抗體雜交葉綠體